1.首先人員操作誤差。我們是上市公司,實驗室的人一個微生物檢驗人員都是經過嚴格考核的,微生物檢驗工作都有4到5年的操作檢驗,且出現汙染後QC主管也一直在旁邊觀察了實驗人員的操作,並沒有發現有任何異常。因此可以排除人員操作誤差。
2. 設備和環境誤差。我們用於微生物檢驗的都是要求用可循環利用的經過嚴格濕熱黴菌後再烘幹的玻璃移液管、玻璃培養皿,無菌操作是在嚴格消毒後的生物安全櫃中進行,且我們微生物限定室的級別是10萬級,所用的培養箱是滅菌消毒過的另外2taipeiyangxiang,xiangtongtiaojianxiasuodejianpin,yibandaozhipeiyang,yibanzhengzhipeiyang,danshizhengzhipeiyangdehaishichuxianlewuran,daozhipeiyangdemeiyoubeiwuran,zhenjunchangdejunyunyouguize。youcishebeihehuanjingdewuchayekeyipaichuzaiwai。
3. 物品誤差。由於我們一直都是用生理鹽水、peiyangji,qiedoushijingguoyangeshiremiejun,gaoyamiejunguoyeshijingguodangdiyaojianjuxiaozhunguode,qiemiejunshijiandetiaozhengzaipeiyangjixingzhiyaoqiufanweinei,jipaichulejianceyongpindewucha。
綜合以上可以得出培養方案是造成汙染的主要原因,隨即與當地藥監局取得聯係,經溝通藥監局對真菌的培養也是開始實施2016版的方法正置培養,且沒有出現蔓延的情況,藥檢所是將平板一個一個擺開正置培養,而沒有疊起來培養。
我們將平板一個一個擺開正置培養迅速做了驗證:我們將受汙染的培養箱做了消毒滅菌,同時開啟了另外2台沒有被汙染的培養箱將需要做黴菌培養的含樣品的凝固平板分別放到2台培養箱做分開擺放正置培養及堆疊擺放正置培養,我們的實驗室的6taipeiyangxiangdoushijingguoxiaozhundeqiedoushitongxinghaodeshenghuapeiyangxiang,suoyishebeiyingxiangyinsukeyihulve,zaipeiyangbaifangfangshigaibian,qitajishububiandetiaojianxiapeiyang,shiyanjieguoshiyigeyigebaikaizhengzhipeiyangdemeiyoushouwuran,erduidiebaifangzhengzhipeiyangdeshoudaolewuran。suoyikeyiquedingpingbandebaifangfangshishizaochengwurandeyuanyin。
堆疊正置培養造成汙染的原因分析:2016版方法要求培養皿正置培養在培養的第3天開始需要每天觀察和記錄培養結果,正置培養可以避免在觀察時反轉使黴菌的孢子抖動散落到培養基上而產生的次生菌落。我們都知道黴菌的特性就是有蔓延性,且由於培養箱加熱,培養箱內部還有風機使內部氣流在旋轉,2016版(ban)如(ru)果(guo)堆(dui)疊(die)放(fang)置(zhi)正(zheng)置(zhi)培(pei)養(yang),且(qie)有(you)一(yi)個(ge)樣(yang)品(pin)是(shi)有(you)黴(mei)菌(jun),那(na)麼(me)菌(jun)絲(si)就(jiu)會(hui)通(tong)過(guo)縫(feng)隙(xi)拚(pin)命(ming)的(de)往(wang)上(shang)爬(pa),就(jiu)像(xiang)爬(pa)山(shan)虎(hu)一(yi)樣(yang),開(kai)心(xin)的(de)長(chang)著(zhe),且(qie)隨(sui)著(zhe)生(sheng)長(chang)孢(bao)子(zi)會(hui)脫(tuo)落(luo)且(qie)特(te)別(bie)輕(qing),培(pei)養(yang)箱(xiang)風(feng)機(ji)吹(chui)出(chu)的(de)風(feng)把(ba)孢(bao)子(zi)吹(chui)散(san),停(ting)到(dao)蓋(gai)子(zi)上(shang)甚(shen)至(zhi)通(tong)過(guo)蓋(gai)子(zi)之(zhi)間(jian)的(de)縫(feng)隙(xi)(蓋子沒有裝培養基比較輕)汙wu染ran了le其qi他ta的de樣yang品pin,但dan是shi同tong一yi疊die隨sui著zhe菌jun絲si的de蔓man延yan,通tong過guo培pei養yang皿min直zhi接jie蔓man延yan到dao另ling外wai一yi個ge培pei養yang基ji上shang,一yi個ge蔓man延yan一yi個ge,那na麼me一yi疊die被bei汙wu染ran的de情qing況kuang會hui更geng嚴yan重zhong,這zhe也ye就jiu驗yan證zheng了le我wo前qian麵mian提ti到dao的de同tong一yi疊die同tong一yi個ge方fang向xiang被bei汙wu染ran的de現xian象xiang。並bing不bu是shi所suo有you的de企qi業ye實shi驗yan室shi都dou有you好hao幾ji個ge培pei養yang箱xiang的de,所suo以yi就jiu提ti醒xing一yi些xie微wei友you們men,2016版的方法千萬不要將黴菌堆疊培養,如果空間不夠可以在培養箱多裝幾個隔層,問題就解決了。
如果培養箱被汙染了,可以用75%酒精和新潔爾滅兩種消毒劑對培養箱進行了全麵的消毒,且大家最好是買那種有紫外消毒、臭氧消毒的培養箱,且消毒完最好不要馬上用,消毒完最好放個幾天在使用。
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