某網友:“由於所在實驗室即將添置一台新質譜,質譜已經選好了,但是在液相的選擇上很是猶豫,不知是否該買一台UPLC。因yin為wei經jing常chang是shi一yi次ci分fen析xi幾ji百bai個ge樣yang品pin,高gao速su液ye相xiang的de速su度du會hui快kuai一yi些xie。但dan是shi,生sheng物wu樣yang品pin的de前qian處chu理li要yao求qiu也ye相xiang應ying提ti高gao。而er且qie價jia格ge也ye比bi較jiao貴gui。是shi否fou需xu要yao買maiUPLC?還是買HPLC?想了解一下大家的使用經驗和看法。”相信這是很多實驗室小夥伴會麵臨的選擇,那麼到底該從哪些方麵來衡量儀器的選型?有人說,能用HPLC就用,多數情況下,HPLC都能hold住。UPLC肯定是大勢所趨。就像很多人所說的一樣,UPLC就像是鴉片,用過了就上癮擺脫不了。這個說法雖然極端,但是話糙理不糙,你覺得有理嗎?網友支招網友A:如你所說,使用UPLC肯ken定ding能neng提ti高gao你ni分fen析xi的de速su度du,但dan是shi不bu知zhi道dao目mu前qian你ni選xuan好hao的de質zhi譜pu是shi什shen麼me型xing號hao的de?這zhe裏li存cun在zai一yi個ge質zhi譜pu工gong作zuo站zhan能neng否fou兼jian容rong你ni的de液ye相xiang色se譜pu的de問wen題ti,所suo以yi還hai請qing考kao慮lv仔zai細xi。個ge人ren覺jiao得deUPLC類的快速液相是大勢所趨。網友B:個人感覺UPLC不錯,最直觀的感覺是分析時間大大縮短,這也是UPLC鼓吹的一點。但UPLC對流動相,色譜柱,樣品前處理,質譜接口,數據采集係統都提出了更嚴格的要求,同時帶來的液氮、乙腈等耗材的使用量下降,這個是很明顯的。至於所用的試劑、耗材等等比HPLC高級多少,我倒沒看出來。無非是要求過下0.22μm的膜。個人認為短期內還無法完全替代普通LC。普通液相采用細徑色譜柱是目前最成熟和經濟的LC-MS方案。網友C: UPLC在分析速度、分離度等方麵確實有優勢,但對樣品的前處理、試(shi)劑(ji)等(deng)提(ti)出(chu)了(le)更(geng)高(gao)的(de)要(yao)求(qiu),樣(yang)品(pin)分(fen)析(xi)成(cheng)本(ben)也(ye)高(gao)了(le)。我(wo)們(men)知(zhi)道(dao),影(ying)響(xiang)分(fen)析(xi)速(su)度(du)快(kuai)慢(man)的(de)主(zhu)要(yao)步(bu)驟(zhou)是(shi)樣(yang)本(ben)的(de)前(qian)處(chu)理(li),而(er)儀(yi)器(qi)分(fen)析(xi)速(su)度(du)的(de)快(kuai)慢(man)不(bu)是(shi)主(zhu)要(yao)因(yin)素(su),現(xian)在(zai)儀(yi)器(qi)都(dou)是(shi)自(zi)動(dong)進(jin)樣(yang)加(jia)24小時開機,測定一個樣品多花點時間能有多大影響,很多人那UPLC分析速度快來說事是不合適的。我的行業測定的是食品樣品,從我的經驗來看,我更喜歡用普通的HPLC。網友D:我是做中藥成分的,個人覺得還是UPLC更好一些。因為是與質譜聯用,日常分析中的樣品如果成分比較複雜的話,普通液相的色譜條件就不太好找,必然會經常遇到需要加酸、堿或緩衝鹽的情況,尤其是緩衝鹽的選擇受質譜的限製較大。而UPLC由於柱效高,分離效果要比普通液相高的多,在很多時候普通液相上加緩衝鹽也很難分離的成分,在UPLC上什麼都不用加就可以分開,而且效果很好。所以覺得UPLC在聯用時更方便一些。網友E:個人認為,如果追求分析速度的話可以選用UPLC,如果考慮的是分析成本的話,還是用HPLC。如果樣品量大,分離簡單,則可以配UPLC。UPLC配質譜的好處主要在於處理量大,不要把希望寄托在它分離效果好上。一種又快又好又穩定的儀器太難找了。網友F:高通量生物分析如果樣品量大或食品類樣品比較多,建議你不要配UPLC,否則會後悔的。UPLC一般適用於研究性質的實驗或樣品基質比較幹淨的實驗。網友G:各人覺得你要是做生物樣品或者醫藥方麵的UPLC還是有優勢的,但是你如果是做殘留分析,比如農殘,獸殘什麼的就買HPLC就好,UPLC的確是快,但是食品蔬菜什麼的基質比較複雜的你就甭想分離的很好,分離效果差很多的。網友H:個人意見,如果做生物樣品分析,而且每天分析樣品量比較大,不建議使用UPLC。UPLC的優點是分離度高,峰形尖銳。但是其填料粒徑太小,在高通量生物分析時很容易堵柱子(UPLC柱價格比較貴),使用壽命比HPLC柱少很多。另外其峰形尖銳,與掃描型質譜聯用會降低分析物的靈敏度。網友I:如果條件允許的話還是買UPLC吧,我們也是樣品量很大,如果用hplc可能的跑上一天也不一定打完全部樣品,但是用UPLC三個小時左右就能打35-40針,還能讓儀器休息一下,好好的衝洗係統,如果是用HPLC的話估計向我們這麼大的樣品量,儀器早晚的罷工。再有就是用UPLC同時降低了開發方法的時間,提高了工作效率,同時還能省下不少的溶劑,正如waters的廣告所說的,在乙腈比較昂貴的時候確實能省不少錢,我們500ml的乙腈能走大約上百針樣品(梯度洗脫)。主要是效率高,也提高了靈敏度,峰形好,當然儀器也貴些,好東西,貴點也值得,等你用熟了再用hplc,你就會感覺很不爽,原因我就不說了!就看樓主怎麼權衡了!這麼多網友支招,大家是否在麵對選擇UPLC還是HPLC時,不再猶豫了,其實,選擇哪種儀器,最主要還是要看需求和預算,總的來說,HPLC相比UPLC更加經濟,不管是儀器本身的價格,還是使用耗材的價格,而且能夠滿足多數實驗室的一般檢測需求。至於UPLC其使用體驗的確好過HPLC,關於使用要求來說,其實沒那麼多問題,隻要養成良好的使用維護習慣,也沒啥大不了。
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