weishengwuxibaodaxiao,shiweishengwudexingtaitezhengzhiyi,yeshifenleijiandingdeyijuzhiyi。youyujuntihenxiao,zhinengzaixianweijingxiaceliang。yonglaiceliangweishengwuxibaodaxiaodegongjuyoumujingceweichi(圖Ⅳ-4)和鏡台測微尺(圖Ⅳ-5)。
鏡台測微尺(圖Ⅳ-5)是中央部分刻有精確等分線的載玻片。一般將1mm等分為100格(或2mm等分為200格),每格長度等於0.01mm(即106μm)。是專用於校正目鏡測微尺每格長度的。
目鏡測微尺(圖Ⅳ-4,A)是一塊可放在接目鏡內的隔板上的圓形小玻片,其中央刻有精確的刻度,有等分50小格或100小格兩種,每5小xiao格ge間jian有you一yi長chang線xian相xiang隔ge。由you於yu所suo用yong接jie目mu鏡jing放fang大da倍bei數shu和he接jie物wu鏡jing放fang大da倍bei數shu的de不bu同tong,目mu鏡jing測ce微wei尺chi每mei小xiao格ge所suo代dai表biao的de實shi際ji長chang度du也ye就jiu不bu同tong,因yin此ci,目mu鏡jing測ce微wei尺chi不bu能neng直zhi接jie用yong來lai測ce量liang微wei生sheng物wu的de大da小xiao,在zai使shi用yong前qian必bi須xu用yong鏡jing台tai測ce微wei尺chi進jin行xing校xiao正zheng,以yi求qiu得de在zai一yi定ding放fang大da倍bei數shu的de接jie目mu鏡jing和he接jie物wu鏡jing下xia該gai目mu鏡jing測ce微wei尺chi每mei小xiao格ge的de相xiang對dui值zhi,然ran後hou才cai可ke用yong來lai測ce量liang微wei生sheng物wu的de大da小xiao。
二、器材
枯草芽孢杆菌染色玻片標本,目鏡測微尺,鏡台測微尺,顯微鏡,擦鏡紙,香柏油等。
三、操作步驟
1.目鏡測微尺的標定
(1)放置目鏡測微尺取出接目鏡,旋開接目鏡透鏡,將目鏡測微尺的刻度朝下放在接目鏡筒內的隔板上(圖Ⅳ-4,B),然後旋上接目透鏡,最後將此接目鏡插入鏡筒內(圖Ⅳ-4,C)。
(2)放置鏡台測微尺將鏡台測微尺置於顯微鏡的載物台上,使刻度麵朝上。
(3)校(xiao)正(zheng)目(mu)鏡(jing)測(ce)微(wei)尺(chi)先(xian)用(yong)低(di)倍(bei)鏡(jing)觀(guan)察(cha),對(dui)準(zhun)焦(jiao)距(ju),當(dang)看(kan)清(qing)鏡(jing)台(tai)測(ce)微(wei)尺(chi)後(hou),轉(zhuan)動(dong)接(jie)目(mu)鏡(jing),使(shi)目(mu)鏡(jing)測(ce)微(wei)尺(chi)的(de)刻(ke)度(du)與(yu)鏡(jing)台(tai)測(ce)微(wei)尺(chi)的(de)刻(ke)度(du)平(ping)行(xing),移(yi)動(dong)推(tui)動(dong)器(qi),使(shi)目(mu)鏡(jing)測(ce)微(wei)尺(chi)和(he)鏡(jing)台(tai)測(ce)微(wei)尺(chi)的(de)某(mou)一(yi)區(qu)間(jian)的(de)兩(liang)對(dui)刻(ke)度(du)線(xian)完(wan)全(quan)重(zhong)合(he),然(ran)後(hou)計(ji)數(shu)出(chu)兩(liang)對(dui)重(zhong)合(he)線(xian)之(zhi)間(jian)各(ge)自(zi)所(suo)占(zhan)的(de)格(ge)數(shu)(圖Ⅳ-6)。
根據計數得到的目鏡測微尺和鏡台測微尺重合線之間各自所占的格數,通過如下公式換算出目鏡測微尺每小格所代表的實際長度。
目鏡測微尺每小格長度(μm)=
同法校正在高倍鏡和油鏡下目鏡測微尺每小格所代表的長度。
2.菌體大小的測定
目鏡測微尺校正後,移去鏡台測微尺,換上枯草芽孢杆菌染色玻片標本,校正焦距使菌體清晰,轉動目鏡測微尺(或轉動染色標本),cechukucaoyabaoganjundechanghekuangezhanjixiaoge,jiangcededegeshuchengyimujingceweichimeixiaogesuodaibiaodechangdu,jikehuansuanchucidangejuntidedaxiaozhi,zaitongyitupianshangxuceding10至20個菌體,求出其平均值,才能代表該菌的大小。而且一般是用對數生長期的菌體來進行測定。
3.取出目鏡測微尺,將接目鏡放回鏡筒,再將目鏡測微尺和鏡台測微尺分別用擦鏡紙擦拭後,放回盒內保存。
四、實驗報告
(1)將目鏡測微尺校正結果填入下表。
(2)在高倍鏡下測量枯草芽孢杆菌大小結果填入下表。
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