四環素類(TCs)ELISA檢測試劑盒:
四環素檢測試劑盒是應用ELISA技術研發而成的檢測產品,能最大限度地減少操作誤差和工作強度。四環素檢測試劑盒可定性、定量檢測,本試劑盒適用於蜂蜜、牛奶、組織(含水產)中四環素、土黴素、金黴素、強力黴素等四環素類藥物的殘留檢測。
一、概要
四環素類藥物(Tetracyclines,TCs)是以四並苯為母核的一族抗生素,其中四環素、土黴素、金黴素及多西環素以其優良的抗菌性、穩(wen)定(ding)的(de)藥(yao)性(xing)及(ji)低(di)廉(lian)的(de)價(jia)格(ge),在(zai)畜(chu)牧(mu)業(ye)生(sheng)產(chan)中(zhong)廣(guang)泛(fan)用(yong)於(yu)疾(ji)病(bing)的(de)治(zhi)療(liao)和(he)預(yu)防(fang)及(ji)促(cu)進(jin)生(sheng)長(chang)。但(dan)該(gai)類(lei)藥(yao)物(wu)過(guo)量(liang)使(shi)用(yong)會(hui)導(dao)致(zhi)畜(chu)產(chan)品(pin)中(zhong)高(gao)濃(nong)度(du)藥(yao)物(wu)殘(can)留(liu),直(zhi)接(jie)影(ying)響(xiang)消(xiao)費(fei)者(zhe)身(shen)體(ti)健(jian)康(kang)。
高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)法(fa)目(mu)前(qian)是(shi)分(fen)析(xi)四(si)環(huan)素(su)類(lei)藥(yao)物(wu)殘(can)留(liu)量(liang)的(de)主(zhu)要(yao)方(fang)法(fa),但(dan)需(xu)要(yao)一(yi)係(xi)列(lie)繁(fan)瑣(suo)的(de)提(ti)取(qu)和(he)淨(jing)化(hua)處(chu)理(li)步(bu)驟(zhou),而(er)且(qie)存(cun)在(zai)回(hui)收(shou)率(lv)低(di),雜(za)質(zhi)幹(gan)擾(rao)大(da)等(deng)問(wen)題(ti)。
二、試驗原理
四環素檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方fang法fa,在zai酶mei標biao板ban微wei孔kong條tiao上shang預yu包bao被bei四si環huan素su類lei藥yao物wu抗kang原yuan,樣yang本ben殘can留liu的de四si環huan素su類lei藥yao物wu和he微wei孔kong條tiao上shang預yu包bao被bei的de抗kang原yuan競jing爭zheng抗kang四si環huan素su類lei藥yao物wu抗kang體ti,加jia入ru酶mei標biao二er抗kang,經jingTMB底di物wu顯xian色se,樣yang本ben吸xi光guang度du值zhi與yu其qi殘can留liu物wu四si環huan素su類lei藥yao物wu呈cheng負fu相xiang關guan,與yu標biao準zhun曲qu線xian比bi較jiao再zai乘cheng以yi其qi對dui應ying的de稀xi釋shi倍bei數shu,即ji可ke得de出chu樣yang品pin中zhong四si環huan素su類lei藥yao物wu的de含han量liang。
三、交叉反應率
四環素…………………………………………………100%
強力黴素…………………………………………………100%
金黴素……………………………………………………60%
土黴素………………………………………………………80%
四、檢測方法靈敏度、準確度、精密度
試劑盒靈敏度:0.05ppb
樣本最低檢測限:
蜂蜜………………………………………………………3ppb
牛奶………………………………………………………5ppb
組織(含水產)……………………………………………3ppb
回收率:
蜂蜜、牛奶……………………………………………… 90±15%
組織(含水產)…………………………………………75±15%
精密度:試劑盒的變異係數均小於10%
五、注意事項
1、室溫低於20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現板孔幹燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重複性不好的現象。所以洗板拍幹後應立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件
保存試劑盒於2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質的跡象發色試劑有任何顏色表明發色劑變質,應當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小於0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。
8、在加入底物液A液和底物液B液後,一般顯色時間為15~20min即可。若顏色較淺,可延長反應時間到30min(或更長)。反之,則減短反應時間。
9、濃縮洗滌液如有結晶屬正常現象,請加熱溶解後使用。
10、該試劑盒最佳反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
六、貯藏條件及保存期
貯藏條件:保存試劑盒於2~8℃。
保存期:該產品有效期為12個月。
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