CHO細胞,以其獨特的優勢,在生物製藥領域中扮演著舉足輕重的角色。因其能夠快速、高水平地表達多種重組蛋白,使用懸浮培養工藝易於放大培養,CHOxibaozaishengwuzhiyaolingyuzhongbeiguangfanyingyongyushengchanzhiliaoxingdanbai。danyouyuguimofangdaguochengzhonggecanshujiandetiaozhengguoyufuza,xibaopeiyangxitongdefangdarengranshiyimentongchangyikaofanfushiyanlaiquedingzuijiagongyicanshuhecaozuocelvedeyishu。
關鍵工藝條件
1.通氣
在(zai)哺(bu)乳(ru)動(dong)物(wu)細(xi)胞(bao)生(sheng)物(wu)反(fan)應(ying)器(qi)中(zhong),通(tong)氣(qi)是(shi)一(yi)個(ge)關(guan)鍵(jian)組(zu)成(cheng)部(bu)分(fen),特(te)別(bie)是(shi)在(zai)高(gao)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)下(xia)操(cao)作(zuo)時(shi),因(yin)為(wei)需(xu)要(yao)向(xiang)細(xi)胞(bao)提(ti)供(gong)足(zu)夠(gou)的(de)氧(yang)氣(qi),同(tong)時(shi)必(bi)須(xu)去(qu)除(chu)二(er)氧(yang)化(hua)碳(tan),以(yi)防(fang)止(zhi)其(qi)在(zai)培(pei)養(yang)液(ye)中(zhong)積(ji)累(lei)
2.氧氣
在CHO細胞培養中,溶氧水平通常保持在空氣飽和度的10%到80%之間。過高的氧濃度會導致活性氧(ROS)的積累,這會導致線粒體呼吸鏈和細胞內氧化還原的改變,最終導致細胞生長抑製和特異性生產力下降。另一方麵,低氧條件也會誘導ROS積累。
氧氣傳質係數(kLa)用於衡量係統的氧氣傳輸能力。kLa主要與單位體積功率輸入(P/V)和表觀氣體速度(vs)相關,其中K是常數,指數α和β分別約為 0.4和0.5,氣泡大小、混合速度、氣體流速、體積和生物反應器幾何形狀等工藝參數都會影響kLa。
3.二氧化碳
在哺乳動物細胞培養中,溶解的二氧化碳 (pCO2) 水平通常保持在4%-10%的CO2飽和度(30-70 mmHg)。高濃度的溶解CO2(150–200 mmHg)會對多種哺乳動物細胞的細胞生長和生產力產生不利影響。在CHO細胞培養中,高pCO2水平可抑製細胞生長、細胞生產力並改變產品質量。
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