(1)柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產生空隙。
(2)如果儀器用來做常規分析,樣品種類有限,但分析次數多,則不妨為每一類常規分析配置1根專用柱,這樣有助於延長柱子的壽命。
(3)如使用柱溫控製裝置時,應注意在通入流動相後才能升溫。
(4)流動相使用前需進行脫氣處理,以免降低柱效和影響檢測等。樣品溶液需經適當的前處理及過濾,以減少柱汙染和堵塞。
(5)在更換流動相種類時,應注意溶劑的互溶性,防止發生鹽析現象。
(6)柱子實際操作壓力應低於填裝時的最高壓力,最好在最高壓力一半以下。一般不超過20 593.965~29 419.95 kPa。在低壓力(≤14 709.975 kPa)的範圍使用,可使柱保持長時期的高柱效。
(7)C18色譜柱屬非極性鍵合相色譜柱,流動相的pH值應嚴格控製在2~7之間,以免損壞柱子。
(8)在完成分離分析工作之後,不應立即停機,需及時對色譜分析係統進行衝洗,一般0.5 h以上,以除去色譜柱內的雜質。
(9)如果流動相中有鹽類,首先用水充分清洗。如果是胺類(如三甲胺類或四丁基胺類)添加到流動相中,要用50%甲醇和0.05%磷酸溶液混合溶劑衝洗,不要隻用水衝洗。
(10)C18一般用100%甲醇作為保存溶劑,以防柱子幹裂而損壞。嚴禁水或緩衝溶液長時間在色譜流路中保留。
(11)選用合適的C18保護柱,以保護分析柱免受雜質顆粒及不可逆吸附的幹擾物的影響。保護柱內裝填料顆粒度應與分析柱填料的顆粒度盡量一致。
(12)柱的保存期不宜太長。短期不用的C18柱,用甲醇衝洗30~60 min,然後將柱兩端密封。較長期不用的柱子,一是采取定期衝洗,再密封的方法;二是在衝洗後,柱兩端各裝1隻有一定容量的灌滿甲醇的容器(隻裝一端也可),以補充在較長存放期間柱內溶劑的蒸發。
三、C18柱的維修
色(se)譜(pu)柱(zhu)在(zai)日(ri)常(chang)使(shi)用(yong)過(guo)程(cheng)中(zhong),盡(jin)管(guan)保(bao)護(hu)嚴(yan)格(ge),樣(yang)品(pin)和(he)流(liu)動(dong)相(xiang)盡(jin)管(guan)經(jing)過(guo)前(qian)處(chu)理(li),但(dan)經(jing)過(guo)長(chang)時(shi)間(jian)的(de)使(shi)用(yong),仍(reng)然(ran)難(nan)以(yi)完(wan)全(quan)避(bi)免(mian)柱(zhu)子(zi)受(shou)到(dao)汙(wu)染(ran),固(gu)定(ding)相(xiang)流(liu)失(shi)、板結、柱床塌陷以及柱效下降等。有些可以通過維修,使部分柱效恢複。
3.1 柱汙染再生技術
色譜柱汙染後,可以用合適的溶劑衝洗,使柱效再生。C18柱常規的再生洗滌方法是:分別用甲醇、三氯甲烷、甲醇/水各60 mL依次通過色譜柱,再用100%甲醇60 mL平衡色譜柱後封存,柱效將恢複正常。必要時,根據柱汙染性質(如有機汙染、鹽類汙染等),采用0.05 mol/L H2SO4、0.5 mol/L H3PO4或0.1 mol/L EDTA鈉鹽衝洗,然後再用水衝洗,最後用100%甲醇平衡色譜柱後封存。對於嚴重汙染的C18柱,可采用水、甲醇、氯仿、乙烷依次衝洗後,按順序倒過來再衝洗1次,每次所用溶劑60 mL,不接檢測器,最後用100%甲醇平衡色譜柱封存。
3.2 柱汙染的修複
在柱汙染再生無效或已知柱汙染嚴重時,可以采用柱修補的方法解決,但柱汙染深度不宜超過5 mm。方法是將特製小鏟將汙染部分挖去,再用與柱填料相同的固定相與流動相混合製成漿狀,然後將漿狀固定相仔細補入被挖去的部分(盡量使後填補的固定相接近原裝的緊密程度),xiupingduanmianjike。xiuhaodezhuziruguozhutouliangduandeshaibandekongjingshiyizhide,kejiangzhuzidiandaoguolaishiyongyibanshijian,mudeshijiezhuliudongxiangchongxizuoyong,huifuzhuchuangjinmichengdu。
3.3 柱塌陷的修複
柱塌陷的原因很多。對於塌陷不太嚴重時,如果柱頭兩端的篩板孔徑是一致的,可將柱顛倒使用一般時間,即可恢複性能。當塌陷嚴重(5mm左右)時,可采用柱汙染的修複方法修補即可。
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