一.振蕩漂洗法:
將待測樣品浸泡於提取溶劑中,若有必要可加以振蕩以加速擴散,適用於附著在樣品表麵的農藥以及葉類樣品中的非內吸性農藥。
二.勻漿萃取法:
將一定量的樣品置於勻漿杯中,加入提取劑,快速勻漿幾分鍾,然後,過濾出提取溶劑淨化後進行分析;
youshiweileshiyangpingengjudaibiaoxing,xujiadayangpinliang,zheshikexianjiangdaliangyangpinyunjiang,ranhou,chengquyidingliangdeyunjianghoudeyangpinyongcuiqurongjicuiqu,youqishiyongyu:葉類及果實樣品,簡便、快速。
三.索氏提取法:
索氏提取法是一種經典萃取方法,用於測量食品、飼料、土壤、聚合物、紡織品、紙漿和許多其他物質中的可提取物,在當前農藥殘留分析的樣品製備中仍有著廣泛的應用。美國環保署(EPA)將其作為萃取有機物的標準方法之一(EPA3540C);國(guo)標(biao)方(fang)法(fa)中(zhong)也(ye)用(yong)使(shi)用(yong)索(suo)式(shi)提(ti)取(qu)法(fa)作(zuo)為(wei)提(ti)取(qu)方(fang)法(fa)。由(you)於(yu)是(shi)經(jing)典(dian)的(de)提(ti)取(qu)方(fang)法(fa),其(qi)它(ta)樣(yang)品(pin)製(zhi)備(bei)方(fang)法(fa)一(yi)般(ban)都(dou)與(yu)其(qi)對(dui)比(bi),用(yong)於(yu)評(ping)估(gu)方(fang)法(fa)的(de)提(ti)取(qu)效(xiao)率(lv)。
大(da)多(duo)數(shu)農(nong)藥(yao)是(shi)脂(zhi)溶(rong)性(xing)的(de),所(suo)以(yi),一(yi)般(ban)采(cai)取(qu)提(ti)取(qu)脂(zhi)肪(fang)的(de)方(fang)法(fa),將(jiang)經(jing)分(fen)散(san)而(er)幹(gan)燥(zao)的(de)樣(yang)品(pin)用(yong)無(wu)水(shui)乙(yi)醚(mi)或(huo)石(shi)油(you)醚(mi)等(deng)溶(rong)劑(ji)提(ti)取(qu)使(shi)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)脂(zhi)肪(fang)和(he)農(nong)殘(can)進(jin)入(ru)溶(rong)劑(ji)中(zhong),再(zai)淨(jing)化(hua)濃(nong)縮(suo)即(ji)可(ke)分(fen)析(xi)。
適用於穀物及其製品、幹果、脫水蔬菜、茶葉、幹飼料等樣品。無水乙醚或石油醚等溶劑,提取效率高,操作簡便。
索氏提取法步驟:
稱取2~5g樣品到索氏樣品套管種,添加150mL溶劑到索氏燒瓶中,按每小時4~6循環萃取16~24小時,然後冷卻,對萃取液進行濃縮,再適當的溶劑進行複溶,進行儀器分析。
需要注意:
提取時間長,消耗大量的溶劑必須考慮被測物的穩定性;含水量過高的水果蔬菜不宜作為分析對象。
影響提取效果的因素主要有:
決定索氏提取效率的因素除了提取溶劑之外,還有就是提取溶劑的回流次數(在某種程度上可以說是提取時間),料液比以及提取溫度等。
提取過程中的注意事項:
1.一般在實驗中水浴的溫度不能過高以防止暴沸造成目標物的損失;
2.在索氏提取中,裝樣品一般都是用濾紙筒,不宜使用金屬的篩筒(這會造成部分農藥目標物的分解,如,Fe可能會造成某些有機氯農藥分解)。此外,應注意濾紙筒在裝樣之後與提取器的匹配,尤其須注意紙筒不能堵塞虹吸回流管。
3.實驗中所使用的索氏提取器不宜過大,否則溶劑蒸氣到達提取器之前由於環境空氣的冷凝作用而減少(特別是冬天等環境溫度較低的時候),從而減緩了提取效率,使得提取耗時過長。
4.由於索氏提取是一個相對開放的提取體係,因此,在提取操作中還應注意防止產生汙染;實驗操作中最好將冷凝管頂端進行覆蓋。
5.索氏提取管的清洗,一般可以用鉻酸洗液進行清洗,去離子水(可以在使用前多準備一些用正己烷萃取一下備用)在清洗幹淨、烘幹或者風幹。
索氏提取方法的主要優點:
不需要使用特殊的儀器設備,儀器成本低,很多實驗室都可以得以實現、使用成本較低。
傳統索氏提取方法的主要缺點:
1.提取過程長,一般6~8小時以上;
2.玻璃器具易損壞,尤其是虹吸回流管很容易破損;
3.開放性係統,易出現溶劑泄露,汙染環境;操作人員可能吸入較多溶劑;
目前,索氏提取已經發展出了自動索氏提取法(Automated Soxhlet Extraction Method),EPA3541也有標準方法。相比與索氏提取,自動索氏提取法具有提取時間較快、操作自動化、溶劑可以回收等有點。
自動索式提取可以實現提取過程的自動化操作且優勢明顯:
快速加熱;無需人員看管;使用溶劑量**減少;至少比傳統索式提取快五倍;容積可回收等;
四.液-液萃取法
向液體混合物中加入某種適當溶劑,利用組分溶解度的差異使溶質由原溶液轉移到萃取劑的過程;
向溶液試樣加入非極性或水溶性的溶劑,用振蕩等方法來輔助提取試樣中的溶質;
適合液態樣品,或經過其他方法溶劑提取後的液態基質;常用非極性的溶劑有正己烷、苯、乙酸乙酯;常用的水溶性溶劑有二氯甲烷、甲醇、乙、丙酮以及水;
注意:
不需要昂貴的設備和特殊儀器,操作簡便;常用到大體積的溶劑,而在振蕩分配過程中則要控製溶劑體積,費時費力,容易引起誤差。
五.超聲波提取方法(超聲波輔助萃取法,Ultrasonic Extraction)
超聲波是一種高頻率的聲波,利用空化作用產生的能量,用溶劑將各類食品中殘留農藥提取出來;
將樣品放在超聲波清洗機,利用超聲波來促進提取適合液態樣品,或經過其他方法溶劑提取後的液態基質;適用溶劑包括甲醇,乙醇,丙酮,二氯甲烷,苯等,簡便,提取溫度低、提取率高,提取時間短;
1.提取原理
(1)機械效應
超聲波在介質中的傳播可以使介質質點在其傳播空間內產生振動,從而強化介質的擴散、傳(chuan)播(bo),這(zhe)就(jiu)是(shi)超(chao)聲(sheng)波(bo)的(de)機(ji)械(xie)效(xiao)應(ying)。超(chao)聲(sheng)波(bo)在(zai)傳(chuan)播(bo)過(guo)程(cheng)中(zhong)產(chan)生(sheng)一(yi)種(zhong)輻(fu)射(she)壓(ya)強(qiang),沿(yan)聲(sheng)波(bo)方(fang)向(xiang)傳(chuan)播(bo),對(dui)物(wu)料(liao)有(you)很(hen)強(qiang)的(de)破(po)壞(huai)作(zuo)用(yong),可(ke)使(shi)細(xi)胞(bao)組(zu)織(zhi)變(bian)形(xing),植(zhi)物(wu)蛋(dan)白(bai)質(zhi)變(bian)性(xing);同(tong)時(shi),它(ta)還(hai)可(ke)以(yi)給(gei)予(yu)介(jie)質(zhi)和(he)懸(xuan)浮(fu)體(ti)以(yi)不(bu)同(tong)的(de)加(jia)速(su)度(du),且(qie)介(jie)質(zhi)分(fen)子(zi)的(de)運(yun)動(dong)速(su)度(du)遠(yuan)大(da)於(yu)懸(xuan)浮(fu)體(ti)分(fen)子(zi)的(de)運(yun)動(dong)速(su)度(du)。從(cong)而(er)在(zai)兩(liang)者(zhe)間(jian)產(chan)生(sheng)摩(mo)擦(ca),這(zhe)種(zhong)摩(mo)擦(ca)力(li)可(ke)使(shi)生(sheng)物(wu)分(fen)子(zi)解(jie)聚(ju),使(shi)細(xi)胞(bao)壁(bi)上(shang)的(de)有(you)效(xiao)成(cheng)分(fen)更(geng)快(kuai)地(di)溶(rong)解(jie)於(yu)溶(rong)劑(ji)之(zhi)中(zhong)。
(2)空化效應
通常情況下,介質內部或多或少地溶解了一些微氣泡,這些氣泡在超聲波的作用下產生振動,當聲壓達到一定值時,氣泡由於定向擴散(rectieddiffvsion)而er增zeng大da,形xing成cheng共gong振zhen腔qiang,然ran後hou突tu然ran閉bi合he,這zhe就jiu是shi超chao聲sheng波bo的de空kong化hua效xiao應ying。這zhe種zhong氣qi泡pao在zai閉bi合he時shi會hui在zai其qi周zhou圍wei產chan生sheng幾ji千qian個ge大da氣qi壓ya的de壓ya力li,形xing成cheng微wei激ji波bo,它ta可ke造zao成cheng植zhi物wu細xi胞bao壁bi及ji整zheng個ge生sheng物wu體ti破po裂lie,而er且qie整zheng個ge破po裂lie過guo程cheng在zai瞬shun間jian完wan成cheng,有you利li於yu有you效xiao成cheng分fen的de溶rong出chu。
(3)熱效應
和he其qi它ta物wu理li波bo一yi樣yang,超chao聲sheng波bo在zai介jie質zhi中zhong的de傳chuan播bo過guo程cheng也ye是shi一yi個ge能neng量liang的de傳chuan播bo和he擴kuo散san過guo程cheng,即ji超chao聲sheng波bo在zai介jie質zhi的de傳chuan播bo過guo程cheng中zhong,其qi聲sheng能neng不bu斷duan被bei介jie質zhi的de質zhi點dian吸xi收shou,介jie質zhi將jiang所suo吸xi收shou的de能neng量liang全quan部bu或huo大da部bu分fen轉zhuan變bian成cheng熱re能neng,從cong而er,導dao致zhi介jie質zhi本ben身shen和he藥yao材cai組zu織zhi溫wen度du的de升sheng高gao,增zeng大da了le藥yao物wu有you效xiao成cheng分fen的de溶rong解jie速su度du。由you於yu這zhe種zhong吸xi收shou聲sheng能neng引yin起qi的de藥yao物wu組zu織zhi內nei部bu溫wen度du的de升sheng高gao是shi瞬shun間jian的de,因yin此ci可ke以yi使shi被bei提ti取qu的de成cheng分fen的de生sheng物wu活huo性xing保bao持chi不bu變bian。
此外,超聲波還可以產生許多次級效應,如,乳化、擴散、擊碎、化(hua)學(xue)效(xiao)應(ying)等(deng),這(zhe)些(xie)作(zuo)用(yong)也(ye)促(cu)進(jin)了(le)植(zhi)物(wu)體(ti)中(zhong)有(you)效(xiao)成(cheng)分(fen)的(de)溶(rong)解(jie),促(cu)使(shi)藥(yao)物(wu)有(you)效(xiao)成(cheng)分(fen)進(jin)入(ru)介(jie)質(zhi),並(bing)於(yu)介(jie)質(zhi)充(chong)分(fen)混(hun)合(he),加(jia)快(kuai)了(le)提(ti)取(qu)過(guo)程(cheng)的(de)進(jin)行(xing),並(bing)提(ti)高(gao)了(le)藥(yao)物(wu)有(you)效(xiao)成(cheng)分(fen)的(de)提(ti)取(qu)率(lv)。
注意:
1.chaoshengbotiquqigonglvjiaoda,zaoyinbijiaoda,duirongqibidehoubojirongqifangzhiweizhiyaoqiujiaogao,muqian,jinzaishiyanshineishiyong,nanyiyingyongdaodaguimoshengchanshang。muqian,shiyanshishiyongjiaoduodehaishichaoshengboqingxiqizuoweitiquyiqi。yibanzaichaoshengbotiquzhiqianyinggaijiangdaitiquyangpinyongtiqurongjijinpaoyiduanshijian,shizhixianghuchongfendejiechu、滲透。在超聲波提取中,最好都是使用混合提取溶劑,分步驟提取,以提高目標物的提取效率。
2.對玻璃容器也有一定的要求,如果玻璃容器的質地不好,有裂隙等,在提取過程中很容易破裂,因此,在選擇玻璃器皿時應特別注意。
3.有機溶劑在使用超聲波提取時,揮發性會增強,汙染環境,要注意提取容器不能密閉,應有一定的空間。
4.使(shi)用(yong)超(chao)聲(sheng)波(bo)清(qing)洗(xi)器(qi)進(jin)行(xing)提(ti)取(qu),需(xu)注(zhu)意(yi)在(zai)整(zheng)個(ge)超(chao)聲(sheng)容(rong)器(qi)中(zhong)超(chao)聲(sheng)波(bo)場(chang)的(de)分(fen)布(bu)是(shi)不(bu)均(jun)勻(yun)的(de),類(lei)似(si)在(zai)波(bo)場(chang)的(de)分(fen)布(bu)中(zhong)有(you)死(si)角(jiao),這(zhe)會(hui)使(shi)得(de)部(bu)分(fen)樣(yang)品(pin)的(de)提(ti)取(qu)效(xiao)率(lv)顯(xian)著(zhu)下(xia)降(jiang),從(cong)而(er)導(dao)致(zhi)重(zhong)現(xian)性(xing)較(jiao)差(cha)。
5.超聲波提取所需要的溶劑量較大,一般都是分步提取、過濾。雖然操作簡單但是操作的勞動強度較大,而且需要進行過濾等步驟將提取溶劑與樣品分離。
六.固相萃取法
利li用yong吸xi附fu劑ji對dui待dai測ce組zu分fen與yu幹gan擾rao雜za質zhi的de吸xi附fu能neng力li的de差cha異yi,在zai層ceng析xi柱zhu中zhong加jia入ru一yi種zhong或huo幾ji種zhong吸xi附fu劑ji,再zai加jia入ru測ce樣yang本ben提ti取qu液ye,用yong淋lin洗xi液ye洗xi脫tuo。適shi用yong於yu分fen離li保bao留liu性xing質zhi差cha別bie很hen大da的de化hua合he物wu;常用吸附劑包括氟羅裏矽土,氧化鋁,矽藻土等。
優缺點:
操作簡單,適用麵廣;有機溶劑的使用量較大,且不適於大批量樣品的前處理。
七.固相微萃取法
①固相微萃取裝置主要由手柄和萃取頭2部分構成,萃取頭是塗有不同吸附劑的熔融纖維,選擇的基本原則是“相似相溶原理”;
②用極性塗層萃取極性化合物,用非極性塗層萃取非極性化合物。集采集、濃縮於一體,簡單、方便、無溶劑,不會造成二次汙染;
③若在樣品中加入適當的內標進行定量分析,其重現性和精密度都非常好。
八.超臨界流體萃取
利用超臨界流體高密度、粘度小、滲透能力強等特點,能快速、高效將被測物從樣品基質中分離,先通過升壓、升溫使其達到超臨界狀態,在該狀態下萃取樣品,再通過減壓、降溫或吸附收集後分析,對熱不穩定、難(nan)揮(hui)發(fa)性(xing)的(de)烴(ting)類(lei),非(fei)極(ji)性(xing)脂(zhi)溶(rong)化(hua)合(he)物(wu),二(er)氧(yang)化(hua)碳(tan),水(shui),乙(yi)烯(xi),丙(bing)酮(tong),乙(yi)烷(wan)等(deng)可(ke)進(jin)行(xing)族(zu)選(xuan)擇(ze)性(xing)萃(cui)取(qu),萃(cui)取(qu)物(wu)不(bu)會(hui)改(gai)變(bian)其(qi)原(yuan)來(lai)的(de)性(xing)質(zhi),萃(cui)取(qu)過(guo)程(cheng)簡(jian)單(dan)易(yi)於(yu)調(tiao)節(jie),萃(cui)取(qu)裝(zhuang)置(zhi)較(jiao)昂(ang)貴(gui),不(bu)適(shi)合(he)分(fen)析(xi)水(shui)樣(yang)和(he)極(ji)性(xing)較(jiao)強(qiang)的(de)物(wu)質(zhi)。
九.自製提取裝置
將超聲波的空化效能與固相萃取的特性結合起來。超聲波提取後,再通過固相萃取柱來純化。適用於濃縮樣品中的物質、分離保留性質差別很大的化合物,或經過其他方法溶劑提取後的液態基質,常用試劑水,乙烯,丙酮,乙烷等;吸附劑氟羅裏矽土,氧化鋁,矽藻土等,集合了超聲波提取和固相萃取兩種方法的優點,適合多樣品的同時處理需要定時清洗。
十.微波輔助萃取法
①微wei波bo能neng是shi一yi種zhong非fei離li子zi輻fu射she,它ta使shi分fen子zi中zhong的de離li子zi發fa生sheng位wei移yi和he偶ou極ji矩ju,其qi中zhong有you機ji物wu受shou微wei波bo輻fu射she使shi其qi分fen子zi排pai列lie成cheng行xing,又you迅xun速su恢hui複fu到dao無wu序xu狀zhuang態tai。這zhe種zhong反fan複fu進jin行xing的de分fen子zi運yun動dong,讓rang樣yang品pin液ye迅xun速su加jia熱re;
②微wei波bo穿chuan透tou力li強qiang,能neng深shen入ru機ji體ti內nei部bu,輻fu射she能neng迅xun速su傳chuan遍bian整zheng個ge樣yang品pin液ye,而er不bu使shi其qi表biao麵mian過guo熱re。內nei部bu的de分fen子zi運yun動dong溶rong劑ji與yu樣yang品pin液ye充chong分fen作zuo用yong,加jia速su了le提ti取qu過guo程cheng。適shi用yong於yu土tu壤rang、食品、飼料等固體物中的有機物,植物及肉類食品中的農殘提取簡便、快速。該法在縮短萃取時間和提高萃取效率的同時也使萃取液中幹擾物質的濃度增大,加重了淨化步驟的負擔。
十一.加速溶劑萃取法方法
(ASE,acceleratedsolventextraction)該法是在較高溫度(20~2000C)和壓力條件(10.3~20.6MPa)下,用有機溶劑萃取。
①適用於固體和半固體樣品;
②在食品分析中有廣泛的應用;
③提取複雜的生物基質中有機氯農藥;
④處理中毒樣品;
⑤有機溶劑用量少(1g樣品僅需1.5mL溶劑);
⑥樣品處理時間短(12~20min);
⑦回收率好;
⑧處理中毒樣品,如氟乙酰胺、毒鼠強,更顯示出其萃取快速的優越性,能為及時搶救贏得時間;
十二.基質固相分散萃取法
(MSPD,matrixsolid phasedispersion)此技術使分析者能同時製備、萃取和淨化樣品
該技術包括在玻璃研缽中將鍵合相載體和組織基質混合,用玻璃杵將其研碎成近乎均質分散的組織細胞和基質成分。組織與塗以C18或C3、C8的矽膠迅速混合產生半固體物質,將半固體物質填充於柱中。根據不同分析物在聚合物/組織基質中的溶解度不同進行洗脫。這樣獲得的萃取物在儀器分析前不需要再處理。
①特別適合於食品中藥物、汙染物及農殘分析;
②幾乎囊括了所有的固體樣品;
③對於很難勻漿和均質的樣品,尤其適於處理。
十三.衍生化技術
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