柱子可以分為：加壓，常壓，減壓

壓力可以增加淋洗劑的流動速度，減少產品收集的時間

，但是會減低柱子的塔板數。所以其他條件相同的時候
，常壓柱是效率最高的，但是時間也最長，比如天然化合物的分離，一個柱子幾個月也是有的。

減壓柱能夠減少矽膠的使用量， 感覺能夠節省一半甚至更多， 但是由於大量的空氣通過矽膠會使溶劑揮發（有時在柱子外麵有水汽凝結） 

，以及有些比較易分解的東西可能得不到，而且還必須同時使用水泵抽氣（很大的噪音
，而且時間長） 。以前曾經大量的過減壓柱
，對它有比較深厚的感情，但是自從嚐試了加壓後，就幾乎再也沒動過減壓的念頭了。

加壓柱是一種比較好的方法，與常壓柱類似，隻不過外加壓力使淋洗劑走的快些。壓力的提供可以是壓縮空氣，雙連球或者小氣泵（給魚缸供氣的就行） 。特(te)別(bie)是(shi)在(zai)容(rong)易(yi)分(fen)解(jie)的(de)樣(yang)品(pin)的(de)分(fen)離(li)中(zhong)適(shi)用(yong)。壓(ya)力(li)不(bu)可(ke)過(guo)大(da)，不(bu)然(ran)溶(rong)劑(ji)走(zou)的(de)太(tai)快(kuai)就(jiu)會(hui)減(jian)低(di)分(fen)離(li)效(xiao)果(guo)。個(ge)人(ren)覺(jiao)得(de)加(jia)壓(ya)柱(zhu)在(zai)普(pu)通(tong)的(de)有(you)機(ji)化(hua)合(he)物(wu)的(de)分(fen)離(li)中(zhong)是(shi)比(bi)較(jiao)適(shi)用(yong)的(de)。

關於柱子的尺寸，應該是粗長的最好

柱子長了
，相應的塔板數就高。柱子粗了
，上樣後樣品的原點就小（反映在柱子上就是樣品層比較薄） ，這樣相對的減小了分離的難度。試想如果柱子十厘米，而樣品就有二厘米，那麼分離的難度可想而知
，恐怕要用很低極性的溶劑慢慢衝了。而如果樣品層隻有0.5limi
，namegezufenjiubijiaorongyidedaowanquanfenlile。dangrancaiyongcudadezhuziyaoxishengbijiaoduodeguijiaoherongjile，buguozhexiechengbenxiangduiyuchanpinlaishuoyexujiubusuanshenmele（有些不環保的說
，不過溶劑回收重蒸後也就減小了部分浪費） 。

現在見到的柱子徑高比一般在1：5~10，書中寫矽膠量是樣品量的30～40倍，具體的選擇要具體分析。如果所需組分和雜質分的比較開（是指在所需組分rf在0.2～0.4，雜質相差0.1以上） 
，就可以少用矽膠，用小柱子（例如 200 毫克的樣品

，用50px×500px的柱子） ；如果相差不到 0.1，就要加大柱子，我覺得可以增加柱子的直徑，比如用75px的
，也可以減小淋洗劑的極性等等關於無水無氧柱
，適用於對氧，水敏感，易分解的產品。

可以濕柱，也可以幹柱。不過在樣品之前至少要用溶劑把柱子飽和一次，因為溶劑和矽膠飽和時放出的熱量有可能是產品分解，畢竟要分離的是敏感的東東，小心不為過。也是因為分離的東西比較敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循 schlenk 操作。至於是加壓、常壓、減壓，隨需而定。因為是 schlenk操作
，所以點板是個問題，如果樣品是顯色的
，恭喜了，不用點板，直接看柱子上的色帶就行了。如果樣品無色
，隻好準備幾十個 schlenk 瓶
，一瓶一瓶的點，不過幾次之後就知道樣品在哪，也就可以省些了。像我以前過一根無水無氧柱，

需要六個 schlenk
，現在隻一個就能把所要的全收集到。無水無氧柱中用的比較多的是用氧化鋁作固定相。因為矽膠中有大量的羥基裸露在外， 很容易是樣品分解
，特別是金屬有機化合物和含磷化合物。而氧化鋁可以做成堿性
、中性和酸性的
，選擇餘地比較大，但是比矽膠要貴些。

聽說有個方法，就是用石英做柱子，然後用 HF254 做固定相，這樣在柱子外麵用紫外燈一照就知道產品在哪裏了，沒有驗證過。哪位做過可以提出來大家參詳參詳。

關於濕法
、幹法上樣

濕法省事，一般用淋洗劑溶解樣品
，也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等，但溶劑越少越好
，不然溶劑就成了淋洗劑了。很多樣品在上柱前是粘乎乎的
，一般沒關係。可是有的上樣後在矽膠上又會析出，這一般都是比較大量的樣品才會出現
，是因為矽膠對樣品的吸附飽和，而樣品本身又是比較好的固體才會發生
，這就應該先重結晶
，得到大部分的產品後再柱分，如果不能重結晶那就不管它了，直接過就是了，樣品隨著淋洗劑流動會溶解的。

有些樣品溶解性差，能溶解的溶劑又不能上柱（比如 DMF,DMSO 等，會隨著溶劑一起走，顯色是一個很長的脫尾） ，這時就必須用幹法上柱了。樣品和矽膠的量有一種說法是 1：1，我覺得是越少越好，但是要保證在旋幹後
，不能看到明顯的固體顆粒（那說明有的樣品沒有吸附在矽膠上） 。

溶劑的選擇

當然是最便宜，最安全，最環保的了。所以大多選用石油醚，乙酸乙酯。文獻中有寫用正己烷的，太貴了，除非特別需要不要用不然銀子嘩嘩的，流的比淋洗劑還快

，不過因為極性很小， 有時還是非它不可。乙醚也可以用
， 但是就是容易睡覺， 注意保持清醒別讓溶劑流幹了
，

那樣柱子也就不爽了。二氯甲烷也有用的，但是要知道，它和矽膠的吸附是一個放熱過程，所以夏天的時候經常會在柱子裏產生氣泡，天氣冷的時候會好一些。甲醇
，據說能溶解部分的矽膠，所以產品如果想過元素分析的話要留神，應該經過後繼處理

，比如說重結晶等。其他的溶劑用的相對較少，要依個人的不同需要選擇了。

由於某些原因，用到的淋洗劑多是大包裝的（便宜嘛），我們這裏是用10升或25升的塑料桶裝的， 就要注意這些工業品的純度是較低的。經常能夠從送來的大桶底部看見有色的雜質，其他的雜質就可想而知了， 所以在比較嚴格的柱分時就要對溶劑重蒸。當然過原料時就可以免去這一步了，反正下麵還有提純的方法。

另外溶劑在過柱子後最好也回收使用，一方麵環保
，另一方麵也能節省部分經費，缺點是要消耗一定的人工。這裏要注意的是，一般在過柱同時進行的是減壓旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由於揮發度的不同會導致極性的變化
， 一般會使得極性變大， 在梯度淋洗時比較合適
，正好極性越來越大了。在過完柱子後，溶劑最後回收要采用常壓
，因為在減壓旋蒸時會有部分低沸點的雜質一起出來， 常壓時就會減少這種現象， 如果雜質和你下麵要過的樣品有反應那就慘了。

關於操作問題：

1 裝柱

柱子下麵的活塞一定不要塗潤滑劑
，會被淋洗劑帶到產品中的，可以采用四氟節門的。幹法和濕法裝柱覺得沒什麼區別
，隻要能把柱子裝實就行。裝完的柱子應該要適度的緊密（太密了淋洗劑走的太慢） ，一定要均勻（不然樣品就會從一側斜著下來） 。書中寫的都是不能見到氣泡，我覺得在大多數情況下有些小氣泡沒太大的影響，一加壓氣泡就全下來了。當然如果你裝的柱子總是有氣泡就說明需要多練習了。但是柱子更忌諱的是開裂
， 甭管豎的還是橫的，都會影響分離效果
，甚至作廢！

2 加樣

用yong少shao量liang的de溶rong劑ji溶rong樣yang品pin加jia樣yang，加jia完wan後hou將jiang下xia麵mian的de活huo塞sai打da開kai，待dai溶rong劑ji層ceng下xia降jiang至zhi石shi英ying砂sha麵mian時shi，再zai加jia少shao量liang的de低di極ji性xing溶rong劑ji，然ran後hou再zai打da開kai活huo塞sai，如ru此ci兩liang三san次ci，一yi般ban石shi英ying砂sha就jiu基ji本ben是shi白bai色se的de了le。加jia入ru淋lin洗xi劑ji，一yi開kai始shi不bu要yao加jia壓ya
，等deng溶rong樣yang品pin的de溶rong劑ji和he樣yang品pin層ceng有you一yi段duan距ju離li（2～100px 就夠了） 
，再加壓，這樣避免了溶劑（如二氯甲烷等）夾帶樣品快速下行。

3 淋洗劑的選擇

感覺上要使所需點在 Rf0.2~0.3左右的比較好。不要認為在板上爬高了分的比較開，過柱子就用那種極性
，如果Rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分開，因為柱子是一個多次爬板的狀態，可以通過公式的比較：0.6/0.8 一次的分離度
，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。

4 樣品的收集

用(yong)矽(gui)膠(jiao)作(zuo)固(gu)定(ding)相(xiang)過(guo)柱(zhu)子(zi)的(de)原(yuan)理(li)是(shi)一(yi)個(ge)吸(xi)附(fu)與(yu)解(jie)吸(xi)的(de)平(ping)衡(heng)。所(suo)以(yi)如(ru)果(guo)樣(yang)品(pin)與(yu)矽(gui)膠(jiao)的(de)吸(xi)附(fu)比(bi)較(jiao)強(qiang)的(de)話(hua)
，就(jiu)不(bu)容(rong)易(yi)流(liu)出(chu)。這(zhe)樣(yang)就(jiu)會(hui)發(fa)生(sheng)，後(hou)麵(mian)的(de)點(dian)先(xian)出(chu)
，而(er)前(qian)麵(mian)的(de)點(dian)後(hou)出(chu)。這(zhe)時(shi)可(ke)以(yi)采(cai)用(yong)氧(yang)化(hua)鋁(lv)作(zuo)固(gu)定(ding)相(xiang)。另外，收集的試管大小要以樣品量而定
，特別是小量樣品
，如果用大試管，可能一根就收到了三個樣品。嗚嗚
，如果都用小試管那工作量又太大。

5 最後的處理