1 材料和方法
1.1 供試材料
采用當家品種下寨65和青薯168.
1.2 試驗方法
1.2.1 催芽 於11月中旬左右,挑揀表皮光滑、正常薯形、大小均勻、無病害和無損傷薯塊,放置在有供暖的房間,室內溫度24 ℃左右進行催芽。在催芽前薯塊正處於休眠期,采用0.05~0.l0 mg/L的GA3來處理薯塊,浸沒於GA3溶液中10~20 min,以打破休眠[4].
1.2.2 種薯處理 采用MS培養基,加入不同配比的激素,準備BA、NAA、GA3、IBA和IAA,由於激素在培養基中用量非常少,且不易溶於水,所以采用特殊的配置方法,配置成500 mg/L的溶液待用。當兩個品種的種薯芽長到2~3 cm時,挑選生長健壯的芽,用清水衝洗芽部表麵汙物,在無菌操作室采用12種不同的方法進行表麵消毒,用最近製作的蒸餾水衝洗四五次,將表麵消毒劑徹底清除,不同表麵消毒劑處理時間見表1.
1.2.3 莖尖組織培養 在解剖鏡下剝取大小為0.30~
0.50 mm莖尖生長點,置於不同濃度生長調節劑的MS培養基上進行培養,培養基編號為MS1~MS12,另設不加任何生長調節劑的MS培養基作為對照(CK),植物生長調節劑配比見表2.
1.2.4 馬鈴薯脫毒苗培養 在無菌條件下,將得到的無毒苗進行切段,每段帶一葉,置於不同種類、濃度的1/2MS培養基中進行培養,中國農業網以不加任何生長調節劑的1/2MS培養基作為對照,編號為M1~M9,快繁培養基配比見表3.
2 結果與分析
2.1 不同表麵消毒方法對莖尖成活率和汙染的影響
從表4可以看出,在莖尖組織培養過程中,外植體在清水衝洗後,直接采用0.1 %升汞或5 %次氯酸鈉消毒,都可以將汙染控製在5 %以下,但需時稍長,不同程度地影響到成活率。另外由於升汞的滲透性強,不宜徹底清洗,且對環境汙染嚴重,建議盡量不要使用。
2.2 不同生長調節劑培養基配比對莖尖組織生長的影響
從表5可以看出,不含生物調節劑的培養基,馬鈴薯莖尖組織的生長非常緩慢,導致成苗率低下。在同等條件下,KT和6-BA對馬鈴薯莖尖組織的生長都具有促進作用,且效果顯著,就這兩種物質而言,含有KT的培養基中成苗率較低。在同等條件下加入GA3,可明顯促進馬鈴薯莖尖組織分化,加快生長,提高成苗率。
2.3 不同生長調節劑配比對馬鈴薯脫毒苗快繁的影響
經jing過guo觀guan測ce表biao明ming,與yu對dui照zhao培pei養yang基ji相xiang比bi較jiao,培pei養yang基ji中zhong加jia入ru生sheng長chang調tiao節jie劑ji後hou,芽ya萌meng發fa推tui遲chi,有you效xiao促cu進jin幼you根gen生sheng長chang。生sheng長chang調tiao節jie劑ji濃nong度du過guo大da時shi,愈yu傷shang組zu織zhi發fa達da,生sheng根gen受shou到dao抑yi製zhi。在zai實shi驗yan中zhong觀guan察cha到dao下xia寨zhai65對NAA較為敏感,濃度稍大就會產生較大愈傷組織,生根較為緩慢,而青薯168反應較為遲鈍,結果見表6.
3 結論
通(tong)過(guo)實(shi)驗(yan)發(fa)現(xian),在(zai)馬(ma)鈴(ling)薯(shu)脫(tuo)毒(du)技(ji)術(shu)實(shi)施(shi)過(guo)程(cheng)中(zhong),采(cai)用(yong)酒(jiu)精(jing)與(yu)其(qi)他(ta)兩(liang)種(zhong)表(biao)麵(mian)消(xiao)毒(du)劑(ji)配(pei)合(he)使(shi)用(yong)效(xiao)果(guo)最(zui)好(hao),能(neng)有(you)效(xiao)控(kong)製(zhi)汙(wu)染(ran),降(jiang)低(di)對(dui)莖(jing)尖(jian)組(zu)織(zhi)的(de)影(ying)響(xiang)。剝(bo)離(li)的(de)莖(jing)尖(jian)組(zu)織(zhi)誘(you)導(dao)成(cheng)苗(miao)是(shi)脫(tuo)毒(du)快(kuai)繁(fan)的(de)關(guan)鍵(jian)技(ji)術(shu),在(zai)實(shi)驗(yan)中(zhong),KT和BAjunyouzhuyujingjianzuzhifenhuachengmiao。zaikuaifanzhong,shidangnongdudeshengwutiaojiejiduimalingshujingduanshenggenyoucujinzuoyong,dandangnongduguogaoshizhichanshengfenshengzuzhi,buliyuxiaomiaoshenggen,erqiegepinzhongbiaoxianyousuobutong。
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