01 儀器的預熱問題

在一般分光光度計的使用說明書上，要求儀器預熱時間約20分鍾；若是帶微處理器的分光光度計，開機後儀器自動進入自檢(初始化)狀態，約需10分鍾左右。

在分光光度計預熱這個環節上，很多使用者或多或少存在問題，如開機隻預熱電路係統 (不調節波長
、打開吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過程就是預熱等。

對帶微處理器有自檢功能的分光光度計，開機後儀器自檢 (初始化)結束後，在測定窗口上，設置所需波長值， 用一個吸收池裝上純淨水置於光路上，調 “0000A”後
，預熱儀器

，當儀器顯示讀數不再變化後即可進行測定。

對於紫外可見分光光度計，由於有雙光源 (鎢燈與氘燈)，為了延長燈的使用壽命，開機自檢完成後可以關掉測定時不用的光源燈。

02 吸光度測定重複性的問題

分光光度計在測定過程中，發現同一個溶液在不同時間裏其測定結果不同，即重複性不好
，其原因是什麼?排除測定錯誤因素外，可能原因有：
(1)儀器預熱時間不夠或預熱方法不對所造成，應延長預熱時間或采用正確的預熱方法。
(2)光電轉換器 (如光電管)因長時間使用其光電轉換 效率發生了變化導致。這時標準溶液與待測溶液的吸光度都 同樣變低
，在相對定量時對結果影響很小。但是對這類儀器，一般建議連續使用時間不應超過3h
，若需長時間使用，最好間歇30min。

比色皿

樣品室的主要作用就是放置樣品，液體測試一般使用比色皿，比色皿分為石英和玻璃兩種

，玻璃比色皿主要用於可見區（320nm-2500nm），在紫外區有吸收，不適用於紫外區，石英比色皿可以用於紫外可見近紅外區（190nm-2500nm），另外有些透明有機玻璃也可以用作吸收池。

如何區分比色皿

（1）比色皿上方通常會有字母標識，各型號標識稍有差別
，玻璃比色皿口沿處有“G”(Glass 玻璃)

，而石英比色皿口沿處有“Q”(Quartz 石英) 或者 “S”（Silicide石英玻璃）。

（2）使用紫外可見光分光光度計來鑒別玻璃、石英比色皿：現行國家檢定規程規定石英比色皿在250nm下吸光度應小於0.07abs，若吸光度大於0.07abs 則為玻璃比色皿。

如何配對比色皿

使用需要配對的比色皿，在可適用的相同波長下，以空氣或者純水為介質，使用透光率T進行測量，將每組比色皿中的一隻透射率調為100%
，然後測量另外一隻透光率，凡透射率之差不超過0.5%T
，即可配對使用。

如何清洗比色皿

biseminshifenxiguochengzhongduijieguoyouhendayingxiangdeyigeyinsu，biseminwuranzhihouduiceshideyingxianggengda，huishiceshibuwendingshenzhijieguobuzhun，yinciwanchengyangpincedingzhihou，bixuchediqingxibisemin，xialieqingxiliuchengjingongcankao：蒸餾水清洗――乙醇清洗――幹燥。

如果比色皿被汙染
，請按照如下流程清洗：在洗滌劑中浸泡約10min（30-50℃）――蒸餾水清洗――再加有少量雙氧水的稀硝酸中浸泡約30min――蒸餾水清洗――幹燥。 

 注：如果比色皿被有機物汙染

，請先用如丙酮等有機溶劑將有機物洗去並用蒸餾水清洗。

值得注意的是：分fen析xi實shi驗yan常chang用yong的de鉻ge酸suan洗xi液ye不bu宜yi用yong於yu比bi色se皿min洗xi滌di，這zhe是shi因yin為wei帶dai水shui的de比bi色se皿min在zai該gai洗xi液ye中zhong可ke能neng會hui產chan生sheng熱re量liang，致zhi使shi比bi色se皿min膠jiao接jie麵mian裂lie開kai而er損sun壞huai。同tong時shi經jing洗xi液ye洗xi滌di後hou的de比bi色se皿min還hai可ke能neng殘can存cun微wei量liang鉻ge(鉻在紫外區有吸收) ，因此會影響實驗的測定。

03 使用注意事項

1、使用的吸收池必須潔淨，並注意配對使用。量瓶
、移液吸管均應校正、洗淨後使用。

2、取吸收池時，手指應拿毛玻璃麵的兩側，裝盛樣品以池體的4/5weidu，shiyonghuifaxingrongyeshiyingjiagai
，touguangmianyaoyongcajingzhiyoushangerxiacashiganjing，jianshiyingwurongjicanliu。xishouchifangruyangpinshishiyingzhuyifangxiangxiangtong。yonghouyongrongjihuoshuichongxiganjing，liangganfangchenbaocun。

3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外
，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。

4
、測定時除另有規定外

，應以配製供試品溶液的同批溶劑為空白對照
，采用1cm石英吸收池，在規定的吸收峰±2nm以(yi)內(nei)
，測(ce)幾(ji)個(ge)點(dian)的(de)吸(xi)收(shou)度(du)或(huo)由(you)儀(yi)器(qi)在(zai)規(gui)定(ding)的(de)波(bo)長(chang)附(fu)近(jin)自(zi)動(dong)掃(sao)描(miao)測(ce)定(ding)，以(yi)核(he)對(dui)供(gong)試(shi)品(pin)的(de)吸(xi)收(shou)峰(feng)位(wei)置(zhi)是(shi)否(fou)正(zheng)確(que)，並(bing)以(yi)吸(xi)收(shou)度(du)最(zui)大(da)的(de)波(bo)長(chang)作(zuo)為(wei)測(ce)定(ding)波(bo)長(chang)
，除(chu)另(ling)有(you)規(gui)定(ding)外(wai)吸(xi)收(shou)度(du)最(zui)大(da)波(bo)長(chang)應(ying)在(zai)該(gai)品(pin)種(zhong)項(xiang)下(xia)規(gui)定(ding)的(de)測(ce)定(ding)波(bo)長(chang)±2nm以內。

5、供試品應取2份，如為對照品比較法
，對照品一般也應取2份。並進行平行操作
，每份結果與平均值的偏差應在±0.5%以內。

6
、選(xuan)用(yong)儀(yi)器(qi)的(de)狹(xia)縫(feng)寬(kuan)度(du)應(ying)小(xiao)於(yu)供(gong)試(shi)品(pin)吸(xi)收(shou)帶(dai)的(de)半(ban)寬(kuan)度(du)，否(fou)則(ze)測(ce)得(de)的(de)吸(xi)收(shou)度(du)值(zhi)會(hui)偏(pian)低(di)，狹(xia)縫(feng)寬(kuan)度(du)的(de)選(xuan)擇(ze)應(ying)以(yi)減(jian)少(shao)狹(xia)縫(feng)寬(kuan)度(du)時(shi)供(gong)試(shi)品(pin)的(de)吸(xi)收(shou)度(du)不(bu)再(zai)增(zeng)加(jia)為(wei)準(zhun)
，對(dui)於(yu)大(da)部(bu)分(fen)被(bei)測(ce)品(pin)種(zhong)，可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)2nm縫寬。

04 日常維護及保養

1
、若實驗中需大幅度改變測試波長
，需稍等片刻

，等燈熱平衡後，重新校正“0”和“100%”點。然後再測量。

2、指針式儀器在未接通電源時

，電表的指針必須位於零刻度上。若不是這種情況，需進行機械調零。

3、比色皿使用完畢後，請立即用蒸餾水衝洗幹淨，並用幹淨柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表麵光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。

4、操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。

5

、一般的分光光度計
，由於其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點是放大倍數大
，因而可以用於檢測微弱光 電信號，而不能用來檢測強光。否則容易產生信號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點，在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露於光下，因此在 預熱時，應打開比色皿蓋或使用擋光杆，避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩。

6、放大器靈敏度換擋後

，必須重新調零。

7、比色杯必須配套使用，否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下：

分別向被測的兩隻杯子裏注入同樣的溶液，把儀器置於某一波長處。 將某一個池的透射比值調至100%
，測量其它各池的透射比值
，記錄其示值之差及通光方向
，如透射比之差在±0.5%的範圍內則可以配套使用

，若超出此範圍應考慮其對測試結果的影響。