校xiao正zheng因yin子zi的de研yan究jiu對dui於yu選xuan擇ze合he適shi定ding量liang方fang式shi，準zhun確que定ding量liang雜za質zhi具ju有you重zhong要yao意yi義yi，因yin而er成cheng為wei雜za質zhi分fen析xi方fang法fa研yan究jiu中zhong的de重zhong要yao內nei容rong之zhi一yi。那na麼me，校xiao正zheng因yin子zi都dou有you哪na些xie特te點dian？如ru何he進jin行xing測ce定ding呢ne？今jin天tian我wo們men就jiu來lai探tan討tao一yi下xia這zhe個ge問wen題ti。
HPLC法(fa)具(ju)有(you)將(jiang)不(bu)同(tong)物(wu)質(zhi)分(fen)離(li)後(hou)逐(zhu)一(yi)定(ding)量(liang)的(de)分(fen)離(li)分(fen)析(xi)能(neng)力(li)，在(zai)檢(jian)測(ce)中(zhong)發(fa)揮(hui)著(zhe)越(yue)來(lai)越(yue)重(zhong)要(yao)的(de)作(zuo)用(yong)，成(cheng)為(wei)雜(za)質(zhi)控(kong)製(zhi)中(zhong)常(chang)用(yong)而(er)有(you)效(xiao)的(de)手(shou)段(duan)之(zhi)一(yi)。在(zai)雜(za)質(zhi)對(dui)照(zhao)品(pin)法(fa)、加校正因子的主成分自身對照法、不加校正因子的主成分自身對照法、峰(feng)麵(mian)積(ji)歸(gui)一(yi)化(hua)法(fa)等(deng)幾(ji)種(zhong)常(chang)用(yong)的(de)雜(za)質(zhi)定(ding)量(liang)方(fang)式(shi)中(zhong)，校(xiao)正(zheng)因(yin)子(zi)的(de)研(yan)究(jiu)對(dui)於(yu)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)定(ding)量(liang)方(fang)式(shi)，準(zhun)確(que)定(ding)量(liang)雜(za)質(zhi)具(ju)有(you)重(zhong)要(yao)意(yi)義(yi)，因(yin)而(er)成(cheng)為(wei)雜(za)質(zhi)分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)研(yan)究(jiu)中(zhong)的(de)重(zhong)要(yao)內(nei)容(rong)之(zhi)一(yi)。但(dan)從(cong)目(mu)前(qian)注(zhu)冊(ce)申(shen)報(bao)資(zi)料(liao)實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)來(lai)看(kan)，校(xiao)正(zheng)因(yin)子(zi)的(de)研(yan)究(jiu)和(he)使(shi)用(yong)中(zhong)尚(shang)存(cun)在(zai)一(yi)些(xie)需(xu)要(yao)進(jin)一(yi)步(bu)思(si)考(kao)和(he)關(guan)注(zhu)的(de)問(wen)題(ti)。
一般來講，HPLC定量測定中，物質的檢測量W與色譜響應值（峰麵積等）A之間的比值稱為絕對校正因子，即單位響應值（峰麵積等）所對應的被測物質的量（濃度或質量）；而某物質i與所選定的參照物質s的絕對校正因子之比，即為相對校正因子，即通常所講的校正因子。目前校正因子主要用於“加校正因子的主成分自身對照法”定ding量liang相xiang關guan特te定ding雜za質zhi，這zhe種zhong定ding量liang方fang式shi因yin考kao慮lv了le雜za質zhi與yu主zhu成cheng分fen的de絕jue對dui校xiao正zheng因yin子zi的de不bu同tong所suo引yin起qi的de測ce定ding誤wu差cha，將jiang標biao準zhun物wu質zhi的de賦fu值zhi信xin息xi轉zhuan化hua為wei常chang數shu，固gu化hua在zai質zhi量liang標biao準zhun中zhong，且qie不bu需xu長chang期qi提ti供gong標biao準zhun物wu質zhi，因yin而er成cheng為wei現xian階jie段duan雜za質zhi控kong製zhi較jiao為wei理li想xiang可ke行xing的de手shou段duan。但dan這zhe種zhong方fang法fa有you時shi會hui因yin不bu同tong儀yi器qi及ji色se譜pu條tiao件jian的de波bo動dong，可ke產chan生sheng一yi定ding範fan圍wei的de誤wu差cha，需xu進jin行xing充chong分fen的de方fang法fa耐nai用yong性xing驗yan證zheng，並bing結jie合he色se譜pu峰feng定ding位wei控kong製zhi等deng措cuo施shi，將jiang誤wu差cha控kong製zhi在zai一yi定ding範fan圍wei內nei。子的測定在校正因子的研究和使用中，標準物質、色譜條件、溶劑、檢測波長等均是重要的影響因素，研究中需要予以關注。首先，校正因子的測定需要用到特定雜質及主成分的標準物質，這些標準物質應具備量值準確的特點，符合標準物質（對照品）的相關要求；qici，quedingxiaozhengyinzidefenxifangfayingyuzuizhongquedingdezhiliangbiaozhunfangfayizhi，seputiaojiandengxujingshaixuanyouhuahouqueding，ruyoubiangeng，xukaolvduixiaozhengyinzideyingxiang，biyaoshizhongxinqueding；最後，要關注影響待測物UV吸收的各種因素，如溶液製備所用溶劑最好與最終確定的流動相相同，檢測波長最好在特定雜質及主成分UV曲線的峰或穀處，避開吸收值急劇變化波段，以保證測定方法具有較好的耐用性，並保持測定結果的恒定。一般情況下，校正因子可視具體情況通過如下幾種方法確定：（1）單濃度點測定：製備適當濃度的特定雜質對照品溶液和主成分對照品溶液，分別進樣測定，照上式計算，得到校正因子。（2）多濃度點測定：製備適當的高、中、低三水平濃度的特定雜質對照品溶液和主成分對照品溶液（涵蓋定量限、標準限度），分別進樣測定，照上式計算各校正因子，計算RSD，求平均值，得到校正因子。（3）標準曲線法測定：精密稱取雜質對照品和主成分對照品，分別製備係列溶液（涵蓋定量限、標準限度），分別進樣後，按最小二乘法以進樣量對響應值（峰麵積等）進行線性回歸，求得兩條標準曲線，兩曲線斜率之比即為校正因子。（4）吸收係數比值法：對於UV檢測器來講，兩物質的相對校正因子實際上也是兩物質以流動相為溶劑，在檢測波長處的紫外吸收係數E1cm1%之比，故可按吸收係數法測定法的相關技術要求測定各自吸收係數，如對照品級別的標準物質、高中低三水平濃度測定、吸收度介於0.3～0.8之間、至少5台不同型號的UV分光光度計、2份供試液同時平行製備測定、同台儀器2份供試液的平行測定結果不超過±0.5%等。測定兩物質的吸收係數後，經統計分析確定兩物質吸收係數，計算比值，求得校正因子。上述各方法中，（1）和（2）fajiaoweijianjie，keyikuaijiedilianghuatedingzazhiyuzhuchengfenziwaixishoutezhengdechayi，duoyongyupinggucaiyongzhuchengfenzishenduizhaofadingliangzazhishishifouxuyaoxiaozheng。danrucaiyongjiaxiaozhengyinzidezhuchengfenzishenduizhaofadingliangzazhi，xujiangbiaozhunwuzhifuzhixinxizhuanhuaweixiaozhengyinziguhuazaizhiliangbiaozhunzhong，namexiaozhengyinzidezhunquexingfeichangguanjian，xiaozhengyinzidezhunquejisuanyingfuhegengweiyangedeyaoqiu，xuyaokaolvbingkongzhiqiusuanxiaozhengyinziguochengzhongdegezhongwuchayinsu，yijiyiqitongyongxinghesepuxitongdenaiyongxingdengyinsu，yibianshiqiudedechangshugengweizhunquebingjudaibiaoxing，cishicaiyong（3）、（4）法更為適宜，如能考慮到測定人員、不同試驗室因素的影響，會更加符合常數求算的基本要求。根據雜質研究相關技術指導原則，為確保雜質測定結果的準確可靠，一般情況下，校正因子在0.9～1.1時可不予校正，直接采用不加校正因子的自身對照法定量；
超出該範圍，如采用主成分自身對照法的定量方式，須用校正因子進行校正，，即“加校正因子的主成分自身對照法”以保證雜質定量的準確性；如校正因子在0.2～5.0範圍以外時，表明雜質與主成分的UV吸收相差過大，校正因子的作用會受到顯著影響，此時應改變檢測波長等檢測條件，使校正因子位於上述範圍內，或使用結構或UV吸收與該雜質接近的另一標準物質為參照物質（如對照品易於獲得、標準已采用對照品外標法定量的另一特定雜質），重新確立校正因子；如校正因子仍無法調節至適當範圍，需考慮采用雜質對照品外標法等適當的雜質方式定量。校正因子的應用同吸收係數的使用類似，需要具備一定的前提條件，比如相同的檢測波長、分析方法、色(se)譜(pu)條(tiao)件(jian)等(deng)。需(xu)要(yao)注(zhu)意(yi)的(de)是(shi)，雜(za)質(zhi)的(de)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)差(cha)別(bie)較(jiao)大(da)時(shi)，峰(feng)形(xing)及(ji)峰(feng)麵(mian)積(ji)會(hui)有(you)較(jiao)大(da)差(cha)別(bie)，對(dui)校(xiao)正(zheng)因(yin)子(zi)的(de)校(xiao)準(zhun)作(zuo)用(yong)也(ye)會(hui)產(chan)生(sheng)明(ming)顯(xian)影(ying)響(xiang)，因(yin)此(ci)色(se)譜(pu)峰(feng)的(de)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)要(yao)相(xiang)對(dui)恒(heng)定(ding)，質(zhi)量(liang)標(biao)準(zhun)需(xu)要(yao)對(dui)相(xiang)關(guan)特(te)定(ding)雜(za)質(zhi)的(de)色(se)譜(pu)峰(feng)規(gui)定(ding)相(xiang)對(dui)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)的(de)限(xian)定(ding)。在目前的申報資料中，校正因子的研究和使用中存在一些需要關注的問題。主要表現在如下幾個方麵： （1）特te定ding雜za質zhi直zhi接jie采cai用yong主zhu成cheng分fen自zi身shen對dui照zhao法fa定ding量liang，沒mei有you進jin行xing校xiao正zheng因yin子zi的de研yan究jiu以yi及ji測ce定ding結jie果guo校xiao正zheng前qian後hou的de數shu據ju對dui比bi，無wu法fa判pan斷duan定ding量liang方fang式shi的de合he理li性xing和he測ce定ding結jie果guo的de準zhun確que性xing。 （2）測定的校正因子超過指導原則中不需校正的範圍，仍直接采用不加校正因子的主成分自身對照法。如某藥物中雜質I、II、III校正因子分別為2.02、1.47、1.70，但質量標準仍采用不加校正因子的主成分自身對照法測定包括上述三個雜質的各種雜質。 （3）cededexiaozhengyinzibunengyouxiaoxiaozhengcedingjieguo，zaimeiyouchongfendeshujuzhichideqingkuangxia，rengcaiyongjiaxiaozhengyinzidezhuchengfenzishenduizhaofa。rumouqinghaosuzhiliangbiaozhunzhongquqingqinghaosudedingliangshiyongxiangduiyuzhuchengfendexiaozhengyinziwei0.019，該數值校正能否準確定量雜質，沒有相應研究工作的論證和對比檢測數據的支持顯然是不夠的。
zongshangkejian，duiyutedingzazhidekongzhi，xiaozhengyinzideyanjiuhecedingshifeichangbiyaode。pingguzazhidingliangshifouxuyaocaiyongxiaozhengyinzixiaozheng，xiaozhengyinzinengfouqidaoyouxiaodexiaozhunzuoyong，shouxianyaocedingchuxiaozhengyinzi，anzhaoxiangguanjishuzhidaoyuanzedeyaoqiupinggushifouxuyaoxiaozheng，bingtigongxiangyingdeduibiyanjiuziliao。zhexieyanjiushujuyingbaokuozazhiduizhaopinwaibiaofa、加校正因子的主成分自身對照法、不bu加jia校xiao正zheng因yin子zi的de主zhu成cheng分fen自zi身shen對dui照zhao法fa對dui相xiang同tong多duo批pi樣yang品pin雜za質zhi定ding量liang測ce定ding結jie果guo的de對dui比bi數shu據ju，作zuo為wei是shi否fou需xu要yao校xiao正zheng或huo能neng否fou有you效xiao校xiao正zheng檢jian測ce結jie果guo的de支zhi持chi與yu依yi據ju。
考慮到校正因子對雜質定量的長期影響，目前階段校正因子測定的技術要求、標準物質要求、測定方法和數據處理的要求等尚未十分明確、尚不統一普及，如校正因子需要載入質量標準，由省所進行協作標定或進行針對性技術複核具有一定必要性。
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