高壓蒸汽滅菌器滅菌效果驗證一般有化學指示劑法、留點溫度計法、自製測溫管法和生物指示劑法,每(mei)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)原(yuan)理(li)都(dou)是(shi)相(xiang)似(si)的(de),主(zhu)要(yao)是(shi)通(tong)過(guo)驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)時(shi)滅(mie)菌(jun)器(qi)裏(li)的(de)溫(wen)度(du)能(neng)否(fou)達(da)到(dao)要(yao)求(qiu)。我(wo)們(men)可(ke)以(yi)根(gen)據(ju)自(zi)己(ji)實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)選(xuan)擇(ze)其(qi)中(zhong)一(yi)種(zhong)或(huo)多(duo)種(zhong)方(fang)法(fa)進(jin)行(xing)驗(yan)證(zheng)。
一、化學指示劑法
原理:化學指示劑在一定溫度與作用時間下,會受熱變色或變形,根據這一特點來判斷是否達到需要的滅菌參數。
一般實驗室常用的是3M壓(ya)力(li)滅(mie)菌(jun)指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai),這(zhe)種(zhong)指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)是(shi)利(li)用(yong)滅(mie)菌(jun)前(qian)後(hou)膠(jiao)帶(dai)顏(yan)色(se)變(bian)化(hua)來(lai)判(pan)斷(duan)滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)。它(ta)是(shi)由(you)熱(re)敏(min)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)與(yu)顯(xian)色(se)劑(ji)及(ji)漆(qi)輔(fu)料(liao)製(zhi)成(cheng)油(you)墨(mo),並(bing)將(jiang)油(you)墨(mo)以(yi)條(tiao)紋(wen)狀(zhuang)印(yin)製(zhi)在(zai)特(te)製(zhi)的(de)一(yi)麵(mian)膠(jiao)紙(zhi)帶(dai)製(zhi)成(cheng)。指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)粘(zhan)貼(tie)於(yu)包(bao)裹(guo)外(wai),長(chang)度(du)不(bu)低(di)於(yu)5cm,並輕壓膠帶以增加粘性和封包效果;在121℃持續20min或130℃持續4min後,膠帶上印有的斜行的白色指示線條會完全變黑,成為黑色線條;如變色不均勻或不徹底,可認為該包裹不符合滅菌條件。
二、留點溫度計法
原理:留點溫度計法是利用水銀溫度計不回流的特性,其原理跟傳統體溫計相似,可以指示滅菌器在滅菌過程中達到的最高溫度。
yanzhengshibashuiyinwendujifangzaishengshuidedasanjiaopingli,miejunshibasanjiaopingfangzaimiejunqideshangbuhexiabu,miejunjieshuhoukanshuiyinwendujidewenduheyaoqiuwendushifouyizhi。此法隻能驗證溫度,不能指示滅菌時間是否達到要求,因此是滅菌器驗證的最低標準。
三、自製測溫管法
原理:利li用yong一yi些xie化hua學xue藥yao品pin受shou熱re熔rong化hua後hou再zai冷leng卻que,晶jing體ti的de外wai形xing不bu同tong的de特te性xing,把ba化hua學xue藥yao品pin密mi封feng在zai小xiao玻bo璃li管guan內nei,滅mie菌jun時shi放fang在zai滅mie菌jun器qi裏li,滅mie菌jun完wan後hou觀guan察cha晶jing體ti的de形xing狀zhuang,就jiu可ke以yi判pan斷duan溫wen度du是shi否fou達da標biao。
常用的試劑是苯甲酸,苯甲酸的熔點為121-123℃,跟(gen)我(wo)們(men)要(yao)求(qiu)的(de)滅(mie)菌(jun)器(qi)的(de)滅(mie)菌(jun)溫(wen)度(du)基(ji)本(ben)吻(wen)合(he),因(yin)此(ci)滅(mie)菌(jun)時(shi)把(ba)固(gu)體(ti)苯(ben)甲(jia)酸(suan)密(mi)封(feng)在(zai)小(xiao)玻(bo)璃(li)管(guan)內(nei)放(fang)進(jin)滅(mie)菌(jun)器(qi),滅(mie)菌(jun)結(jie)束(shu)就(jiu)可(ke)以(yi)觀(guan)察(cha)苯(ben)甲(jia)酸(suan)的(de)狀(zhuang)態(tai)來(lai)驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)器(qi)是(shi)否(fou)達(da)到(dao)了(le)要(yao)求(qiu)溫(wen)度(du)。這(zhe)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)局(ju)限(xian)跟(gen)留(liu)點(dian)溫(wen)度(du)計(ji)法(fa)相(xiang)同(tong),也(ye)隻能指示滅菌時的溫度,對滅菌時間是否達到要求無法判斷。
四、生物指示劑法
原理:利li用yong非fei致zhi病bing性xing的de嗜shi熱re脂zhi肪fang杆gan菌jun的de芽ya孢bao作zuo為wei指zhi示shi菌jun,來lai測ce定ding熱re力li滅mie菌jun的de效xiao果guo。嗜shi熱re脂zhi肪fang杆gan菌jun的de芽ya孢bao對dui熱re的de抗kang性xing較jiao強qiang,其qi耐nai熱re能neng力li與yu病bing原yuan微wei生sheng物wu肉rou毒du梭suo菌jun芽ya孢bao相xiang似si,以yi此ci為wei指zhi示shi菌jun,驗yan證zheng滅mie菌jun器qi能neng否fou達da到dao滅mie菌jun要yao求qiu。
生物指示劑分為三種:芽孢懸液、芽胞菌片、菌片和培養基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個點:下層的前、中、後和上層、中層的中央點。滅菌後取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白腖水中,55-60℃培養2-7天,若培養基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死,滅菌器滅菌效果良好;如果培養基黃色渾濁,說明芽孢未被殺滅,滅菌器滅菌效果不合格。芽孢懸液和芽孢菌片的驗證方法均是如此。
目(mu)前(qian)實(shi)驗(yan)室(shi)還(hai)常(chang)用(yong)商(shang)品(pin)化(hua)的(de)生(sheng)物(wu)指(zhi)示(shi)管(guan),其(qi)原(yuan)理(li)與(yu)芽(ya)孢(bao)懸(xuan)液(ye)和(he)芽(ya)胞(bao)菌(jun)片(pian)相(xiang)同(tong),指(zhi)示(shi)管(guan)中(zhong)有(you)嗜(shi)熱(re)脂(zhi)肪(fang)芽(ya)孢(bao)杆(gan)菌(jun)芽(ya)孢(bao)和(he)培(pei)養(yang)液(ye)玻(bo)璃(li)小(xiao)管(guan),將(jiang)指(zhi)示(shi)管(guan)放(fang)在(zai)滅(mie)菌(jun)容(rong)器(qi)內(nei)的(de)各(ge)個(ge)點(dian)上(shang),高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)後(hou),將(jiang)管(guan)中(zhong)盛(sheng)培(pei)養(yang)液(ye)的(de)玻(bo)璃(li)管(guan)擠(ji)碎(sui),培(pei)養(yang)液(ye)從(cong)內(nei)部(bu)的(de)小(xiao)管(guan)中(zhong)被(bei)放(fang)出(chu),放(fang)入(ru)56℃培養箱中培養,同時做陽性對照。若是滅菌器滅菌效果不合格,指示管內的芽孢複活後生長會改變肉湯的顏色是肉湯變為黃色;若是滅菌器滅菌效果良好則管內芽孢被滅活不再生長,肉湯仍舊是原來的紫色。
對(dui)於(yu)滅(mie)菌(jun)器(qi)的(de)效(xiao)果(guo)驗(yan)證(zheng),目(mu)前(qian)並(bing)沒(mei)有(you)相(xiang)關(guan)標(biao)準(zhun)嚴(yan)格(ge)的(de)要(yao)求(qiu)驗(yan)證(zheng)的(de)頻(pin)次(ci),但(dan)是(shi)實(shi)驗(yan)室(shi)應(ying)當(dang)自(zi)行(xing)製(zhi)定(ding)驗(yan)證(zheng)頻(pin)次(ci)規(gui)定(ding),並(bing)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。從(cong)操(cao)作(zuo)性(xing)和(he)驗(yan)證(zheng)結(jie)論(lun)兩(liang)個(ge)方(fang)麵(mian)出(chu)發(fa),小(xiao)編(bian)推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)和(he)生(sheng)物(wu)指(zhi)示(shi)管(guan),因(yin)為(wei)這(zhe)兩(liang)種(zhong)方(fang)法(fa)操(cao)作(zuo)簡(jian)單(dan),可(ke)以(yi)對(dui)滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)進(jin)行(xing)全(quan)麵(mian)的(de)驗(yan)證(zheng)!
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