培養基是液體、半ban固gu體ti或huo固gu體ti形xing式shi的de,含han天tian然ran或huo合he成cheng成cheng分fen,用yong於yu保bao證zheng微wei生sheng物wu繁fan殖zhi或huo保bao持chi其qi活huo力li的de物wu質zhi。培pei養yang基ji的de製zhi備bei和he使shi用yong是shi微wei生sheng物wu實shi驗yan室shi檢jian測ce工gong作zuo的de重zhong要yao環huan節jie,培pei養yang基ji自zi身shen質zhi量liang的de優you劣lie、保存是否得當、配製使用是否正確等都直接影響到檢測結果的準確性。
三、培養基的製備
1.培養基用水
培養基製備用水應使用電阻率不小於30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質的水,最好不使用離子交換器生產的去離子水。
2.稱量
稱量時要用專用的角匙,避免交叉汙染而影響檢驗結果;幹粉培養基易吸潮,如有條件,盡量在濕度較低的房間稱取培養基。
3.複水
複水時不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養基中,影響微生物的生長;容器的大小需大於複水後培養基總體積的2倍以上,避免在加熱溶解過程中,培養基溢出;含有瓊脂粉的培養基,在加熱溶解之前可以浸泡數分鍾;加jia熱re培pei養yang基ji時shi一yi定ding要yao進jin行xing攪jiao拌ban,特te別bie是shi瓊qiong脂zhi類lei培pei養yang基ji。為wei避bi免mian燒shao焦jiao和he沸fei騰teng溢yi出chu,對dui於yu少shao量liang的de培pei養yang基ji最zui好hao使shi用yong沸fei水shui浴yu進jin行xing加jia熱re。燒shao糊hu的de培pei養yang基ji營ying養yang物wu質zhi被bei破po壞huai,並bing可ke產chan生sheng有you毒du物wu質zhi,如ru發fa現xian焦jiao化hua,或huo未wei溶rong解jie均jun勻yun前qian培pei養yang基ji有you溢yi出chu,該gai培pei養yang基ji即ji不bu能neng使shi用yong,應ying重zhong新xin製zhi備bei。對dui於yu瓊qiong脂zhi類lei培pei養yang基ji進jin行xing再zai融rong化hua時shi應ying使shi用yong沸fei水shui浴yu或huo流liu動dong蒸zheng汽qi進jin行xing加jia熱re,最zui多duo隻zhi能neng加jia熱re兩liang次ci,第di二er次ci再zai融rong化hua後hou仍reng未wei用yong完wan的de培pei養yang基ji應ying棄qi去qu。
4.滅菌
一般培養基采用濕熱滅菌,即高壓蒸汽滅菌,通常是121℃ 15min,hantanghuoteshupeiyangji,anzhaoguojiabiaozhunhuoshengchanshangtigongdeshuomingmiejun。yipeizhihaodepeiyangjibixulijimiejun,bimianweishengwushengchangfanzhierxiaohaoyangfen,gaibianpeiyangjidesuanjiandu。gaowenkepohuaipeiyangjideyingyangchengfen,haihuishiqiongzhideningjiaoqiangduxiajiang,yincibixuyangekongzhimiejunwenduheshijian,bingqiebukezhongfumiejun。gaoyazhengqimiejunguodeyalibiaodengyaodingqijinxingjianding,bingdingqicaiyongshengwuzhishijunfahuohuaxuebiansezhipianduimiejunxiaoguojinxingyanzheng。
5.pH測定
微生物必須在適宜的pH範圍內才能正常生長繁殖或體現其生物特性。培養基配方要求的pH為滅菌或消毒後的pH值,即培養基使用前的pH,並應在25℃溫度下采用精密酸度計進行測量,固體瓊脂培養基應以特殊的膠體表麵測量電極進行測量。使用過程中,如果需要調整培養基的pH,應用1mol/LNa0H或 lmol/LHCL調整,注意不可反複調pH,否則會影響培養基的滲透壓。
6.配製好的培養基保存
滅(mie)菌(jun)以(yi)後(hou)培(pei)養(yang)基(ji)應(ying)該(gai)迅(xun)速(su)冷(leng)卻(que)至(zhi)所(suo)需(xu)溫(wen)度(du),避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)保(bao)存(cun)在(zai)滅(mie)菌(jun)鍋(guo)內(nei),造(zao)成(cheng)過(guo)度(du)滅(mie)菌(jun),影(ying)響(xiang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)營(ying)養(yang)成(cheng)分(fen)或(huo)選(xuan)擇(ze)性(xing)效(xiao)果(guo)。所(suo)配(pei)製(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)量(liang),應(ying)該(gai)是(shi)在(zai)最(zui)長(chang)保(bao)存(cun)期(qi)限(xian)內(nei)正(zheng)好(hao)使(shi)用(yong)完(wan)。含(han)染(ran)料(liao)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)應(ying)閉(bi)光(guang)保(bao)存(cun);倒好的瓊脂平板如果配製的當天未使用完,應於冷藏保存,如果保存時間超過2天,應將其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉湯類培養基如果保存時間超過2個星期,應將其放在帶有螺旋蓋的試管或其它密閉的試管或容器中防止蒸發。
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