革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法
，1884年由丹麥醫師Gram創立。

　　細(xi)菌(jun)先(xian)經(jing)堿(jian)性(xing)染(ran)料(liao)結(jie)晶(jing)染(ran)色(se)，而(er)經(jing)碘(dian)液(ye)媒(mei)染(ran)後(hou)
，用(yong)酒(jiu)精(jing)脫(tuo)色(se)，在(zai)一(yi)定(ding)條(tiao)件(jian)下(xia)有(you)的(de)細(xi)菌(jun)此(ci)色(se)不(bu)被(bei)脫(tuo)去(qu)，有(you)的(de)可(ke)被(bei)脫(tuo)去(qu)，因(yin)此(ci)可(ke)把(ba)細(xi)菌(jun)分(fen)為(wei)兩(liang)大(da)類(lei)，前(qian)者(zhe)叫(jiao)做(zuo)革(ge)蘭(lan)氏(shi)陽(yang)性(xing)菌(jun)（G+），後者為革蘭氏陰性菌（G―）。為wei觀guan察cha方fang便bian，脫tuo色se後hou再zai用yong一yi種zhong紅hong色se染ran料liao如ru堿jian性xing蕃bo紅hong等deng進jin行xing複fu染ran。陽yang性xing菌jun仍reng帶dai紫zi色se
，陰yin性xing菌jun則ze被bei染ran上shang紅hong色se。有you芽ya胞bao的de杆gan菌jun和he絕jue大da多duo數shu和he球qiu菌jun，以yi及ji所suo有you的de放fang線xian菌jun和he真zhen菌jun都dou呈cheng革ge蘭lan氏shi正zheng反fan應ying；弧菌，螺旋體和大多數致病性的無芽胞杆菌都呈現負反應。

　　革ge蘭lan氏shi陽yang性xing菌jun和he革ge蘭lan氏shi陰yin性xing菌jun在zai化hua學xue組zu成cheng和he生sheng理li性xing質zhi上shang有you很hen多duo差cha別bie
，染ran色se反fan應ying不bu一yi樣yang。現xian在zai一yi般ban認ren為wei革ge蘭lan氏shi陽yang性xing菌jun體ti內nei含han有you特te殊shu的de核he蛋dan白bai質zhi鎂mei鹽yan與yu多duo糖tang的de複fu合he物wu，它ta與yu碘dian和he結jie晶jing紫zi的de複fu合he物wu結jie合he很hen牢lao，不bu易yi脫tuo色se，陰yin性xing菌jun複fu合he物wu結jie合he程cheng度du底di
，吸xi附fu染ran料liao差cha
，易yi脫tuo色se，這zhe是shi染ran色se反fan應ying的de主zhu要yao依yi據ju。 　　另外，陽性菌菌體等電點較陰性菌為低，在相同PH條tiao件jian下xia進jin行xing染ran色se

，陽yang性xing菌jun吸xi附fu堿jian性xing染ran料liao很hen多duo
，因yin此ci不bu易yi脫tuo去qu，陰yin性xing菌jun則ze相xiang反fan。所suo以yi染ran色se時shi的de條tiao件jian要yao嚴yan格ge控kong製zhi。例li如ru，在zai強qiang堿jian的de條tiao件jian下xia進jin行xing染ran色se，兩liang類lei菌jun吸xi附fu堿jian性xing染ran料liao都dou多duo，都dou可ke呈cheng正zheng反fan應ying；PH很低時，則可都呈負反應。此外
，兩類菌的細胞壁等對結晶紫―碘複合物的通透性也不一致
，陽性菌透性小，故不易被脫色
，陰性菌透性大，易脫色。所以脫色時間
，脫色方法也應嚴格控製。 　　革蘭氏染色法一般包括初染
、媒染、脫色、複染等四個步驟，具體操作方法是：

　　１）塗片固定。

　　２）草酸銨結晶紫染1分鍾。

　　３）自來水衝洗。

　　４）加碘液覆蓋塗麵染1分鍾。

　　５）水洗
，用吸水紙吸去水分。

　　６）加95%酒精數滴
，並輕輕搖動進行脫色，30秒後水洗，吸去水分。

　　７）蕃紅梁色液（稀）染10秒鍾後
，自來水衝洗。幹燥，鏡檢。

　　染色的結果，革蘭氏正反應菌體都呈紫色
，負反應菌體都呈紅色。

　　下麵是革蘭氏陰性杆菌和革蘭氏陽性杆菌。