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現xian代dai高gao效xiao液ye相xiang色se譜pu分fen析xi中zhong，色se譜pu柱zhu的de選xuan擇ze直zhi接jie影ying響xiang了le分fen離li效xiao果guo的de好hao壞huai，選xuan擇ze合he適shi的de色se譜pu柱zhu可ke以yi縮suo短duan方fang法fa開kai發fa所suo需xu的de時shi間jian，並bing且qie使shi方fang法fa更geng具ju穩定性。但是現在市場上色譜柱種類繁多，不同類型的色譜柱分離對象不同，因此，要做合適的選擇，必須對此有一定的認識和了解。
色譜柱參數
物理性質：
柱長，內徑，如250*4.6mm。一般柱長在2―250mm，柱越長，分離度越高，但柱壓更高，分離所需時間更長；但分離度與理論塔板數的平方根成正比，所以一昧增加柱長並不是最有效的分離手段，一般情況下，150mm、5um的填料可以提供足夠的塔板數。
粒徑，影響色譜分離度。粒徑越小，分離越快，柱效越高，但柱壓力越高，柱容易被汙染，導致柱壽命降低。常見分析柱通常使用5um填料，複雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒(li)徑(jing)，更(geng)大(da)內(nei)徑(jing)的(de)製(zhi)備(bei)色(se)譜(pu)柱(zhu)通(tong)常(chang)使(shi)用(yong)更(geng)大(da)的(de)粒(li)徑(jing)。如(ru)果(guo)固(gu)定(ding)相(xiang)選(xuan)擇(ze)是(shi)正(zheng)確(que)，但(dan)是(shi)分(fen)離(li)度(du)不(bu)夠(gou)，那(na)麼(me)選(xuan)用(yong)更(geng)小(xiao)的(de)粒(li)度(du)的(de)填(tian)料(liao)是(shi)很(hen)有(you)用(yong)的(de)。3.5um填料填充柱的柱效比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%；然而，3.5um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍，因此如何選擇填料粒徑需要根據現實情況而定。
孔徑，60A，120A，300A等。孔徑小，則含孔率高，比表麵積大，載碳量高；色(se)譜(pu)柱(zhu)填(tian)料(liao)孔(kong)徑(jing)大(da)小(xiao)需(xu)和(he)分(fen)子(zi)大(da)小(xiao)相(xiang)匹(pi)配(pei)，保(bao)證(zheng)分(fen)子(zi)自(zi)由(you)進(jin)出(chu)填(tian)料(liao)孔(kong)並(bing)與(yu)孔(kong)內(nei)表(biao)麵(mian)的(de)鍵(jian)合(he)相(xiang)進(jin)行(xing)分(fen)離(li)分(fen)配(pei)，通(tong)常(chang)要(yao)求(qiu)孔(kong)徑(jing)直(zhi)徑(jing)是(shi)分(fen)子(zi)直(zhi)徑(jing)的(de)3倍以上，一般小分子使用80―120A，大分子使用300A。
顆粒形狀，一般有球形和不規則形，當使用黏度較大的流動相時，球形顆粒可以降低柱壓，延長色譜柱壽命。
比表麵積，指的是每克填料的表麵積，如180m2/g―350m2/g，與粒度和含孔率有關；比表麵積大，會增加樣品與鍵合相之間的反應，增加保留和分離度；比表麵積小則可以縮短分析時間和平衡時間，並不是比表麵積大或者小就更好，需要選擇合適的比表麵積。
化學性質：
矽膠基質：最通用的基質，強度大，化學修飾容易，但使用的pH值範圍有限（一般為2―8，特殊修飾的可以達到1―12）。
聚合物基質：多為聚苯乙烯―二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化學穩定，應用pH範圍寬，具有更強的疏水性，對蛋白質等樣品分離效果較好；但強度較小，有機溶劑可能導致聚合物溶脹而受損，批次重複性較差，商品化色譜柱不多，一般價格較貴。
載碳量：基質表麵鍵合相的比例，載碳量高，則保留增加，適合分析非極性化合物。
鍵合相：鍵合試劑不同，對化合物的選擇性不同，一般長鏈的烷基鍵合相（C18 C8）比短鏈的（C4 C3）穩定；非極性的鍵合相比極性的鍵合相（-NH2）穩定。
封端：用(yong)短(duan)鏈(lian)將(jiang)裸(luo)露(lu)的(de)矽(gui)羥(qiang)基(ji)鍵(jian)合(he)後(hou)封(feng)閉(bi)起(qi)來(lai)，以(yi)減(jian)少(shao)殘(can)留(liu)的(de)矽(gui)醇(chun)基(ji)，減(jian)輕(qing)待(dai)測(ce)組(zu)分(fen)與(yu)酸(suan)性(xing)矽(gui)羥(qiang)基(ji)反(fan)應(ying)而(er)引(yin)起(qi)的(de)色(se)譜(pu)峰(feng)拖(tuo)尾(wei)現(xian)象(xiang)。尤(you)其(qi)對(dui)於(yu)極(ji)性(xing)樣(yang)品(pin)而(er)言(yan)，未(wei)封(feng)端(duan)處(chu)理(li)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)分(fen)離(li)效(xiao)果(guo)較(jiao)差(cha)。
正相&反相色譜
目前市場上主要以反相色譜為主，約占80%的比例。
固定相極性
流動相極性
出峰順序
反相吸附色譜
非極性
強極性（水、甲醇、乙腈等）
強極性物質先出峰
正相吸附色譜
極性
弱極性（己烷、庚烷等）
弱極性物質先出峰
柱長及內徑的選擇：
長度的選擇：柱越長，總柱效越高(n值越大)，柱越長，分析時間也越長。250―300mm是最普遍的柱長，實驗室一半以上的工作都是采用此規格柱子，一般用來分離l0到50個組份的中等至複雜混合物；500―600mm，要求較高分辨率的應用，―般用來分離大於50個組份或包含有難分離物質的複雜樣品程序升溫分析。
內徑：柱(zhu)效(xiao)率(lv)與(yu)柱(zhu)半(ban)徑(jing)平(ping)方(fang)成(cheng)反(fan)比(bi)，內(nei)徑(jing)越(yue)小(xiao)柱(zhu)效(xiao)越(yue)高(gao)，但(dan)內(nei)徑(jing)越(yue)大(da)，柱(zhu)容(rong)量(liang)也(ye)增(zeng)加(jia)，允(yun)許(xu)進(jin)樣(yang)量(liang)就(jiu)越(yue)多(duo)。當(dang)進(jin)樣(yang)量(liang)超(chao)過(guo)柱(zhu)容(rong)量(liang)時(shi)，則(ze)因(yin)柱(zhu)內(nei)每(mei)塊(kuai)理(li)論(lun)板(ban)內(nei)不(bu)能(neng)建(jian)立(li)真(zhen)正(zheng)的(de)平(ping)衡(heng)，將(jiang)會(hui)導(dao)致(zhi)色(se)譜(pu)蜂(feng)畸(ji)變(bian)，柱(zhu)分(fen)辨(bian)率(lv)降(jiang)低(di)，重(zhong)現(xian)性(xing)不(bu)好(hao)。因(yin)此(ci)對(dui)於(yu)複(fu)雜(za)樣(yang)品(pin)需(xu)要(yao)精(jing)確(que)分(fen)離(li)，必(bi)須(xu)使(shi)用(yong)小(xiao)內(nei)徑(jing)柱(zhu)子(zi)。另(ling)一(yi)方(fang)麵(mian)若(ruo)樣(yang)品(pin)中(zhong)存(cun)在(zai)具(ju)有(you)很(hen)不(bu)相(xiang)同(tong)濃(nong)度(du)組(zu)份(fen)化(hua)合(he)物(wu)，為(wei)了(le)增(zeng)加(jia)樣(yang)品(pin)容(rong)量(liang)就(jiu)必(bi)須(xu)使(shi)用(yong)內(nei)徑(jing)大(da)的(de)柱(zhu)子(zi)，目(mu)前(qian)實(shi)驗(yan)室(shi)使(shi)用(yong)最(zui)常(chang)見(jian)的(de)柱(zhu)子(zi)內(nei)徑(jing)一(yi)般(ban)是(shi)4.6mm。
一般選擇原則：分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱；對於高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱，以改善峰形，延長色譜柱使用壽命等。
現(xian)在(zai)商(shang)品(pin)化(hua)的(de)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)琳(lin)琅(lang)滿(man)目(mu)，根(gen)據(ju)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)參(can)數(shu)可(ke)以(yi)給(gei)我(wo)們(men)提(ti)供(gong)一(yi)個(ge)初(chu)步(bu)的(de)選(xuan)擇(ze)，但(dan)由(you)於(yu)各(ge)個(ge)儀(yi)器(qi)廠(chang)商(shang)的(de)填(tian)料(liao)技(ji)術(shu)和(he)鍵(jian)合(he)技(ji)術(shu)都(dou)有(you)差(cha)異(yi)，即(ji)使(shi)都(dou)是(shi)C18柱，同一品牌不同係列都有不同的功能，有能耐受低pH值的、有耐高溫的、有(you)適(shi)合(he)堿(jian)性(xing)樣(yang)品(pin)的(de)等(deng)等(deng)。所(suo)以(yi)在(zai)選(xuan)擇(ze)色(se)譜(pu)柱(zhu)前(qian)要(yao)好(hao)好(hao)研(yan)究(jiu)色(se)譜(pu)柱(zhu)參(can)數(shu)，仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)色(se)譜(pu)柱(zhu)說(shuo)明(ming)書(shu)，才(cai)能(neng)找(zhao)到(dao)合(he)適(shi)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)和(he)適(shi)宜(yi)的(de)分(fen)離(li)方(fang)法(fa)。
文章（文字）來源：嘉裕檢測網
