分光光度的概述

吸光光度法定義:

基於物質對光的選擇性吸收而建立的分析方法稱為吸光光度法，包括紫外可見分光光度法及紅外光譜法等。

紫外可見分光光度法所用的光譜區域為200~780nm
，其中紫外分光光度法為200~400nm，可見分光光度法為400~780nm。

紅外光譜法為2.5~1000um。

分光光度法概述

分光光度法的發展曆程:

最初人們發現很多物質都具有顏色，例如Mn04-為紫紅色
，Fe3+為wei黃huang色se，當dang含han有you這zhe些xie物wu質zhi的de溶rong液ye濃nong度du改gai變bian時shi，溶rong液ye顏yan色se的de深shen淺qian度du也ye就jiu隨sui著zhe改gai變bian。溶rong液ye越yue濃nong顏yan色se越yue深shen
，溶rong液ye越yue稀xi顏yan色se越yue淺qian，因yin此ci利li用yong比bi較jiao溶rong液ye顏yan色se深shen淺qian的de方fang法fa來lai確que定ding溶rong液ye中zhong有you色se物wu質zhi的de含han量liang，這zhe種zhong方fang法fa稱cheng為wei“目視比色法”，隨後人們又認識到溶液的顏色是由於對光的選擇性吸收而產生的，可以利用濾光片和光電池客觀的測量溶液的濃度，從而出現了“光電比色法”。隨著近代測試儀器的發展
，用分光光度計代替比色計，出現了分光光度法。

分光光度法基本原理

溶液顏色與光吸收的關係日常所見的白光
，如日光、白熾燈光
，都是混合光，即它們是由波長400~780nm的電磁波按適當強度比例混合而成的，這段波長範圍的光是人們視覺可覺察到的，所以稱為可見光。當電磁波的波長小於400nm時稱為紫外光，大於780nm的稱為紅外光
，都是人們視覺覺察不到的光。互補色光:當將某兩種顏色的光按適當強度比例混合時，可以形成白光
，這兩種色光就稱為互補色光。

當一束白光(混合光)通過某溶液時，如果該溶液對可見光區各種波長的光都沒有吸收，即入射光全部通過溶液

，則溶液呈無色透明狀。

如某溶液對可見光區某種波長的光選擇性地吸收，則該溶液即呈現出被吸收波長光的互補色光的顏色。

例如當一束白光通過KMnO4溶液時


，該溶液選擇性的吸收了綠色波長的光
，而將其它的色光兩兩互補成白光而通過去
，隻剩下紫色光未被互補，所以KMnO4溶液呈現紫色。

光吸收曲線:jiangbutongbochangdeguangyicitongguomouyidingnongduheyidinghoududerongye，fenbiecechutaduigezhongbochangguangdexiguangdu，yibochangweihengzuobiao，yixiguangduweizongzuobiaohuizhichengdequxian(亦稱吸收光譜)最大吸收波長(Aμaξ) :在吸收曲線上吸收峰最大處所對應的波長。

標準曲線的繪製

peizhiyixiliebutongnongdudebiaozhunrongye，zaiyidingtiaojianxiaxianse

，shiyongtongyanghoududexishouchi
，cedingxiguangdu，shangranhouyinongduweihengzuobiao，xiguangduweizongzuobiaozuotu
，deyitiaozhixian，zaitongyangtiaojianxiacechushiyangrongyedexiguangdujiukeyiconggongzuoquxianshangzhachushiyangrongyedenongdu。danzaishijigongzuozhongjingchangfaxianbiaozhunquxianbuchengzhixiandeqingkuang
，tebieshidangxiguangwuzhidenongdugaoshi，mingxiandexiangshanghuoxiangxiapianlibiaozhunquxian
，zhezhongqingkuangchengweipianlilangbo-比耳定律現象。

引起偏離朗伯-比爾定律的原因

(1)入射光為非單色光。嚴格講朗伯-比耳定律隻適用於單色光。應選用Aμaξ處或肩峰處測定。

(2)溶液中的化學反應。離解、絡合、締合會破壞線性關係
，應控製條件(酸度
、濃度、介質等)。

(3)比耳定律的局限性引起偏離。嚴格說，比耳定律是一個有限定律
，它隻適用於濃度小於0.01mol/L的稀溶液。