一、引言

被(bei)汙(wu)染(ran)的(de)食(shi)品(pin)，包(bao)括(kuo)奶(nai)製(zhi)品(pin)和(he)非(fei)奶(nai)製(zhi)品(pin)
，是(shi)李(li)斯(si)特(te)氏(shi)菌(jun)散(san)發(fa)或(huo)爆(bao)發(fa)的(de)主(zhu)要(yao)起(qi)源(yuan)。李(li)斯(si)特(te)氏(shi)為(wei)食(shi)源(yuan)性(xing)致(zhi)病(bing)菌(jun)，在(zai)自(zi)然(ran)界(jie)中(zhong)廣(guang)泛(fan)存(cun)在(zai)，並(bing)且(qie)為(wei)多(duo)種(zhong)動(dong)物(wu)的(de)腸(chang)道(dao)攜(xie)帶(dai)菌(jun)。因(yin)此(ci)對(dui)李(li)斯(si)特(te)氏(shi)菌(jun)進(jin)行(xing)快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)是(shi)非(fei)常(chang)重(zhong)要(yao)的(de)。

二

、用途

李斯特氏菌乳膠凝集檢測試劑用於初步鑒定選擇性平板上分離出的可疑菌落，可結合生化分析對李斯特氏菌進行全麵鑒定。

三、原理

乳ru膠jiao顆ke粒li表biao麵mian包bao被bei與yu單dan增zeng李li斯si特te氏shi菌jun和he格ge氏shi李li斯si特te氏shi菌jun純chun化hua鞭bian毛mao蛋dan白bai具ju有you特te異yi性xing的de多duo價jia抗kang血xue清qing。與yu李li斯si特te氏shi菌jun菌jun懸xuan液ye混hun合he後hou，乳ru膠jiao顆ke粒li可ke迅xun速su凝ning集ji。達da到dao檢jian測ce靈ling敏min度du時shi，Microgen™李斯特氏菌乳膠凝集試劑盒可檢測李斯特氏菌屬的所有有動力菌株。

四
、試劑盒組成成分

REAG TEST HM48a 李斯特氏菌乳膠測試試劑　2.5mL

乳膠顆粒包被與李斯特氏菌鞭毛抗原具有特異性的兔抗血清。含0.02%的硫柳汞防腐劑。

Positive Control HM48b　陽性對照　　0.5mL

含0.02%的硫柳汞防腐劑。

NaCl 0.85% 0.85%鹽水　HM40　0.85%生理鹽水　5.0mL

含0.1%的疊氮化鈉防腐劑。

使用說明書

檢測板

攪拌棒

需要的其它材料

l       接種環

五
、貯存及保質期

檢測試劑盒不使用時應貯存在2～8℃

，不要冷凍試劑盒。在包裝盒標簽上的有效期內使用檢測試劑。

六、警告和注意事項

安全：

1
、試劑盒內的生理鹽水含有0.099%的疊氮化鈉作為防腐劑，疊氮化鈉可與鉛或銅製品反應形成易爆的金屬疊氮化物。可用大量水衝洗以避免疊氮化物的堆積。

2、陽性對照液在生產中已作惰性處理。但在使用中，依然應遵循潛在傳染性產品的處理程序。

3、在處理或檢測可疑致病菌時應采取適當的預防措施。

檢測過程：

1、試劑盒應按說明書使用。

2
、不要稀釋試劑盒內的任何試劑。

3、不要混合不同批次試劑盒的試劑。

4、不要使用過期產品。

5、不要冷凍試劑盒內的試劑。

6、注意檢測過程中的質量控製部分。

7、注意凝集狀態，呈凝乳狀或纖維狀可能為非真實凝集。

七、使用方法

所有試劑在使用前應達到室溫。

從選擇性平板中挑取可疑菌落可以用HKM^®李斯特菌乳膠凝集測試試劑，也可以直接使用HKM^®李斯特菌生化鑒定試劑條。（產品號MID－67）

1、使用含有七葉苷的選擇性平板有利於區分七葉苷陽性的李斯特菌與七葉苷陰性的非李斯特菌。

2、菌落在測試前，應做氧化酶試驗，氧化酶陽性菌株可引起錯誤的反應。李斯特菌屬為氧化酶陰性菌。

3、隻可測試光滑菌株
，粗糙菌株在生理鹽水中會自動凝集。

4、在30℃或以下溫度培養時，鞭毛最多。

質量控製：

在每次使用檢測試劑盒前應作下列質量控製檢測，以確證試劑的有效性。

1
、檢測試劑的控製：滴1滴生理鹽水(HM40)於一個測試反應環內，並在同一反應環內滴1滴測試試劑(F48a)混勻液體，輕搖檢測板1分鍾並觀察是否會出現凝集。應無凝集發生。如果出現凝集反應，表明檢測試劑或生理鹽水受到汙染，應廢棄處理。

2、陽性控製：滴1滴陽性對照試劑(HM48a) 於一個測試反應環內，並在同一反應環內滴1滴測試試劑(HM48a)，不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到陽性控製試劑。用攪拌棒在整個區域內混勻液體，輕搖檢測板2分鍾並觀察結果。出現易於判斷的凝集反應

，表明試劑正常有效。

測試程序：

從選擇性平板中挑取可疑菌落進行測試

1、取1張檢測板放在工作台上。

2、滴1滴生理鹽水(HM40)於檢測板的一個反應環內。

3、用接種環或攪拌棒從選擇性分離平板上挑取可疑菌落，與反應環內的生理鹽水混合
，形成均勻混濁的菌懸液。

4、觀察是否會出現自動凝集現象。如果菌懸液保持均勻狀態
，繼續第5步。

5、搖勻乳膠測試試劑後
，滴加1滴於菌懸液中，不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到菌懸液。用1支幹淨的攪拌棒混勻菌懸液和測試試劑，輕搖檢測板。混勻後，廢棄的攪拌棒應作適當的消毒處理。

6、在2分鍾內觀察凝集結果。

7
、記錄結果後，將檢測板進行適當的消毒處理。

八、結果說明

在2分鍾內出現凝集
，表明樣品中有李斯特氏菌，如不出現凝集
，表明測試菌落中無李斯特氏菌或存在數量低於可測量的水平。

九
、使用的局限性

1、李斯特氏菌的粗糙菌株可在生理鹽形成非特異性自動凝集
，因此不可用於乳膠試劑盒檢測。

2、在30℃以上培養的菌株可能不產生鞭毛
，因此可導致假陰性結果。

3、不能檢測無動力的李斯特氏菌。

4
、部分葡萄球菌和革蘭氏陽性杆菌可引起假陽性結果。

5、乳膠凝集檢測為初步鑒定結果，所有的陽性結果的純培養物應作進一步的生化分析。（如使用產品編號為MID－67的MID李斯特氏菌鑒定試劑條）

十、檢測效果測試

用HKM^®李斯特氏菌乳膠凝集檢測已知的105株李斯特氏菌的菌落，檢測結果確證為這些菌株。

 
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