| 薄層色譜法,係將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開後,與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比,用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。 |
| 1.儀器與材料 |
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1.1 玻板 除另有規定外,用5cm×20cm,10cm×20cm或20cm×20cm的規格,要求光滑、平整,洗淨後不附水珠,晾幹。 1.2 固定相或載體 最常用的有矽膠G、矽膠GF<[254]> 、矽膠H、 矽膠HF<[254]>,其次有矽藻土、矽藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、 微晶纖維素F<[254]>等。 其顆粒大小,一般要求直徑為10~40μm。薄層塗布,一般可分無粘合劑和含粘合劑兩種;前者係將固定相直接塗布於玻璃板上, 後者係在固定相中加入一定量的粘合劑,一般常用10~15%煆石膏(CaSO4.2H2O在140℃烘4小時),混勻後加水適量使用,或用羧甲基纖維素鈉水溶液(0.5~0.7%)適量調成糊狀,均勻塗布於玻璃板上。也有含一定固定相或緩衝液的薄層。 1.3 塗布器 應能使固定相或載體在玻璃板上塗成一層符合厚度要求的均勻薄層。 1.4 點樣器 同紙色譜法項下。 1.5展開室 應使用適合薄層板大小的玻璃製薄層色譜展開缸,並有嚴密的蓋子,除另有規定外,底部應平整光滑,應便於觀察。 |
| 2.操作方法 |
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2.1 薄層板製備 除另有規定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表麵的氣泡後,倒入塗布器中,在玻板上平穩地移動塗布器進行塗布(厚度為0.2~0.3mm),取下塗好薄層的玻板,置水平台上於室溫下晾幹,後在110℃烘30分鍾,即置有幹燥劑的幹燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。 2.2 點樣 除另有規定外,用點樣器點樣於薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊2.0cm,樣點直徑及點間距離同紙色譜法,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表麵。 2.3 展開 展開室如需預先用展開劑飽和,可在室中加入足夠量的展開劑,並在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條,一端浸入展開劑中,密封室頂的蓋,使係統平衡或按正文規定操作。 將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5~1.0cm(切勿將樣點浸入展開劑中),密封室蓋,待展開至規定距離(一般為10~15cm),取出薄層板,晾幹,按各品種項下的規定檢測。 2.4 如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出,或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量,則可用薄層掃描法。 薄bo層ceng掃sao描miao的de方fang法fa,除chu另ling有you規gui定ding外wai,可ke根gen據ju各ge種zhong薄bo層ceng掃sao描miao儀yi的de結jie構gou特te點dian及ji使shi用yong說shuo明ming,結jie合he具ju體ti情qing況kuang,選xuan擇ze吸xi收shou法fa或huo熒ying光guang法fa,用yong雙shuang波bo長chang或huo單dan波bo長chang掃sao描miao。由you於yu影ying響xiang薄bo層ceng掃sao描miao結jie果guo的de因yin素su很hen多duo,故gu應ying在zai保bao證zheng供gong試shi品pin的de斑ban點dian在zai一yi定ding濃nong度du範fan圍wei內nei呈cheng線xian性xing的de情qing況kuang下xia,將jiang供gong試shi品pin與yu對dui照zhao品pin在zai同tong一yi塊kuai薄bo層ceng上shang展zhan開kai後hou掃sao描miao,進jin行xing比bi較jiao並bing計ji算suan定ding量liang,以yi減jian少shao誤wu差cha。各ge種zhong供gong試shi品pin,隻zhi有you得de到dao分fen離li度du和he重zhong現xian性xing好hao的de薄bo層ceng色se譜pu,才cai能neng獲huo得de滿man意yi的de結jie果guo。 |
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