王華

中國檢驗認證集團山東有限公司

摘要：在HACCP體ti係xi的de建jian立li和he實shi施shi過guo程cheng中zhong，控kong製zhi病bing原yuan微wei生sheng物wu一yi直zhi是shi各ge類lei食shi品pin加jia工gong的de重zhong點dian。快kuai速su檢jian測ce食shi品pin中zhong病bing原yuan微wei生sheng物wu不bu僅jin有you利li於yu食shi品pin安an全quan管guan理li體ti係xi及ji時shi驗yan證zheng控kong製zhi措cuo施shi實shi施shi效xiao果guo，而er且qie有you利li於yu對dui潛qian在zai不bu安an全quan產chan品pin迅xun速su采cai取qu糾jiu正zheng和he糾jiu正zheng措cuo施shi。對dui食shi源yuan性xing病bing原yuan微wei生sheng物wu進jin行xing準zhun確que
、靈敏、省時、省力和省成本的快速檢驗方法已經成為保證食品安全的迫切需求。食品檢測中常用的病原微生物快速檢測方法包括分子生物學技術、免疫學技術、代謝技術、紙片法、細菌直接計數法、噬菌體鑒定技術、全自動微生物分析係統等。本文對上述各種快速檢測食品中微生物的方法的研究進展作一綜述。

關鍵詞：快速檢測；病原微生物；食品；安全

Abstract: During the establishing and implementation of HACCP and Food Safety Management System, the most important thing is always the controllment of pathogenic microorganism. The quick inspection methods for pathogenic microorganism in food are benefit for not only verifing the control measures in time, but also taking corretion and correction measures to potential unsafety food. It is necessary for food safety to make quick inspection of pathogenic microorganisms, for the virtue of accuation, sensitivity, time-saving, labor-saving and low costaction. The quick inspection methods of pathogenic microorganisms in the food include molecular biology detection method, immunology method, metabolic method, quick inspection paper, bacterium direct counting method, automatic microbial monitoring system etc.  This article has summarized the quick inspection methods of pathogenic microorganisms in the food.

Key words: Quick inspection；Pathogenic Microorganisms；Food；Safety

食品安全問題一直是各國政府和人民群眾最為關心的問題
，由病原微生物引起的食源性疾病是影響食品安全的最主要的因素之一。在HACCP體係的建立和實施過程中
，病原微生物一直是各類食品加工行業控製的重點。目前，傳統的食源性病原菌的檢測、鑒定仍停留在分離培養
、形態觀察、生化鑒定和血清學分型水平。這些方法操作煩瑣、需要時間較長、準(zhun)備(bei)和(he)收(shou)尾(wei)工(gong)作(zuo)繁(fan)重(zhong)，檢(jian)測(ce)周(zhou)期(qi)較(jiao)長(chang)
，而(er)且(qie)無(wu)法(fa)對(dui)難(nan)以(yi)培(pei)養(yang)的(de)病(bing)原(yuan)菌(jun)進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)，因(yin)此(ci)病(bing)原(yuan)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)往(wang)往(wang)存(cun)在(zai)不(bu)同(tong)程(cheng)度(du)的(de)滯(zhi)後(hou)性(xing)。這(zhe)不(bu)僅(jin)不(bu)利(li)於(yu)食(shi)品(pin)安(an)全(quan)管(guan)理(li)體(ti)係(xi)及(ji)時(shi)驗(yan)證(zheng)控(kong)製(zhi)措(cuo)施(shi)實(shi)施(shi)效(xiao)果(guo)
，而(er)且(qie)不(bu)利(li)於(yu)對(dui)潛(qian)在(zai)不(bu)安(an)全(quan)產(chan)品(pin)迅(xun)速(su)采(cai)取(qu)糾(jiu)正(zheng)和(he)糾(jiu)正(zheng)措(cuo)施(shi)。對(dui)食(shi)源(yuan)性(xing)致(zhi)病(bing)菌(jun)進(jin)行(xing)準(zhun)確(que)
、靈敏
、省時、省力和省成本的快速檢驗方法已經成為保證食品安全的迫切需求。

1.1 分子生物學技術

1.1.1 多聚酶鏈式反應技術（PCR）

PCR的基本原理是在體外對特定的雙鏈DNA片斷進行高效擴增
，故又稱基因體外擴增法。通過體外酶促反應合成特異性DNA片段，再通過擴增產物來識別細菌。由於PCR靈敏度高，理論上可以檢出一個細菌的拷貝基因，因此在細菌的檢測中隻需短時間增菌甚至不增菌，即可通過PCR進行篩選，節約了大量時間。但PCR技術也存在一些缺點：食物成分、增菌培養基成分和其他微生物DNA對Taq酶具有抑製作用，可能導致檢驗結果假陰性；操作過程要求嚴格，微量的外源性DNA進入PCR後可以引起無限放大產生假陽性結果
；擴增過程中有一定的裝配誤差
，會對結果產生影響。美國快力康公司推出了全球第一台PCR全自動檢測儀BAX係統
，克服了手工操作PCR的缺點，能用於檢測細菌，敏感性和特異性都非常好。

1.1.2基因探針技術

DNA探針是利用同位素
、生物素等標記的特定DNA片斷。DNA探針技術又稱分子雜交技術
，是利用DNA分子的變性、複性以及堿基互補配對的高度精確性
，采用高度特異性基因片段製備基因探針來識別細菌的新技術。法國生物一梅裏埃公司的GEN?PROBE基因探針檢測係統，能夠在30分鍾內完成對於分離到的單個菌落的確證試驗[1]。目前
，DNA探針技術已經在沙門氏菌
、產chan腸chang毒du素su大da腸chang杆gan菌jun及ji乙yi型xing肝gan炎yan病bing毒du等deng檢jian測ce中zhong得de到dao了le應ying用yong。基ji因yin探tan針zhen的de優you點dian是shi減jian少shao了le基ji因yin片pian段duan長chang度du多duo態tai性xing所suo需xu要yao分fen析xi的de條tiao帶dai數shu，但dan是shi缺que點dian是shi不bu能neng鑒jian定ding目mu標biao菌jun以yi外wai的de其qi他ta菌jun。

1.1.3 基因芯片技術

基因芯片是采用微加工和微電子技術將各種基因寡核苷酸有序地、高密度地排列在玻璃片或纖維膜等載體上而得到的一種信息檢測芯片。微生物樣品DNA經PCR擴kuo增zeng後hou製zhi備bei熒ying光guang標biao記ji探tan針zhen
，然ran後hou再zai與yu芯xin片pian上shang寡gua核he苷gan酸suan點dian雜za交jiao
，通tong過guo掃sao描miao儀yi定ding量liang分fen析xi熒ying光guang分fen布bu模mo式shi從cong而er來lai確que定ding檢jian測ce樣yang品pin是shi否fou存cun在zai某mou些xie特te定ding微wei生sheng物wu。理li論lun上shang，基ji因yin芯xin片pian可ke以yi在zai一yi次ci實shi驗yan中zhong檢jian出chu所suo有you潛qian在zai的de致zhi病bing原yuan，也ye可ke以yi用yong同tong一yi張zhang芯xin片pian檢jian測ce某mou一yi致zhi病bing原yuan的de各ge種zhong遺yi傳chuan學xue指zhi標biao，具ju有you簡jian便bian快kuai速su
、特異性強、靈敏度高
、可並行檢測等優點
，因而在食品檢測領域有著廣泛的發展前景。李君文[2]等建立了以基因芯片技術為基礎的水中常見致病菌的快速檢測與鑒定技術，其檢測水中常見致病菌的敏感性可達5．6×10 個／mL細菌菌落的核酸。Carl等[3]對大腸埃希菌

、痢疾杆菌
、傷(shang)寒(han)杆(gan)菌(jun)和(he)空(kong)腸(chang)彎(wan)曲(qu)菌(jun)采(cai)用(yong)了(le)基(ji)因(yin)芯(xin)片(pian)的(de)檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)，其(qi)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)不(bu)僅(jin)敏(min)感(gan)度(du)高(gao)於(yu)傳(chuan)統(tong)方(fang)法(fa)，而(er)且(qie)操(cao)作(zuo)簡(jian)單(dan)
，重(zhong)複(fu)性(xing)好(hao)，並(bing)且(qie)節(jie)省(sheng)了(le)大(da)量(liang)時(shi)間(jian)
，大(da)大(da)提(ti)高(gao)了(le)4種細菌診斷效率。Volokhov[4]通過單管複合體PCR擴增和基因芯片技術成功地檢測和鑒別了6種李斯特菌。Call等[5]通過分析E．coli O ：H 的Shiga樣毒素I,Shiga樣毒素Ⅱ及溶血素A，發現基因芯片可準確檢測各種E．coli O157：H7分離物。

然而

，基因芯片技術剛剛發展起來，許多地方還有待改進，如檢測成本高昂

；檢測特異性有待提高
；樣品製備過程應該進一步簡化以及建立標準化程序等。

免mian疫yi學xue技ji術shu通tong過guo抗kang原yuan和he抗kang體ti的de特te異yi性xing結jie合he反fan應ying
，再zai輔fu以yi免mian疫yi放fang大da技ji術shu來lai鑒jian別bie細xi菌jun。免mian疫yi法fa有you較jiao高gao靈ling敏min度du

，樣yang品pin在zai進jin行xing選xuan擇ze性xing增zeng菌jun後hou，抗kang原yuan和he抗kang體ti的de結jie合he反fan應ying可ke在zai很hen短duan時shi間jian內nei完wan成cheng達da到dao檢jian出chu度du
，不bu需xu分fen離li
，即ji可ke采cai用yong免mian疫yi技ji術shu進jin行xing篩shai選xuan。

1.2.1 乳膠凝集反應

乳膠凝集反應是利用抗原與抗體特異性結合的特性，加上人工大分子的乳膠顆粒而發生肉眼可見的凝集反應。Aureus Test用於食品樣品中金黃色葡萄球菌的檢測
，該試劑盒中含有對免疫抗蛋白A Ig G和鞭毛蛋白敏感的聚苯乙烯乳膠粒子，因細菌蛋白A和Ig G結合
，凝聚酶和鞭毛抗原結合，所以當含有金黃色葡萄球菌的樣品懸浮液加入含乳膠粒子的試劑盒中時1分鍾內將產生凝集反應。該法的靈敏度和特異性均較高。

1.2.2 酶聯免疫法（ELISA）

ELISA是把抗原抗體免疫反應的特異性和酶的高效催化作用有機地結合起來的一種檢測技術
，它既可測抗原，也可測抗體。ELISA法可用於檢測食品中李斯特菌
、沙門氏菌、大腸杆菌O157、彎曲杆菌、假單胞菌屬、致賀氏菌、副溶血性弧菌、霍亂弧菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢杆菌等。趙誌晶等[6]建立了適宜食品樣品中大腸杆菌O157：H7
，檢測的雙抗ELISA方法，經過增菌
，雞肉與牛奶染菌樣品中的檢出限為0.1CFU／g(CFU/mL)。Cryan等[7]在研究大腸埃希氏杆菌(Escherichia coli．)內毒素時
，將ELISA法與DNA探針技術等進行比較，發現ELISA技術更靈敏、快速。此外
，ELISA法還可用於食品介導的病毒的檢測，目前我國已完成了禽流感流行株的分離和鑒定
、禽流感重組核蛋白診斷抗原的研製及應用

，建立了禽流感免疫酶診斷方法和技術，已具備試劑盒生產能力。

1.2.3 免疫磁性分離法

mianyicixingfenlifangfa，shijiangteyixingkangtioulianzaicixingkelibiaomian，yuyangpinzhongbeijianzhibingweishengwufashengteyixingjiehe，zaiyouzhibingweishengwudecixingkelizaiwaijiacichangdezuoyongxia，xiangcijifangxiangjuji，tongguoqiqujianyanghunheye
，shizhibingweishengwubudandedaofenli，erqieyededaonongjidefangfa。youyushipinjianyangchangweiguyeduoxianghunheti
，caiyongchangguifangfananyijiangshaoliangdezhibingweishengwufenlichulai。mianyicixingfenlijishuyiqiteyoudexingneng
，zaishipinweishengjianceheyanjiuzhongqudelejiaohaodejieguo。Skjelse等[8]報道了用免疫磁性分離技術從乳及乳製品
、肉類和蔬菜中分離出沙門氏菌，其檢測限為10-20個/g。Chapman等[9]報道了在英國由牛奶引起的大腸杆菌O157:H7感染，可疑食物通過微生物學方法得到證實，但檢驗結果的準確快捷主要緣於免疫磁性分離技術的成功應用。Skjerve等[10]用抗李斯特菌鞭毛抗原的單克隆抗體包被磁性微球

，捕獲增菌食物中的單核細胞增生性李斯特菌。采用免疫磁珠法可有效地收集、濃縮副溶血性弧菌，可顯著提高環境樣品及食品中病原性副溶血性弧菌的檢出率[11] 。

1.2.4 微型自動熒光酶標分析法(mini VIDAS)

mini VIDAS是利用酶聯熒光免疫分析技術，通過抗原-抗體特異反應，分離出目標菌
，由特殊儀器根據熒光的強弱自動判斷樣品的陽性或陰性。VIDAS法檢測食品沙門菌較常規法敏感特異，用其檢測為陰性的樣品能很快作出非沙門菌的判斷，比常規法可提前2～3天。VIDAS法用於進出口凍肉的檢測
，可大大縮短檢驗時間，加快通關速度[12]
，檢測凍肉中李斯特氏菌亦如此[13]。

1.3.1 ATP生物發光法

ATP生物發光法是近年發展較快的一種用於食品生產加工設備潔淨度檢測的快速檢測方法。利用ATP生物發光分析技術和體細胞清除技術測量細菌ATP和體細胞ATP，推算出樣品中的含菌量。由於生物發光法無需培養過程，操作簡便、靈敏度高，因此在短時間內即可得到檢測結果，具有其它微生物檢測方法無可比擬的優勢。ATP 生物發光分析技術已經用於肉類食品細菌汙染狀況及食品器具的現場衛生學檢測[14][15]。

1.3.2 電阻抗技術

電阻抗法的原理是細菌在生長繁殖中，將培養基中的碳水化合物、蛋白質和脂類等大分子電惰性物質
，代謝為具有電活性的乳酸鹽、醋(cu)酸(suan)鹽(yan)等(deng)小(xiao)分(fen)子(zi)物(wu)質(zhi)，使(shi)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)阻(zu)抗(kang)發(fa)生(sheng)變(bian)化(hua)
，通(tong)過(guo)檢(jian)測(ce)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)電(dian)阻(zu)抗(kang)變(bian)化(hua)情(qing)況(kuang)，判(pan)定(ding)細(xi)菌(jun)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)的(de)生(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)特(te)性(xing)
，檢(jian)測(ce)出(chu)相(xiang)應(ying)的(de)細(xi)菌(jun)。該(gai)法(fa)具(ju)有(you)檢(jian)測(ce)速(su)度(du)快(kuai)
、靈敏度高、準確性好等優點

，目前已經用於細菌總數、黴菌
、酵母菌、大腸杆菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等的檢測。。Martins 和Selby 用直接阻抗法精確測定了汙染肉製品中大腸菌的含量。Quinn等[16]分別用傳統培養技術與3種快速檢測方法(阻抗法、基因探針法和沙門氏菌示蹤法)對禽類飼料和環境樣品中的沙門氏菌進行檢測
，阻抗法是幾種方法中最少受到主觀因素幹擾的。Pless等[17]分別用阻抗法和傳統檢測方法進行對照試驗，對250種食品樣品進行了檢測。在122種沙門氏菌陽性樣品中，用阻抗方法檢出的有119種，傳統的亞硒酸鹽一胱氨酸培養基檢出106種，用RV培養基僅檢出92種。

1.3.3 其他的代謝技術

放射測量技術是利用細菌在生長繁殖過程中代謝碳水化合物而產生CO2的原理，把微量的放射性14C標記引入碳水化合物分子中，通過測定14CO2 的含量，從而判斷細菌的數量。目前

，該法已用於測定食品中的細菌

，具有快速、準確度高和自動化等優點[18]。

微(wei)熱(re)量(liang)技(ji)術(shu)是(shi)通(tong)過(guo)測(ce)定(ding)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)時(shi)熱(re)量(liang)的(de)變(bian)化(hua)進(jin)行(xing)細(xi)菌(jun)的(de)檢(jian)出(chu)和(he)鑒(jian)別(bie)。通(tong)過(guo)建(jian)立(li)與(yu)絕(jue)對(dui)微(wei)生(sheng)物(wu)細(xi)胞(bao)數(shu)相(xiang)關(guan)的(de)溫(wen)譜(pu)圖(tu)，可(ke)以(yi)用(yong)微(wei)熱(re)量(liang)對(dui)微(wei)生(sheng)物(wu)進(jin)行(xing)計(ji)數(shu)。

接觸酶測定技術是通過計算一個含有接觸酶的紙盤在盛有H202的試管中的漂浮時間來估計菌數。當樣品接觸酶陽性細菌含量越高，接觸酶與H202fanyingfangchuyangqiyueduo，zhipanshangfudeshijianyueduan。daduoshufubaiweishengwushishilengxingxijun，erdaduoshushilengxijunjiechumeichengyangxing，gukeyiyongjiechumeifanyinglaigujishipinzhongdeshilengxingjunqun。

1.4.1 紙片法

目前已經有許多微生物檢測紙片，可分別檢測菌落總數、大腸菌群
、黴菌
、沙門菌、葡萄球菌等，這些紙片快速檢測與傳統檢測方法之間的相關性非常好。如用大腸菌群快檢紙片檢測餐具的表麵

，操作簡便、快速、省料，特異性和敏感性與發酵法符合率高，已經被列為國標方法。美國3M公司生產的PF (Petrilm)試紙還加入了染色劑
、顯色劑，增強了效果，而且避免了熱瓊脂法不適宜受損細菌恢複的缺陷。在大腸菌群檢測方麵，國際方法報告的是MPN值而不是每克食品中的大腸菌群數
，PF法則可以得出精確數據[19]。黴菌快速檢測紙片操作簡便
，不需要低溫設備，僅需36℃培養48小時就可觀察結果
，比國標法縮短3～5天，在黴菌檢出率上無顯著性差異
，且菌落典型
，易判定,大大提高了工作效率。利用細菌產生某些代謝酶或代謝產物的特點而建立的紙片熒光法已經用於檢測食品中大腸菌群、大腸杆菌，通過檢測365nm紫外光下的熒光產物，判斷有關酶的活性，從而達到檢測的目的。紙片可高壓滅菌處理，4℃保存
，簡化了實驗準備、操作和判斷。

1.4.2 細菌直接計數法

細菌直接計數法主要包括流式細胞儀(FCM)和固相細胞計數(SPC)法。FCM通tong常chang以yi激ji光guang作zuo為wei發fa光guang源yuan
，經jing過guo聚ju焦jiao整zheng形xing後hou的de光guang束shu垂chui直zhi照zhao射she在zai樣yang品pin流liu上shang，被bei熒ying光guang染ran色se的de細xi胞bao在zai激ji光guang束shu的de照zhao射she下xia產chan生sheng散san射she光guang和he激ji發fa熒ying光guang。光guang散san射she信xin號hao基ji本ben上shang反fan映ying了le細xi胞bao體ti積ji的de大da小xiao
；熒ying光guang信xin號hao的de強qiang度du則ze代dai表biao了le所suo測ce細xi胞bao膜mo表biao麵mian抗kang原yuan的de強qiang度du或huo其qi核he內nei物wu質zhi的de濃nong度du，由you此ci可ke通tong過guo儀yi器qi檢jian測ce散san射she光guang信xin號hao和he熒ying光guang信xin號hao來lai估gu計ji微wei生sheng物wu的de大da小xiao
、形狀和數量。流式細胞計數具有高度的敏感性，可同時對目的菌進行定性和定量分析。目前已經建立了細菌總數[20]、致病性沙門菌
、大腸埃希氏菌[21]等的FCM檢驗方法。MClelland RD和Dinder AC用該儀器結合單克隆抗體檢測食品中的沙門氏菌
，靈敏度達到0.1CFU/g。SPC可以在單個細胞水平對細菌進行快速檢測[22]。濾(lv)過(guo)樣(yang)品(pin)後(hou)，存(cun)留(liu)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)在(zai)濾(lv)膜(mo)上(shang)進(jin)行(xing)熒(ying)光(guang)標(biao)記(ji)，采(cai)用(yong)激(ji)光(guang)掃(sao)描(miao)設(she)備(bei)自(zi)動(dong)計(ji)數(shu)。對(dui)於(yu)生(sheng)長(chang)緩(huan)慢(man)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)，檢(jian)測(ce)用(yong)時(shi)短(duan)使(shi)該(gai)方(fang)法(fa)明(ming)顯(xian)優(you)於(yu)傳(chuan)統(tong)平(ping)板(ban)計(ji)數(shu)法(fa)。

1.4.3 噬菌體鑒定技術

shijuntishiyizhongjishengyuxijundebingdu，xijunjibenshangdouyouzijideshijunti，erqiejuyouzhuanyidejishengxing，yijishengchangsudukuaidengtedian，changbeiyonglaijiandingyixietedingdezhibingjun
，qizhongyijiandingchangganjunkexijunhejinhuangseputaoqiujunzuijuchengxiao。shilingdengliyongchangganjunkeshijuntijinxingshipinhecanjuxijunjiance

，duishamenshijunhezhiheshijundejiancejinxu24-30小時。

1.4.4 全自動微生物分析係統(AMS)

Vitek?AMS自zi動dong微wei生sheng物wu檢jian測ce係xi統tong是shi一yi種zhong由you傳chuan統tong生sheng化hua反fan應ying及ji微wei生sheng物wu檢jian測ce技ji術shu與yu現xian代dai計ji算suan機ji技ji術shu相xiang結jie合he

，運yun用yong概gai率lv最zui大da近jin似si值zhi模mo型xing法fa進jin行xing自zi動dong微wei生sheng物wu檢jian測ce的de技ji術shu。AMS以每種細菌的微量生化反應為基礎，無須經過微生物分離培養和純化過程


，就能直接從樣品檢出特殊的微生物種類和菌群來，可鑒定405種細菌[23]。AMS能同時進行60-200個樣品的分析
，速度快、易操作
、結果準確。用AMS鑒定沙門菌屬隻需4小時，鑒定誌賀氏菌屬隻需6小時，鑒定霍亂弧菌等致病性弧菌亦隻需4-13小時[24]。

微(wei)生(sheng)物(wu)快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)技(ji)術(shu)都(dou)各(ge)自(zi)表(biao)現(xian)出(chu)很(hen)多(duo)優(you)點(dian)，但(dan)也(ye)還(hai)存(cun)在(zai)著(zhe)不(bu)足(zu)。由(you)於(yu)被(bei)汙(wu)染(ran)食(shi)品(pin)中(zhong)微(wei)生(sheng)物(wu)種(zhong)群(qun)繁(fan)多(duo)
，成(cheng)分(fen)複(fu)雜(za)
，各(ge)種(zhong)食(shi)品(pin)中(zhong)都(dou)可(ke)能(neng)存(cun)在(zai)阻(zu)礙(ai)檢(jian)測(ce)準(zhun)確(que)性(xing)的(de)抑(yi)製(zhi)因(yin)素(su)，另(ling)外(wai)

，受(shou)汙(wu)染(ran)食(shi)品(pin)中(zhong)的(de)同(tong)屬(shu)相(xiang)似(si)菌(jun)，操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)的(de)微(wei)小(xiao)誤(wu)差(cha)都(dou)會(hui)嚴(yan)重(zhong)幹(gan)擾(rao)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)。目(mu)前(qian)
，多(duo)數(shu)快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)還(hai)僅(jin)僅(jin)作(zuo)為(wei)篩(shai)選(xuan)方(fang)法(fa)使(shi)用(yong)，在(zai)實(shi)踐(jian)中(zhong)起(qi)到(dao)參(can)考(kao)作(zuo)用(yong)。不(bu)斷(duan)完(wan)善(shan)和(he)改(gai)進(jin)現(xian)有(you)的(de)快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)技(ji)術(shu)
，建(jian)立(li)更(geng)靈(ling)敏(min)、更有效、更可靠

、更簡便的檢測技術
，是食品病原微生物快速檢測技術的發展趨勢。

2.1 充分發揮不同快速檢測技術優勢

muqiancaiyongdekuaisujiancefangfahaiyouxuduoxuyaowanshandedifang，rukuaisuwangwangbansuizhunquexingdejiangdi，rupubianshiyongdemeilianmianyifahaiyoujiayangxingdewenticunzai。zaishijianzhongshiyongkuaisujiancejishu，bixushuxigezhongkuaisufangfadeyouquedian
，jinliangxuanzebiaozhunzhongtuijiandekuaisufangfahuoquanweijigourenkedekuaisufangfa
，zaibutongdeyingyongzhongfahuikuaisujiancejishudeyoushi。

2.2 提高檢測產品質量
，使檢測更準確

快速檢測技術的特異性
、lingminduhengao，xiangguanshijidezhiliangduijiancejieguodeyingxianghenda。yingcaiyongxindegongyi，tigaoshiyanxiangguanchanpindezhiliang，youhuashejiteshupeiyangji，duiyujiancejieguodezhunquexingjuyoushifenzhongyaodeyiyi。

2.3 實現快速檢測標準化、國產化

目前我國采用的大多數是國外的快速檢測技術，檢測成本高，缺乏相應國家標準。在以後的工作中
，應采取多種方法，引進、消化國外的先進技術，生產出我國自己的快速檢測產品。同時積極組織研究所
、大專院校和企業的專家建立國家標準和規範
，推動我國快速檢測技術的發展。

隨著科學技術的發展和人們對食品安全的重視程度的不斷增強
，食品中病原微生物的快速檢測將在食品工業原料質量估測
、加工工藝評估
、成品質量檢測、產(chan)品(pin)貨(huo)架(jia)期(qi)預(yu)測(ce)等(deng)方(fang)麵(mian)得(de)到(dao)越(yue)來(lai)越(yue)廣(guang)泛(fan)的(de)應(ying)用(yong)
，在(zai)食(shi)品(pin)安(an)全(quan)管(guan)理(li)體(ti)係(xi)的(de)建(jian)立(li)和(he)實(shi)施(shi)中(zhong)發(fa)揮(hui)越(yue)來(lai)越(yue)重(zhong)要(yao)的(de)作(zuo)用(yong)。這(zhe)些(xie)快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)技(ji)術(shu)的(de)推(tui)廣(guang)應(ying)用(yong)，不(bu)僅(jin)是(shi)對(dui)傳(chuan)統(tong)的(de)食(shi)品(pin)安(an)全(quan)檢(jian)測(ce)技(ji)術(shu)的(de)一(yi)個(ge)改(gai)進(jin)和(he)提(ti)高(gao)
，也(ye)使(shi)我(wo)們(men)的(de)食(shi)品(pin)質(zhi)量(liang)安(an)全(quan)有(you)了(le)進(jin)一(yi)步(bu)的(de)保(bao)證(zheng)，從(cong)而(er)推(tui)動(dong)食(shi)品(pin)工(gong)業(ye)更(geng)加(jia)健(jian)康(kang)
、快速向前發展，改變人類的生活質量

，滿足人民提高健康水平的需要。隨著科學技術的不斷進步，相信會有更多快速、簡便、特異的檢測技術得到應用，以滿足人們對食品安全的更高需求。

[1] 時煒．產單核細胞李氏菌在食品中的研究近況．中國衛生檢驗雜誌，2003，13(1)：122.。

[2] 李君文，晁福寰，靳連群，等．基因芯片技術快速檢測水中常見致病菌．中華預防醫學雜誌
，2002，36(4)：238-240．

[3] Carl F，Adman．Pathogen analysis and isothermal amplification．J Invest Med，2000，(2)：93-101

[4] Volokhov D
，Chumakov K，Rasoly A
，et a1．Identification of Listeriaspecies by micmarray-based

assayⅢ．Journal of Clinical Micmbiol，2002
，40(12)：4720-4728
；

[5] Call D R，Brockman F J
，Chandler D P．Detecting and genotyping Es—cherichia coli O157：H7 using multiplexed PCR and nucleic acid microarray．Int J Food Micmbiol，2001，67(1／2)：71-78

[6] 趙誌晶，劉秀梅．大腸杆菌O 多克隆抗體及食品中雙抗ELISA測定方法的研究．衛生研究，2003，32(6)：606-609

[7] Cryan B．Comparison of three assay systems for detection of enterotoxigenic Escherichia coli heat-stable enterotoxin Ⅲ．Journal ofClinical Microbiology
，1990，28(4)：792-794

[8] Skjerve E，Olsvik O．Immunomagnetic separation of Salmonella fromfoods．Int J Food Microbiol
，1991，14(1)：11-17

[9] ChapmanPA,WrishtDJ,HiqqinsRUntreatedmilkasasourceofverotoxigenic E．coli O157：H7．Veterinary Record，1993
，133(7)：171-17

[10] Skjerve E，Rorvik L M
，Olsvik O．Detection of Listeria monocytogenes in food by immunomagnetic separation．Appl Environ Micmbiol，1990,56(11)：3478-3481

[11 張凡非.副溶血性弧菌及其引起的食物中毒檢驗研究進展，中國衛生監督雜誌，2003
，10（1）：8

[12] 陳思強

，鍾偉強，曾振興
，等.自動酶聯熒光免疫分析係統檢測凍肉中沙門菌的評價．中國國境衛生檢疫雜誌，2004
，27(5)：309.

[13] 孫素霞，陳思強，羅海吉.自動酶聯熒光免役分析係統檢測凍肉中李斯特氏菌，.南方醫科大學學報，2006，26（9）：1325

[14] 曹利蓉
，張偉
，晁蕊．ATP生物發光法在鐵路站車食品器具衛生學檢驗中的應用, 鐵道勞動安全衛生與環保，2004

，31(2)：86-87．

[15] 舒柏華，孫丹陵
，王勝利，等．肉類食品細菌汙染生物發光快速分析技術研究, 中國公共衛生，2003，19(4)：483-484．

[16] Quinn C
，Ward J，Griffin M，et a1．A comparison of conventional cIll—ture and three rapid methods for the detection of Salmonella in poultryfeeds and environmental samples．Letters in Applied Microbi—ology，1995
，20(2)：89-91

[17] Pless P，Futschik K，Schopf E．Rapid detection of salmonellae bymeans of a new impedance-splitting method ⅢJournal of Food

[18] Fung D Y C．What S needed in rapid detection of foodborne pathogens ．Food Technology
，1995,49(6)：49
，64-67

[19] 唐靈，郭奕芳
，吳翊等，Petrifilm紙片法和國際法檢測奶製品細菌總數和大腸菌群數的結果比較，中國衛生檢驗雜誌
，2000,10(3):325?327.

[20] Gunasekera TS,Attfield PV,Veal DA.A flow cytometry method for rapid detection and enumeration of total bacteria in milk． Appl Environ Microbiol，2000
，66(3)：1228-1232．

[21] Fuchs BM，Wallner G, Beisker W, et al．Flow cytometric analysis of the insitu accessibility of Escherichia coli 16S rRNA for fluorescently labeled oligonucleotide probes．Appl Environ Microbiol，1998，64(12)：4973?4982．

[22] Lisle JT,Hamilton MA，Willse AR
，et al．Comparison of fluorescence microscopy and solid?phase cytometry methods for counting bacteria in water．Appl Environmental Microbiology,   2004, 70(9)：5343-5348．

[23] 楊毓環，陳偉偉．VITEK全自動微生物檢測係統原理及其應用
，海峽預防醫學雜誌，2000，6(3)：38-39．

[24] 王曉英．固相細胞計數法一種快速檢測單細胞細菌的食品微生物新檢測方法，國外醫學衛生學分冊，2003，30(3)：183-186．