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“堵”的表現現象就是柱壓異常升高，直接原因就是流·不暢。堵塞的主要λ置就是在色譜柱的前端，最主要原因就是流動相裏有雜質，雜質的主要來源就是細菌。
“堵”的原因
xinzhibeidechunshuizaishineifangzhijitianjiuhuichangjun，erzhexiexijunsuiranrouyanbukejian，quezuyidusaizhutianliaokelidekongxi，zaochengzhuzihenkuaibaofei。zhejiushizaipeizhiliudongxiangshizaochengdexijunwurandeyuanyin，jiejuetadefangfahenjiandan，jiushiquebaoshuidekekaoxing。
（2）成箱購買市售品牌純淨水，如，500mL一支的怡寶或娃哈哈，這些水的質量足以應付液相色譜的要求。先隨機抽取一支做一下細菌平板實驗，待菌落數合格方可使用。這樣ÿ次隻要單獨開一支即可，也很方便。ÿ次成本2元左右。
（2）流動相過濾在經濟成本上不劃算。買一套過濾裝置要6000duoyuan，qieguolvqigongrenshibijiaorongyisunhuaideshebei。zuizhuyaoshiguolvpiandechengbentaigao，yipianjiuyaojishiyuan。anyibanyexiangzhudezhengchangshiyongshoumingjisuan，guolvpiandechengbenhuiyuanyuangaoyusepuzhudechengben。
（3）流動相過濾對於工作效率成本不劃算。使用溶劑過濾器有一個預清洗、裝備、使用、用後清洗，晾幹的過程，至少也有一個小時的時間。這個成本也不能忽視。
（4）在實際工作δ發現流動相不過濾會對柱壽命有任何影響。我們起碼有6年時間û有做過流動相過濾的工作，但是和國內同行相比較，在同等使用強度下我們的柱壽命是比較長的。
從單純實驗效果來說，後一種有明顯的優點：首先是簡單，不需要實驗者另個計算配比混合，其次就是比例準確，能得到保留時間重複性極好的實驗效果。
但是，它有一個致命的缺陷，就是純水在流動相瓶中幾天時間就會長細菌（很多情況下不僅僅用純水作流動相，而是用緩衝鹽溶液，本身就是優質肥料，細菌長得更迅速），一旦有細菌柱子就壞得很快。所以這種方式要求操作人員ÿ次實驗都要用新製備的純水，更要求在ÿ次實驗後把水相換掉，換成甲醇衝洗幹淨，這一點在實際工作中很多人意識不強，就是意識到了但多次使用中總有一兩次會遺©，但是往往這一兩次就足以產生致命的影響。因為液相色譜柱的堵塞是不可逆的。
所以，寧可犧牲小小的保留時間的重複性，也不要用純水溶液作為流動相的一組。從實際實驗效果來說，我建議用10％的甲醇水代替純水溶液（以前我做過不同比例甲醇水的細菌總數實驗，在5％就基本可以抑菌，在10％及以上就可以完全殺菌了），這樣可以有效排除長細菌的隱患，既可作流動相，也可衝柱。就算是在配製流動相時會計算得麻煩一些，但是一次麻煩，終身受益。
（2）樣品處理液淨化得不幹淨，長期會在六通閥和柱之間形成阻塞不暢。
（3）在使用手動六通閥時，有些人可能由於手勁小的原因，轉動的不到λ，於是造成流·形成了死堵，壓力快速升高超過警戒值。
（4）在使用金屬管·作出廢液管時，應當注意最好廢液瓶中先放一些水，並把廢液管的出口端放在液麵下。如果λ於在液相上且實驗使用較高濃度的緩衝鹽溶液，在停機時可能在出口端結晶成塊並造成堵塞。這種情況不常見，但卻的確發生過。
©液的原因分兩種：
（1）接觸硬件不當
在更換零件如流·管或換柱時，換的接頭接口不匹配，造成©液。要注意不同公司的柱子接頭很多是不同的，甚至同一家公司在不同時期生產的液相柱接頭也有很大區別。當然選用PEEK接頭是一個較好的解決方法，不僅通用性好，而且靠手š就能保證不©液。
即使是接口本身是匹配的，但是如果操作不當也會©液，一種不當就是力度把握不好，š得太緊或太鬆；另一種不當就是致命的錯誤：滑絲，這是往往是動手能力不太強，螺絲釘很少š的工作者犯的錯誤，滑絲的後果不僅是©液那ô簡單，常造成重要部件的報廢。解決這個問題隻能靠惡補基本功來實驗，那就是š螺絲。
（2）使用儀器不當
如果是輸送泵©液，最常見的原因就是在活塞λ置緩衝鹽析出造成。
xichudeyuanyinyouliangge，yishishiyonghuanchongyanrongyeshituranjiarulechunjiachunerxichu，zhezhongcuowuhenrongyibimian，zheshijinliangbuyaoyongchundejiachunhechunshui。zhiyaohuxiangyou10％的比例就不會出現這個問題。另一原因是在用緩衝鹽溶液（不論甲醇含量有多少）作流動相時，實驗結束後û有換甲醇水衝洗，使得微滲的流動相幹燥形成晶體造成。
不過，輸送泵©液並不是非得馬上修不可，衝洗幹淨並在以後的使用中多加小心一般都可以正常使用。
檢測器©液ye是shi個ge很hen麻ma煩fan的de事shi，一yi般ban都dou是shi吸xi收shou池chi的de問wen題ti，更geng換huan的de費fei用yong相xiang當dang高gao。但dan是shi並bing不bu是shi說shuo一yi定ding要yao馬ma上shang更geng換huan，還hai可ke以yi從cong實shi際ji實shi驗yan效xiao果guo看kan能neng否fou湊cou合he使shi用yong。
1.過濾頭
抽液時，在流·管中有不規則但持續的小氣泡產生，這時考慮的是流動相有û有脫氣（需要特別提醒即使是有了真空脫氣機也是要先超聲脫氣的，起碼可以減少脫氣機的工作壓力並提高工作效率），如果已經脫了氣，則要注意過濾頭的汙染也會造成這種現象。處理方法比較簡單，š下過濾頭在稀硝酸中浸泡，超聲半小時，洗淨後裝回去即可。
2.透明流·管
指的是在過濾頭和輸送泵之間的那一段管·。這(zhe)一(yi)個(ge)部(bu)分(fen)往(wang)往(wang)不(bu)是(shi)有(you)點(dian)氣(qi)泡(pao)，而(er)經(jing)常(chang)是(shi)整(zheng)個(ge)管(guan)中(zhong)全(quan)是(shi)空(kong)氣(qi)而(er)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)卻(que)渾(hun)然(ran)不(bu)知(zhi)，以(yi)致(zhi)輸(shu)送(song)泵(beng)工(gong)作(zuo)了(le)半(ban)天(tian)才(cai)發(fa)現(xian)流(liu)動(dong)相(xiang)瓶(ping)裏(li)的(de)液(ye)體(ti)一(yi)點(dian)也(ye)û少。這也是我們常說的液相色譜儀至少一周要開機一次的原因（我們做液相一定要有“微滲”的概念）。如果長時間不用，這一段管·的液體會徹底幹掉，而充滿空氣的管·和充滿液體的管·不仔細看是分辨不出的。
這種情況對於輸送泵很Σxian，yinwei，bengcongshejilaishuoshishusongyetierbushiqiti，neibudeyetiduiyuhuosailaishuoqidaolejiyoudezuoyong，ruguohuosaiganshanghaicancunleyixiehuanchongyan，zejiyilashang，zaochengbukenizhuandeyingxiang。
對於這種情況，要突出“預防為主”，如，液相色譜使用人員要相對固定和穩定，工作中合理搭配資源，ÿ台機一周至少作一次實驗，如長期不用起碼ÿ周要衝流動相2 小時。養成良好的工作習慣很重要。如果不慎出現了這種問題怎ô辦？我的建議是用外力使管·中充滿液體。具體如下：
(1)找到流·管進入輸送泵的接頭。
(2)š下來。
(3)用一幹淨的洗耳球的尖端對準管·的平整切口。
(4)吸液體，看液麵從流動相瓶裏上升，至離洗耳球5 厘米左右時停止該動作。
(5)快速把接頭š回輸送泵上（這個過程可能會有少許流動相外泄，這是正常現象）。
(6)開機，打開排液閥門，啟動輸送泵。
(7)等排液管中流出的溶液û有氣泡時，再關閉排液閥，儀器正常工作。
3.輸送泵和柱子
這些部分進了氣泡一般不怕，衝掉就行。
4.檢測器
應該說，整個流·中隻要有一個氣泡都會在檢測器上得到強烈的信號反映，檢測器內部的氣泡一般都能被衝走，但也有很難衝掉的殘留氣泡的情況。
