海南潭牛一養殖池塘出現羅非魚暴發性死亡,發病初期死亡40-60尾/天,高峰期死亡700-800尾/天,通過采樣、實驗室診斷治療,取得了較好的效果。
2015年11月中下旬,海南潭牛一養殖池塘出現羅非魚暴發性死亡,發病初期死亡40-60尾/天,高峰期死亡700-800尾/天,情況嚴重。水產養殖動物疾病防控技術國家地方聯合工程實驗室(簡稱“國家工程實驗室”)tongguoduigaidiqudeluofeiyujinxingxianchangcaiyang,bingjinxingshiyanshizhenduanzhiliao,qudelejiaohaodexiaoguo,benwenjiucibingzhenliaoqingkuangjieshaoruxia,yiqiduijinhouluofeiyushishuiqidanbaojunbingdefangzhitigongjiejian。
一、發病魚的臨床症狀
池塘水溫為26-28℃,暴發疾病的魚規格主要為400-500g,發病初期死亡40-60尾/天,而後逐漸增多,高峰期死亡量達800尾/天以上。患病魚主要表現為食欲下降,離群獨遊,反應遲鈍,在水麵上層漂浮遊動。病魚鰓蓋出血、肛門紅腫、鰭條、上下頜和腹部充出血。解剖後觀察發現,有胃出血、膽囊變大、膽囊壁變薄、肝gan髒zang充chong血xue或huo出chu血xue或huo呈cheng現xian花hua斑ban症zheng狀zhuang,腸chang道dao內nei無wu食shi物wu的de症zheng狀zhuang。發fa病bing初chu期qi,養yang殖zhi戶hu認ren為wei可ke能neng是shi鏈lian球qiu菌jun病bing感gan染ran所suo致zhi,就jiu使shi用yong了le磺huang胺an類lei抗kang生sheng素su,但dan死si亡wang量liang並bing未wei減jian少shao。後hou送song樣yang至zhi本ben國guo家jia工gong程cheng實shi驗yan室shi進jin行xing診zhen斷duan。
二、實驗室診斷
實(shi)驗(yan)室(shi)診(zhen)斷(duan)未(wei)發(fa)現(xian)寄(ji)生(sheng)蟲(chong),使(shi)用(yong)通(tong)威(wei)股(gu)份(fen)最(zui)新(xin)研(yan)發(fa)的(de)無(wu)乳(ru)鏈(lian)球(qiu)菌(jun)快(kuai)速(su)診(zhen)斷(duan)試(shi)紙(zhi)條(tiao)未(wei)檢(jian)測(ce)到(dao)無(wu)乳(ru)鏈(lian)球(qiu)菌(jun)。而(er)通(tong)過(guo)對(dui)病(bing)原(yuan)菌(jun)分(fen)離(li),采(cai)用(yong)腦(nao)心(xin)浸(jin)液(ye)(BHI)培養基在患病魚體內分離到一株革蘭氏陰性短杆菌,菌體兩端鈍圓,菌株大小為(0.3-0.6)μm×(1.0-1.5)μm,在28℃條件恒溫培養18-24h,形成針尖狀、直徑約為1mm左右、表麵光滑、邊緣整齊、圓形半透明的菌落。
通過16SrDNA基因擴增,得到約1500bp的擴增條帶,測序後在NCBI上進行BLAST比對,分離菌株與嗜水氣單胞菌的同源性最高,序列相似性達到99.5%。將分離到的細菌接種到健康羅非魚,在36h內實驗組出現死亡,且體表有點狀出血、鰭條出血、剖解見內髒充血或出血。並從人工接種感染的羅非魚肝髒組織分離到1株細菌,經16SrDNA基因擴增對比分析該菌株同樣為嗜水氣單胞菌。因而判斷該病為嗜水氣單胞菌感染所致。
三、藥敏試驗與治療
利用紙片擴散法,對該嗜水氣單胞菌株分別進行藥敏試驗,發現其對強力黴素、恩諾沙星、四環素、氟苯尼考敏感,而對卡那黴素、磺胺嘧啶、鏈黴素耐藥,丁胺卡那、慶大黴素、新黴素、壯觀黴素中度敏感。結合發病情況和藥用史,按照內服抗生素氟苯尼考(20mg/kg魚體重),同時內服維生素K3以6mg/kg魚體重,連續投喂5天;外用潑灑使用聚維酮碘消毒(1-2次)。藥物使用4天後,病情得到有效控製,死亡量降至70-80尾,連續使用2天後,死亡量減少到10餘尾。
同時,簡易水質試劑盒測定該塘口後氨氮1.8mg/L、亞鹽高於0.3mg/L,因此先後使用底質改水解毒產品(如通威改水解毒寶,主要成分為吸附劑、絡合劑、表麵活性劑等)和培藻產品(如通威伴侶Ⅳ,主要成分為藻種、多種微生物、多肽、礦物元素)對水質進行調節。經過處理,病情得到有效處置。
四、小結
羅非魚已經成為我國主要的淡水魚類品種之一,而疾病的發生逐漸成為製約羅非魚養殖業健康、持續、快速發展的瓶頸。目前,羅非魚鏈球菌病已成為危害羅非魚的最主要疾病,而無乳鏈球菌病是其主要病原,但也有嗜水氣單胞菌、熒光假單胞、愛德華氏菌感染羅非魚的報道。該羅非魚嗜水氣單胞菌病發生在11月份,據報道羅非魚鏈球菌病主要流行於6-8月,經實驗室初步診斷、分子生物學診斷、回歸試驗,最終確認是由於嗜水氣單胞菌感染所致。
從魚體發病的症狀來看,鏈球菌病與羅非魚嗜水氣單胞菌兩者之間都有體表充、出血,羅非魚肝髒出血、膽(dan)囊(nang)腫(zhong)大(da)的(de)症(zheng)狀(zhuang),僅(jin)從(cong)肉(rou)眼(yan)無(wu)法(fa)做(zuo)出(chu)準(zhun)確(que)判(pan)斷(duan)。而(er)如(ru)需(xu)進(jin)一(yi)步(bu)確(que)診(zhen)病(bing)因(yin)需(xu)使(shi)用(yong)分(fen)子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)等(deng)檢(jian)測(ce)手(shou)段(duan),而(er)無(wu)乳(ru)鏈(lian)球(qiu)菌(jun)快(kuai)速(su)診(zhen)斷(duan)試(shi)紙(zhi)條(tiao)因(yin)其(qi)具(ju)有(you)操(cao)作(zuo)簡(jian)單(dan)、方便、準確性高,診斷時間短,能夠有效確診是否為無乳鏈球菌病,降低了藥物亂用所帶來的養殖風險。
通過對患病池塘的水質檢測發現,池塘的水質較差,氨氮、亞鹽偏高,且水質較為渾濁、老lao化hua,投tou料liao後hou羅luo非fei魚yu自zi身shen產chan生sheng的de排pai泄xie物wu較jiao多duo,投tou料liao產chan生sheng的de殘can餌er增zeng加jia與yu水shui質zhi變bian化hua加jia快kuai有you關guan係xi。嗜shi水shui氣qi單dan胞bao菌jun是shi屬shu於yu條tiao件jian性xing致zhi病bing菌jun,水shui體ti中zhong氨an氮dan、亞鹽的超標,或天氣的變化導致魚體處於應激狀態,自身抵抗力下降,導致了疾病的暴發。
在魚類疾病防控中,一直以來倡導“以防為主、快診早治、合理用藥”defangkonglinian,jiaqiangduiyangzhishuitideguanli,tigaoyutizishendemianyidikangli。zaipingshideyangzhiguochengzhong,xuyaochongfenshiyongzengyangjizengyang,tebieshizaiyangzhizhonghouqi,yibaochishuitiyangqidechongzu,youtiaojiandekeyigenjushuizhiqingkuangjinxinghuanshui,richangkeshiyongweishengtaizhiji(EM菌、芽孢菌和光和菌等)對水質進行調節,保持水體處於良好的狀態。並可以通過對魚體內服保健(如多維和黃芪多糖等)來增強魚體免疫能力。對於發病池塘,因盡早確定病因,才能對症下藥,及時有效的采取相應措施控製病情,降低養殖經濟損失
作者:通威股份有限公司動物保健研究所、水產養殖動物疾病防控技術國家地方聯合工程實驗室 王浩丞 劉天強 戴景輝;通威(海南)水產食品有限公司 王勇強
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