固相萃取柱回收率低？一文幫你解決固相萃取過程中的所有問題！
發布日期：2022-06-17
核心提示：近年來，固相萃取小柱應用得到快速發展，已廣泛應用於食品、環境、製藥等行業，成為樣品前處理淨化的有效手段之一。可是，用戶在使用固相萃取小柱過程中也會遇到各種各樣的問題。
根據多年的實驗應用經驗，現將使用過程中常見問題及解決辦法整理在一起，方便大家輕鬆應對固相萃取常見問題。
固相萃取小柱是一種用途廣泛而且越來越受歡迎的樣品前處理技術。大多數用來處理液體樣品。萃取、濃縮和淨化其中的半揮發性和不揮發性化合物；也可用於固體樣品，但必須先把固體樣品處理成液體。
固相萃取柱的種類很多，具體實驗工作中，需根據分析對象、檢測手段及實驗室條件合理選擇合適填料、合理規格的固相萃取柱。要考慮固相萃取柱對分析對象的萃取能力、樣品溶液的體積、洗脫後溶液的最終體積、及樣品溶液中被測物及幹擾物的總量。
一般被柱中吸附劑吸附的被測物及幹擾物的總質量不應超過吸附物總質量的5%。洗脫劑的體積一般應是萃取柱柱床體積的2-5倍。
固相萃取小柱使用過程可以簡要為4步：
shouxian，womenyaozhidaoyigeyangpinbaokuomubiaowuheganraowu，yangpintongguoxifuji，jiangmubiaowuyuganraowufenli，liuxiaxuyaodeganraowu，qidiaobuyaodeganraowu，zhejiuwanchengyicijiandandeguxiangcuiquguocheng。第一步：利用洗脫劑潤洗固相萃取柱，洗掉柱子中原有的雜誌組分；
第二步：將樣品加到萃取柱上，吸附劑選擇性的保留分離物和一些幹擾物，其他幹擾物通過吸附劑；
第三步：用適當的溶劑淋洗吸附劑，使先前保留的幹擾物選擇性的淋洗掉，分離物保留在吸附劑床上。
在一次完整的SPE操作中，目標化合物可能會存在於樣品溶液流出液、淋洗液、洗脫液或吸附劑中，當“目標物沒有回收或回收率低” 現象發生時，可向樣品溶液加入標液，然後進行完整的SPE操作並將樣品流出液、淋洗液和洗脫液分別收集並分析。首先確定目標化合物存在於哪一部分，進而確定問題來自下列哪一環節：目標化合物在吸附劑上保留不足；目標化合物未被完全洗脫；其他環節。
當超過5%的目標化合物出現在樣品流出液或淋洗液時即可斷定“目標化合物在吸附劑上的保留不足”。
2、目標化合物未被完全洗脫
當目標化合物在樣品溶液流出液和淋洗液中未出現而洗脫液中僅有少量或未出現時，可判斷“目標物未被完全洗脫”。
如果目標化合物在洗脫液中正常出現，那麼回收率不足的問題應該來自樣品前處理的其他環節。
在使用固相萃取小柱進行樣品前處理時，若出現萃取效果重現性差
三、淨化效果不理想
通(tong)常(chang)而(er)言(yan)采(cai)用(yong)保(bao)留(liu)目(mu)標(biao)化(hua)合(he)物(wu)的(de)模(mo)式(shi)比(bi)保(bao)留(liu)雜(za)質(zhi)的(de)模(mo)式(shi)淨(jing)化(hua)效(xiao)果(guo)好(hao)，如(ru)果(guo)正(zheng)在(zai)分(fen)析(xi)的(de)項(xiang)目(mu)為(wei)某(mou)一(yi)種(zhong)或(huo)某(mou)一(yi)類(lei)化(hua)合(he)物(wu)分(fen)析(xi)，最(zui)好(hao)是(shi)采(cai)用(yong)保(bao)留(liu)目(mu)標(biao)化(hua)合(he)物(wu)的(de)淨(jing)化(hua)模(mo)式(shi)；舉一個簡單的例子，同樣是分析蔬菜中的多菌靈和噻菌靈(一類堿性農藥)，shiyongyanglizijiaohuanzhukeyizhuanyixingdibaoliuzhexienongyao，shitamenjibenyuganraowuwanquanfenli，ershiyongzhengxiangxifujihuoshimohuatanheijinxingbaoliuganraowudecaozuojinnengbazhuyaodeganraowuchuqu，rengyoujiaoduoganraowucunliu。
另外，如果不止一種SPE柱可用於目標化合物的淨化時，應挑選選擇性好的吸附劑；選擇性方麵，離子交換＞正相＞反相。
對於反相模式和正相模式，應在不影響回收率的前提下，增大淋洗液洗脫的強度並降低洗脫液的洗脫強度。
對於反相模式，可將目標化合物的水溶液上樣，然後依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的de甲jia醇chun水shui溶rong液ye洗xi脫tuo，分fen別bie收shou集ji洗xi脫tuo液ye分fen析xi，建jian立li淋lin洗xi曲qu線xian，找zhao出chu目mu標biao化hua合he物wu被bei洗xi脫tuo時shi的de溶rong劑ji體ti係xi，淋lin洗xi液ye中zhong甲jia醇chun的de含han量liang應ying稍shao低di於yu目mu標biao化hua合he物wu恰qia好hao被bei洗xi脫tuo時shi的de溶rong劑ji體ti係xi，而er洗xi脫tuo液ye中zhong甲jia醇chun的de含han量liang應ying稍shao高gao於yu目mu標biao化hua合he物wu恰qia好hao被bei完wan全quan洗xi脫tuo時shi的de溶rong劑ji體ti係xi；當純甲醇不能洗脫目標化合物時，應試驗甲醇-甲基叔丁基醚混合溶液的洗脫曲線；對於某些既不溶於水也不溶於甲醇的離子型化合物，可以在溶劑體係中加入酸或堿。
對於正相體係，可將目標化合物的正己烷溶液上樣，然後依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%dezhengjiwanjiajishudingjimirongyexituo，fenbieshoujixituoyefenxi，jianlilinxiquxian，zhaochumubiaohuahewubeixituoshiderongjitixi，linxiyezhongjiajishudingjimidehanliangyingshaodiyumubiaohuahewuqiahaobeixituoshiderongjitixi，erxituoyezhongjiajishudingjimidehanliangyingshaogaoyumubiaohuahewuqiahaobeiwanquanxituoshiderongjitixi。
SPE柱中的吸附劑可能存在少量幹擾物，有效地活化可以避免這些幹擾物進入洗脫液，活化溶液應選擇整個操作中洗脫強度最強的溶劑體係；在反相模式中，從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%甲醇水溶液，所以活化溶液應選純甲醇，當目標化合物需要用甲醇-甲基叔丁基醚混合液洗脫時，活化溶液應選甲基叔丁基醚；在正相模式中，從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%正己烷-甲基叔丁基醚溶液，所以活化溶液應選純甲基叔丁基醚。
編輯：songjiajie2010
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