比色皿的製造工藝有兩種, 一種是粘合劑粘合而成, 另一種是高溫熔融而成。比色皿的材料通常來源於石英、熔凝矽石和光學玻璃。常用比色皿的形狀有方形、矩形和圓筒形, 容量一般為幾毫升。也有用於少量試樣的微型或超微型毛細管皿。另外還有高、低溫恒溫比色皿。比色皿按照使用的波長範圍分為可見光係列(稱玻璃比色皿),紫外可見光係列(稱石英比色皿),紅外光係列(稱紅外石英比色皿)。
紫外光度實驗中的比色皿通常使用玻璃比色皿和石英比色皿,玻璃比色皿是用光學玻璃製成的比色皿,隻能用於可見光區,適用於330~1000nm 波長範圍,石英比色皿是用熔融石英( 氧化矽) 製成的比色皿,既適用於紫外光區,也可用於可見光區,適用於200~400nm波長範圍。
liyongshiyinghebolibiseminzaiziwaiguangquhekejianguangquyouwuxishoudechayi,zaiziwaiguangqushi,youyubolibiseminqiangliexishouziwaiguang,duishiyanshujuhejieguoyouyingxiang,shiyingbiseminbuxishouziwaiguang,buhuiyingxiangshuju,yincizaiziwaiguangqubushiyongbolibiseminershiyongshiyingbisemin。erzaikejianguangqu,bolideyingxiangfeichangxiao,kehulve,heshiyingbiseminyiyangjunkeyishiyong,dankaolvdaojieyuejingjideyinsu,youyubolibisemindejiageyuanyuandiyushiyingbisemin,tongchangxuanzekejianguangqushiyongbolibisemin,ziwaiguangqushiyongshiyingbisemin。
通過視覺、聽覺的不同感官方法觀察和比較比色皿的外觀及澄清程度來進行辨別。
(1) 比色皿上通常會有字母標識,玻璃比色皿口沿處有“G”( Glass 玻璃) ,而石英比色皿口沿處有“Q”( Quartz 石英) 或者“QS /S”( Quartz Glass 石英玻璃) 。
(2) 如(ru)果(guo)沒(mei)有(you)字(zi)母(mu)標(biao)識(shi)或(huo)者(zhe)標(biao)識(shi)已(yi)磨(mo)損(sun),可(ke)以(yi)在(zai)口(kou)沿(yan)處(chu)由(you)上(shang)往(wang)下(xia)看(kan),如(ru)果(guo)棱(leng)麵(mian)發(fa)綠(lv)就(jiu)是(shi)玻(bo)璃(li)的(de),透(tou)明(ming)或(huo)發(fa)白(bai)就(jiu)是(shi)石(shi)英(ying)的(de)。更(geng)確(que)切(qie)地(di)說(shuo),普(pu)通(tong)玻(bo)璃(li)的(de)斷(duan)口(kou)是(shi)淺(qian)綠(lv)的(de),硼(peng)酸(suan)玻(bo)璃(li)的(de)斷(duan)口(kou)是(shi)泛(fan)白(bai)的(de),而(er)石(shi)英(ying)的(de)斷(duan)麵(mian)是(shi)透(tou)明(ming)的(de)。
(3) 可以聽聲辨別,石英敲擊的聲音比較清脆,玻璃器皿敲擊時發出的聲音發悶。
(4) 石英比玻璃的硬度大,如果把兩個比色皿對磨,石英比色皿磨損微小,而玻璃比色皿磨損比較大。
(5) 可用白熾燈照射,透光度高的是玻璃比色皿,而石英比色皿裏麵應當稍渾濁。
[注]: 以(yi)上(shang)都(dou)是(shi)快(kuai)速(su)簡(jian)單(dan)的(de)鑒(jian)別(bie)方(fang)法(fa),除(chu)非(fei)是(shi)光(guang)學(xue)專(zhuan)業(ye)人(ren)士(shi),否(fou)則(ze)極(ji)易(yi)由(you)於(yu)個(ge)人(ren)差(cha)異(yi)產(chan)生(sheng)誤(wu)差(cha),一(yi)般(ban)情(qing)況(kuang)隻(zhi)能(neng)作(zuo)為(wei)權(quan)宜(yi)之(zhi)法(fa)。並(bing)且(qie)現(xian)在(zai)的(de)製(zhi)備(bei)工(gong)藝(yi)精(jing)湛(zhan),無(wu)論(lun)是(shi)玻(bo)璃(li)比(bi)色(se)皿(min)還(hai)是(shi)石(shi)英(ying)比(bi)色(se)皿(min)外(wai)觀(guan)都(dou)是(shi)澄(cheng)清(qing)透(tou)明(ming),厚(hou)度(du)、質量差別不大,因此僅通過這些感官的直觀鑒別方法在是不可取的。
使用紫外可見分光光度計來鑒別玻璃、石英比色皿和配對比色皿。
現行國家檢定規程規定石英比色皿在250nm下吸光度應小於0.07abs,若吸光度大於0.07abs 則為玻璃比色皿。
比色皿內不放置任何樣品,以空氣為介質,波長設置250nm,調零。將比色皿放置在樣品道,吸光值小於0.07abs的是石英的,反之是玻璃的。
在使用比色皿時,兩個透光麵要完全平行,並垂直置於比色皿架中,以保證在測量時,入射光垂直於透光麵,避免光的反射損失,保證光程固定。
比色皿一般為長方體,其底及兩側為磨毛玻璃,另兩麵為光學玻璃製成的透光麵采用熔融一體、玻璃粉高溫燒結和膠粘合而成。所以使用時應注意以下幾點。
(1) 拿取比色皿時,隻能用手指接觸兩側的毛玻璃,避免接觸光學麵。同時注意輕拿輕放,防止破損。
(2) 比色皿中不應長期盛放含有腐蝕玻璃物質的溶液。
(3) 比色皿高溫後易爆裂,因此不應放在火焰或電爐上加熱或幹燥箱內烘烤。
(4) 當比色皿裏麵被汙染,應用無水乙醇清洗,並晾幹或及時擦拭幹淨。
(5) 比色皿的透光麵不應與硬物或髒物接觸。
(6)盛裝溶液時,高度應為比色皿的2 /3 處,光學麵如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然後再用鏡頭紙或絲綢擦拭。
(7)比bi色se皿min中zhong的de液ye體ti,應ying沿yan毛mao麵mian傾qing斜xie,慢man慢man倒dao掉diao,不bu要yao將jiang比bi色se皿min翻fan轉zhuan,直zhi接jie口kou向xiang下xia放fang在zai幹gan淨jing的de濾lv紙zhi上shang吸xi幹gan剩sheng餘yu液ye,然ran後hou用yong蒸zheng餾liu水shui衝chong洗xi比bi色se皿min內nei部bu倒dao掉diao(操作同上)避免液體外流,使第2次測量時不用擦拭比色皿,不致因擦拭帶來的誤差。
(8)比色前將各個比色皿中裝入蒸餾水,在比色波長下進行比較,誤差在±0.001吸光度以內的比色皿選出4-8個進行比色測定,可避免因比色皿差異造成測量誤差。
(9)比色皿在使用後,應立即用水衝洗幹淨。必要時可用1:1的鹽酸浸泡,然後用水衝洗幹淨。
1 使用前將比色皿在2%的硝酸溶液中浸泡24小時,然後用水,蒸餾水依次衝洗幹淨,擦幹。
2 比色前將各個比色皿中裝入蒸餾水,在比色波長下進行比較,誤差在±0.001吸光度以內的比色皿選出4-8個進行比色測定,可避免因比色皿差異造成測量誤差。
3 比bi色se皿min中zhong的de液ye體ti,應ying沿yan毛mao麵mian傾qing斜xie,慢man慢man倒dao掉diao,不bu要yao將jiang比bi色se皿min翻fan轉zhuan,直zhi接jie口kou向xiang下xia放fang在zai幹gan淨jing的de濾lv紙zhi上shang吸xi幹gan剩sheng餘yu液ye,然ran後hou用yong蒸zheng餾liu水shui衝chong洗xi比bi色se皿min內nei部bu倒dao掉diao(操作同上)避免液體外流,使第2次測量時不用擦拭比色皿,不致因擦拭帶來的誤差。
(1) 按照實驗中所使用的波長來選擇相應的比色皿( 玻璃或者石英) ,ziwaiguangquyongshiyingbisemin,erkejianguangqujikeyishiyongbolibisemin,youkeyishiyongshiyingbisemin。kaolvdaojiagewenti,kejianguangquxuanyongbolibisemin。jinliangzuodaozhuanrenzhuanyonghuozhezhuanzuzhuanyong,yongwanqinglihoujiujiaohui。zheyangbuyigaohunbutongdebisemin,yebuyingxiangbiseminjiandepeidui。
(2) 盡量做到每個實驗每台紫外分光光度計有專用的配套比色皿,不相互混用。如有交叉使用,可記錄在冊,下次恢複正常。
(3) 用完即清洗,清洗後在通風陰涼處幹燥,等徹底幹燥後放入相應裝具中。放置時,裝具保持清潔幹燥,比色皿應秉承“光麵朝上,毛麵在兩側”的原則,這樣便於抓取兩毛麵拿出使用,不易弄汙光麵。
1.拿取比色皿時,隻能用手指接觸兩側的毛玻璃,避免接觸光學麵,用力不可過大。
2.不得將光學麵與硬物或髒物接觸。盛裝溶液時,高度為比色皿的2/3處即可,光學麵如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然後再用鏡頭紙或絲綢順著同一方向擦拭。
3.凡含有腐蝕玻璃的物質的溶液,不得長期盛放在比色皿中。
4.比色皿在使用後,應立即用水衝洗幹淨。必要時可用1:1的鹽酸浸泡,然後用水衝洗幹淨。
5.不能將比色皿放在火焰或電爐上進行加熱或幹燥箱內烘烤。
6.在測量時如對比色皿有懷疑,可自行檢測。可將波長選擇在實際使用的波長上,將一套比色皿都注入蒸餾水,將其中一隻的透射比調至95%(數顯儀器調置100%)處,測量其它各隻的透射比,凡透射比之差不大於0.5%即可配套使用。
7、比色皿換向後誤差可達4%一7%左右。所以在精確測量時;定要看準比色皿箭頭標誌。如無標誌,可作配套檢定後按方向在毛玻璃上端作上箭頭一致的標記。以避免操作時搞反。
8、比色皿使用時請勿碰撞。
比色皿必須保持清潔和無傷痕,玻璃和石英比色皿通常可用冷酸或酒精、乙醚、丙酮、正己烷等有機溶劑清洗。
比色皿清洗液:濃鹽酸:甲醇:水=1:4:3
如果比色皿被有機物汙染,宜用鹽酸―乙醇(1:2)混合液浸洗,也可用相應的有機溶劑如醇醚混合物浸泡洗滌。如:油脂汙染可用石油醚浸洗,鉻天青顯色劑汙染可用硝酸(1:2)浸洗等。比色皿不可用堿液洗滌,也不能用硬布、毛刷刷洗。
gesuanxiyexiaoguobucuo,danjinpaoshijianbuyiguochang,fouzehuifushidiaobisemindezhanjiejishiqisanjia。lingwaiyinweitahuizaibiseminbishangxifuerchuxianyicenggehuawudebomo,zhezhongbomohennanquchu,gesuanqingxihoudebiseminzaiziwaiqujianjibenbutouguang,daozhibunengshiyong。
稀釋的酸浸泡,效果不錯,但酸濃度不能太高。
也可用冷的或溫熱的(40~50℃)陰離子表麵活性劑的碳酸鈉溶液(2%)浸泡,可加熱10分鍾左右。對於有色物質的汙染可用HCL(3mol/L)-乙醇(1+1)溶液洗滌。
有色物質汙染的比色皿用鹽酸:乙醇(1:2)浸泡一段時間,顏色就去掉了。
分光光度法中比色皿潔淨與否是影響測定準確度的因素之一。因此,必須重視選擇正確的洗淨方法。
可參考的經驗是:yaoshinicedingrongyeshisuan,ruguobuganjing,jiuyongruojianrongyexi,yaoshinicedingrongyeshijian,ruguobuganjing,jiuyongruosuanrongyexi,yaoshinicedingrongyeshiyoujiwuzhi,ruguobuganjing,jiuyongyoujirongji,birujiujingdengrongyexi。
應按照測定的各種試劑,采用溶解中和的方法進行清洗,原則上是: 一不能損壞比色皿的結構和透光性能; 二能夠采用中和溶解的方法來達到比色皿幹淨如初的效果。而分光光度計中比色皿潔淨與否,則是影響測定準確度的因素之一。
比色皿按下麵步驟進行清洗:
1.比色皿用完後應當先用適當溶劑衝洗,注意裏外都要洗到.如果溶劑無毒的話,可以裝入一半溶劑後,用手指按住比色皿的兩端,用力搖晃,次數應當是不少於三次。
2.然後用大量的自來水衝洗,這一步對水溶液和鹽溶液非常重要。當然如果所用溶劑不親水這步可以放棄。
3.最後再用去離子水清洗,注意裏外都要洗到。如果溶劑不親水的這一步也可放棄。
4.洗完後不要刻意的將比色皿擦幹,虛放在比色皿盒內,不用蓋上讓其自然揮幹。
注:
清洗最好在用後立即進行,否則樣品幹後就更難處理;
洗好的比色皿應當是透明,沒有水跡的;
經常使用的比色皿可以在洗淨後浸泡在純水或分析純乙醇裏中保存。
當測定溶液是無機鹽溶液,石英比色皿的一般清潔方法如下。
(1) 用乙醚和無水乙醇的混合液(各50%)清洗。
(2) 若太髒可用專用洗液清洗。但時間要短(10分鍾之內) ,再用清水清洗幹淨。注意選擇比色皿洗滌液的原則是去汙效果好,不損壞比色皿,同時又不影響測定。
(3) 不能用洗潔精之類的清潔劑。以免影響測量。
(4) 比色皿不可用堿液洗滌,也不能用硬布、毛刷刷洗。
而當遇到測定各種酸、堿、有(you)機(ji)溶(rong)液(ye)時(shi),如(ru)若(ruo)測(ce)定(ding)溶(rong)液(ye)是(shi)酸(suan),如(ru)果(guo)不(bu)幹(gan)淨(jing),可(ke)用(yong)弱(ruo)堿(jian)溶(rong)液(ye)洗(xi),若(ruo)是(shi)測(ce)定(ding)溶(rong)液(ye)是(shi)堿(jian),如(ru)果(guo)不(bu)幹(gan)淨(jing),可(ke)用(yong)弱(ruo)酸(suan)溶(rong)液(ye)洗(xi),要(yao)是(shi)測(ce)定(ding)溶(rong)液(ye)是(shi)有(you)機(ji)物(wu)質(zhi),如(ru)果(guo)不(bu)幹(gan)淨(jing),可(ke)用(yong)有(you)機(ji)溶(rong)劑(ji),比(bi)如(ru)無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)等(deng)溶(rong)液(ye)洗(xi)。
值得注意的是,分析實驗常用的鉻酸洗液( 洗液) 不bu宜yi用yong於yu比bi色se皿min洗xi滌di,這zhe是shi因yin為wei帶dai水shui的de比bi色se皿min在zai該gai洗xi液ye中zhong可ke能neng會hui產chan生sheng熱re量liang,致zhi使shi比bi色se皿min膠jiao接jie麵mian裂lie開kai而er損sun壞huai。同tong時shi經jing洗xi液ye洗xi滌di後hou的de比bi色se皿min還hai可ke能neng殘can存cun微wei量liang鉻ge(鉻在紫外區有吸收) ,因此會影響實驗的測定。一般主張使用硝酸和過氧化氫( 5 :1) 的混合溶液泡洗,然後用清水衝洗幹淨。
最後,對一般方法難以洗淨的比色皿,還可以采取以下兩種方法。
(1) 先將比色皿浸入含有少量陰離子表麵活性劑的碳酸鈉( 20 克/升) 溶液泡洗,經水衝洗後,於過氧化氫和硝酸( 5 :1) 混合溶液中再浸泡半小時。
(2) 在通風櫥中用鹽酸、水和甲醇( 1 :3 :4) 混合溶液泡洗,一般不超過10分鍾。
比色皿配對比較麻煩,一般在分光光度法測定時采用比色皿誤差測定後進行樣品的測定。
1、比色皿配對
樣品溶液先配成吸收度在0.6~0.8之間的濃度測定,然後用同批溶劑將溶液稀釋一倍,再測吸收度。
從供試品溶液的配製起,平行操作兩次,並注明測定時的溫度。
同一台儀器測定所得二份結果間的偏差應不超過l%。當結果符合要求後,對各台儀器測得的平均值進行統計,若相對標準偏差不超過1.5%,則以測得的平均值為相應藥物的吸收係數。
現行的國家檢定規程中規定配對的兩隻比色皿間差值不得超過±0.5%。因為在可見光區,玻璃比色皿和石英比色皿都可以使用,所以可利用每對比色皿間的透光率直接進行比較。
使用4對比色皿,在波長500nm 下,以空氣和純水為介質,使用透光率T 進行測量,將每組比色皿中的一隻透射率調為100%,測量另外一隻透光率,凡透射率之差不大於5% ( △T = 0.005 =0.5%) ,即可配對使用。
2、比色皿誤差測定與樣品測定
2.1 任意取用2隻清潔比色皿。
2.2 2隻比色皿中加入相同的空白溶液。
2.3 以其中的任何一隻比色皿為空白皿,調節儀器的吸收度為0。
2.4 測定另一隻比色皿的吸收度,測得值為A0。用此比色皿測定樣品,儀器的顯示值為A,則樣品的真實測得值A樣=A-A0
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