手機版
（注：流動相以甲醇為例，色譜柱以C18為例）
“堵”的(de)表(biao)現(xian)現(xian)象(xiang)就(jiu)是(shi)柱(zhu)壓(ya)異(yi)常(chang)升(sheng)高(gao)，直(zhi)接(jie)原(yuan)因(yin)就(jiu)是(shi)流(liu)路(lu)不(bu)暢(chang)。堵(du)塞(sai)的(de)主(zhu)要(yao)位(wei)置(zhi)就(jiu)是(shi)在(zai)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)前(qian)端(duan)，最(zui)主(zhu)要(yao)原(yuan)因(yin)就(jiu)是(shi)流(liu)動(dong)相(xiang)裏(li)有(you)雜(za)質(zhi)，雜(za)質(zhi)的(de)主(zhu)要(yao)來(lai)源(yuan)就(jiu)是(shi)細(xi)菌(jun)。
“堵”的原因
新(xin)製(zhi)備(bei)的(de)純(chun)水(shui)在(zai)室(shi)內(nei)放(fang)置(zhi)幾(ji)天(tian)就(jiu)會(hui)長(chang)菌(jun)，而(er)這(zhe)些(xie)細(xi)菌(jun)雖(sui)然(ran)肉(rou)眼(yan)不(bu)可(ke)見(jian)，卻(que)足(zu)以(yi)堵(du)塞(sai)柱(zhu)填(tian)料(liao)顆(ke)粒(li)的(de)空(kong)隙(xi)，造(zao)成(cheng)柱(zhu)子(zi)很(hen)快(kuai)報(bao)廢(fei)。這(zhe)就(jiu)是(shi)在(zai)配(pei)製(zhi)流(liu)動(dong)相(xiang)時(shi)造(zao)成(cheng)的(de)細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran)的(de)原(yuan)因(yin)，解(jie)決(jue)它(ta)的(de)方(fang)法(fa)很(hen)簡(jian)單(dan)，就(jiu)是(shi)確(que)保(bao)水(shui)的(de)可(ke)靠(kao)性(xing)。
（2）成箱購買市售品牌純淨水，如，500mL的(de)娃(wa)哈(ha)哈(ha)，這(zhe)些(xie)水(shui)的(de)質(zhi)量(liang)足(zu)以(yi)應(ying)付(fu)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)的(de)要(yao)求(qiu)。先(xian)隨(sui)機(ji)抽(chou)取(qu)一(yi)支(zhi)做(zuo)一(yi)下(xia)細(xi)菌(jun)平(ping)板(ban)實(shi)驗(yan)，待(dai)菌(jun)落(luo)數(shu)合(he)格(ge)方(fang)可(ke)使(shi)用(yong)。這(zhe)樣(yang)每(mei)次(ci)隻(zhi)要(yao)單(dan)獨(du)開(kai)一(yi)支(zhi)即(ji)可(ke)，也(ye)很(hen)方(fang)便(bian)。每(mei)次(ci)成(cheng)本(ben)2元左右。
（2）流動相過濾在經濟成本上不劃算。買一套過濾裝置要6000多(duo)元(yuan)，且(qie)過(guo)濾(lv)器(qi)公(gong)認(ren)是(shi)比(bi)較(jiao)容(rong)易(yi)損(sun)壞(huai)的(de)設(she)備(bei)。最(zui)主(zhu)要(yao)是(shi)過(guo)濾(lv)片(pian)的(de)成(cheng)本(ben)太(tai)高(gao)，一(yi)片(pian)就(jiu)要(yao)幾(ji)十(shi)元(yuan)。按(an)一(yi)般(ban)液(ye)相(xiang)柱(zhu)的(de)正(zheng)常(chang)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming)計(ji)算(suan)，過(guo)濾(lv)片(pian)的(de)成(cheng)本(ben)會(hui)遠(yuan)遠(yuan)高(gao)於(yu)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)成(cheng)本(ben)。
（3）流動相過濾對於工作效率成本不劃算。使用溶劑過濾器有一個預清洗、裝備、使用、用後清洗，晾幹的過程，至少也有一個小時的時間。這個成本也不能忽視。
（4）在實際工作未發現流動相不過濾會對柱壽命有任何影響。我們起碼有6年時間沒有做過流動相過濾的工作，但是和國內同行相比較，在同等使用強度下我們的柱壽命是比較長的。
從單純實驗效果來說，後一種有明顯的優點：首先是簡單，不需要實驗者另個計算配比混合，其次就是比例準確，能得到保留時間重複性極好的實驗效果。
但是，它有一個致命的缺陷，就是純水在流動相瓶中幾天時間就會長細菌（很多情況下不僅僅用純水作流動相，而是用緩衝鹽溶液，本身就是優質肥料，細菌長得更迅速），一(yi)旦(dan)有(you)細(xi)菌(jun)柱(zhu)子(zi)就(jiu)壞(huai)得(de)很(hen)快(kuai)。所(suo)以(yi)這(zhe)種(zhong)方(fang)式(shi)要(yao)求(qiu)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)每(mei)次(ci)實(shi)驗(yan)都(dou)要(yao)用(yong)新(xin)製(zhi)備(bei)的(de)純(chun)水(shui)，更(geng)要(yao)求(qiu)在(zai)每(mei)次(ci)實(shi)驗(yan)後(hou)把(ba)水(shui)相(xiang)換(huan)掉(diao)，換(huan)成(cheng)甲(jia)醇(chun)衝(chong)洗(xi)幹(gan)淨(jing)，這(zhe)一(yi)點(dian)在(zai)實(shi)際(ji)工(gong)作(zuo)中(zhong)很(hen)多(duo)人(ren)意(yi)識(shi)不(bu)強(qiang)，就(jiu)是(shi)意(yi)識(shi)到(dao)了(le)但(dan)多(duo)次(ci)使(shi)用(yong)中(zhong)總(zong)有(you)一(yi)兩(liang)次(ci)會(hui)遺(yi)漏(lou)，但(dan)是(shi)往(wang)往(wang)這(zhe)一(yi)兩(liang)次(ci)就(jiu)足(zu)以(yi)產(chan)生(sheng)致(zhi)命(ming)的(de)影(ying)響(xiang)。因(yin)為(wei)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)堵(du)塞(sai)是(shi)不(bu)可(ke)逆(ni)的(de)。
所以，寧可犧牲小小的保留時間的重複性，也不要用純水溶液作為流動相的一組。從實際實驗效果來說，我建議用10％的甲醇水代替純水溶液（以前我做過不同比例甲醇水的細菌總數實驗，在5％就基本可以抑菌，在10％及以上就可以完全殺菌了），這樣可以有效排除長細菌的隱患，既可作流動相，也可衝柱。就算是在配製流動相時會計算得麻煩一些，但是一次麻煩，終身受益。
（2）樣品處理液淨化得不幹淨，長期會在六通閥和柱之間形成阻塞不暢。
（3）在使用手動六通閥時，有些人可能由於手勁小的原因，轉動的不到位，於是造成流路形成了死堵，壓力快速升高超過警戒值。
（4）zaishiyongjinshuguanluzuochufeiyeguanshi，yingdangzhuyizuihaofeiyepingzhongxianfangyixieshui，bingbafeiyeguandechukouduanfangzaiyemianxia。ruguoweiyuzaiyexiangshangqieshiyanshiyongjiaogaonongdudehuanchongyanrongye，zaitingjishikenengzaichukouduanjiejingchengkuaibingzaochengdusai。zhezhongqingkuangbuchangjian，danquedequefashengguo。
漏液的原因分兩種：
（1）接觸硬件不當
在更換零件如流路管或換柱時(shi)，換(huan)的(de)接(jie)頭(tou)接(jie)口(kou)不(bu)匹(pi)配(pei)，造(zao)成(cheng)漏(lou)液(ye)。要(yao)注(zhu)意(yi)不(bu)同(tong)公(gong)司(si)的(de)柱(zhu)子(zi)接(jie)頭(tou)很(hen)多(duo)是(shi)不(bu)同(tong)的(de)，甚(shen)至(zhi)同(tong)一(yi)家(jia)公(gong)司(si)在(zai)不(bu)同(tong)時(shi)期(qi)生(sheng)產(chan)的(de)液(ye)相(xiang)柱(zhu)接(jie)頭(tou)也(ye)有(you)很(hen)大(da)區(qu)別(bie)。當(dang)然(ran)選(xuan)用(yong)PEEK接頭是一個較好的解決方法，不僅通用性好，而且靠手擰就能保證不漏液。
即使是接口本身是匹配的，但是如果操作不當也會漏液，一種不當就是力度把握不好，擰得太緊或太鬆；另一種不當就是致命的錯誤：滑hua絲si，這zhe是shi往wang往wang是shi動dong手shou能neng力li不bu太tai強qiang，螺luo絲si釘ding很hen少shao擰ning的de工gong作zuo者zhe犯fan的de錯cuo誤wu，滑hua絲si的de後hou果guo不bu僅jin是shi漏lou液ye那na麼me簡jian單dan，常chang造zao成cheng重zhong要yao部bu件jian的de報bao廢fei。解jie決jue這zhe個ge問wen題ti隻zhi能neng靠kao惡e補bu基ji本ben功gong來lai實shi驗yan，那na就jiu是shi擰ning螺luo絲si。
（2）使用儀器不當
如果是輸送泵漏液，最常見的原因就是在活塞位置緩衝鹽析出造成。
xichudeyuanyinyouliangge，yishishiyonghuanchongyanrongyeshituranjiarulechunjiachunerxichu，zhezhongcuowuhenrongyibimian，zheshijinliangbuyaoyongchundejiachunhechunshui。zhiyaohuxiangyou10％的比例就不會出現這個問題。另一原因是在用緩衝鹽溶液（不論甲醇含量有多少）作流動相時，實驗結束後沒有換甲醇水衝洗，使得微滲的流動相幹燥形成晶體造成。
不過，輸送泵漏液並不是非得馬上修不可，衝洗幹淨並在以後的使用中多加小心一般都可以正常使用。
檢(jian)測(ce)器(qi)漏(lou)液(ye)是(shi)個(ge)很(hen)麻(ma)煩(fan)的(de)事(shi)，一(yi)般(ban)都(dou)是(shi)吸(xi)收(shou)池(chi)的(de)問(wen)題(ti)，更(geng)換(huan)的(de)費(fei)用(yong)相(xiang)當(dang)高(gao)。但(dan)是(shi)並(bing)不(bu)是(shi)說(shuo)一(yi)定(ding)要(yao)馬(ma)上(shang)更(geng)換(huan)，還(hai)可(ke)以(yi)從(cong)實(shi)際(ji)實(shi)驗(yan)效(xiao)果(guo)看(kan)能(neng)否(fou)湊(cou)合(he)使(shi)用(yong)。
1.過濾頭
抽液時，在流路管中有不規則但持續的小氣泡產生，這時考慮的是流動相有沒有脫氣（需要特別提醒即使是有了真空脫氣機也是要先超聲脫氣的，起碼可以減少脫氣機的工作壓力並提高工作效率），如(ru)果(guo)已(yi)經(jing)脫(tuo)了(le)氣(qi)，則(ze)要(yao)注(zhu)意(yi)過(guo)濾(lv)頭(tou)的(de)汙(wu)染(ran)也(ye)會(hui)造(zao)成(cheng)這(zhe)種(zhong)現(xian)象(xiang)。處(chu)理(li)方(fang)法(fa)比(bi)較(jiao)簡(jian)單(dan)，擰(ning)下(xia)過(guo)濾(lv)頭(tou)在(zai)稀(xi)硝(xiao)酸(suan)中(zhong)浸(jin)泡(pao)，超(chao)聲(sheng)半(ban)小(xiao)時(shi)，洗(xi)淨(jing)後(hou)裝(zhuang)回(hui)去(qu)即(ji)可(ke)。
2.透明流路管
zhideshizaiguolvtouheshusongbengzhijiandenayiduanguanlu。zheyigebufenwangwangbushiyoudianqipao，erjingchangshizhenggeguanzhongquanshikongqiercaozuorenyuanquehunranbuzhi，yizhishusongbenggongzuolebantiancaifaxianliudongxiangpinglideyetiyidianyemeishao。zheyeshiwomenchangshuodeyexiangsepuyizhishaoyizhouyaokaijiyicideyuanyin（我們做液相一定要有“微滲”的概念）。如果長時間不用，這一段管路的液體會徹底幹掉，而充滿空氣的管路和充滿液體的管路不仔細看是分辨不出的。
這zhe種zhong情qing況kuang對dui於yu輸shu送song泵beng很hen危wei險xian，因yin為wei，泵beng從cong設she計ji來lai說shuo是shi輸shu送song液ye體ti而er不bu是shi氣qi體ti，內nei部bu的de液ye體ti對dui於yu活huo塞sai來lai說shuo起qi到dao了le機ji油you的de作zuo用yong，如ru果guo活huo塞sai杆gan上shang還hai殘can存cun了le一yi些xie緩huan衝chong鹽yan，則ze極ji易yi拉la傷shang，造zao成cheng不bu可ke逆ni轉zhuan的de影ying響xiang。對dui於yu這zhe種zhong情qing況kuang，要yao突tu出chu“預防為主”，如，液相色譜使用人員要相對固定和穩定，工作中合理搭配資源，每台機一周至少作一次實驗，如長期不用起碼每周要衝流動相2小時。養成良好的工作習慣很重要。如果不慎出現了這種問題怎麼辦？我的建議是用外力使管路中充滿液體。具體如下：
(1)找到流路管進入輸送泵的接頭。
(2)擰下來。
(3)用一幹淨的洗耳球的尖端對準管路的平整切口。(4)吸液體，看液麵從流動相瓶裏上升，至離洗耳球5厘米左右時停止該動作。
(5)快速把接頭擰回輸送泵上（這個過程可能會有少許流動相外泄，這是正常現象）。
(6)開機，打開排液閥門，啟動輸送泵。
(7)等排液管中流出的溶液沒有氣泡時，再關閉排液閥，儀器正常工作。
3.輸送泵和柱子
這些部分進了氣泡一般不怕，衝掉就行。
4.檢測器
應ying該gai說shuo，整zheng個ge流liu路lu中zhong隻zhi要yao有you一yi個ge氣qi泡pao都dou會hui在zai檢jian測ce器qi上shang得de到dao強qiang烈lie的de信xin號hao反fan映ying，檢jian測ce器qi內nei部bu的de氣qi泡pao一yi般ban都dou能neng被bei衝chong走zou，但dan也ye有you很hen難nan衝chong掉diao的de殘can留liu氣qi泡pao的de情qing況kuang。
如(ru)果(guo)檢(jian)測(ce)器(qi)裏(li)有(you)殘(can)留(liu)氣(qi)泡(pao)，會(hui)有(you)特(te)征(zheng)明(ming)顯(xian)的(de)表(biao)現(xian)形(xing)式(shi)，就(jiu)是(shi)在(zai)走(zou)基(ji)線(xian)時(shi)會(hui)時(shi)不(bu)時(shi)間(jian)隔(ge)出(chu)現(xian)直(zhi)上(shang)直(zhi)下(xia)信(xin)號(hao)很(hen)大(da)的(de)信(xin)號(hao)峰(feng)。這(zhe)時(shi)先(xian)看(kan)普(pu)通(tong)流(liu)量(liang)能(neng)否(fou)衝(chong)走(zou)，如(ru)果(guo)衝(chong)不(bu)走(zou)，那(na)唯(wei)一(yi)的(de)辦(ban)法(fa)就(jiu)是(shi)拆(chai)柱(zhu)，把(ba)檢(jian)測(ce)器(qi)直(zhi)接(jie)連(lian)到(dao)輸(shu)送(song)泵(beng)的(de)出(chu)口(kou)，加(jia)大(da)幾(ji)倍(bei)流(liu)量(liang)衝(chong)洗(xi)，則(ze)肯(ken)定(ding)能(neng)衝(chong)走(zou)氣(qi)泡(pao)。
