8. 線性
樣yang本ben經jing梯ti度du稀xi釋shi後hou檢jian測ce分fen析xi即ji為wei線xian性xing分fen析xi,此ci過guo程cheng也ye是shi用yong於yu消xiao除chu樣yang本ben的de基ji質zhi效xiao應ying。基ji質zhi效xiao應ying導dao致zhi的de結jie果guo有you假jia陰yin性xing和he假jia陽yang性xing兩liang種zhong,在zai線xian性xing稀xi釋shi時shi就jiu可ke以yi辨bian別bie出chu來lai,當dang存cun在zai基ji質zhi效xiao應ying時shi樣yang本ben的de稀xi釋shi線xian性xing就jiu不bu會hui滿man足zu,說shuo明ming該gai類lei樣yang本ben有you可ke能neng不bu適shi用yongELISA kit,在研發階段就需要優化反應體係等消除基質效應帶來的幹擾。
9. 回收率
回收實驗可檢測試劑盒是否受幹擾因子的影響,也是辨別基質效應的一種方法。在研發過程中,一般會采用低、中和高濃度的分析物被摻入到已知濃度的驗證樣本中,進行回收實驗測定,回收率應介於80%-120%,表明試劑盒的性能較好。
10. 穩定性
即試劑盒在有效期內的穩定性。通常采用加速降解的方法來推斷試劑盒的有效期。通常試劑盒在37℃放置一天折合有效期2個月,實際工作中,一般將試劑盒在37℃破壞3-7tianhou,ranhoujianceshangshuzhibiao,guanchashifouzaifanweinei。yekeliuyangzhiyouxiaoqihoujinxingjianyan,laihengliangyouxiaoqi,duiyupiliangdadezhibiao,kejiangjiasujiangjieheliuyangjianyanxiangjiehedefangfa。
另外,ELISA實驗操作時質控標準如下:
1、嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
2、加jia樣yang後hou及ji時shi放fang人ren孵fu箱xiang。標biao本ben較jiao多duo時shi,要yao分fen批pi操cao作zuo。按an說shuo明ming步bu驟zhou嚴yan格ge控kong製zhi操cao作zuo時shi間jian,防fang止zhi孵fu育yu時shi間jian人ren為wei延yan長chang,導dao致zhi非fei特te異yi性xing結jie合he緊jin附fu於yu反fan應ying孔kong周zhou圍wei,難nan以yi清qing洗xi徹chedi。
3、封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致“花板”的出現。
4、用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板後好在吸水紙(選擇幹淨、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍幹:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板”的出現。
5、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
6、加酶試劑後用吸水紙在酶標板表麵輕拭吸幹。
7、顯色劑盡量在臨用前配製,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
8、加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產生氣泡。
9、應保證C清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至低限度。從而提高檢測的特異性。並得到更準確、可靠的實驗結果。
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