愈傷組織的繼代培養  進行繼代培養所用的培養基，和培養愈傷組織所用的培養基相同。在嚴格的無菌條件下(接種箱內)將愈傷組織連同原來的外植體，一起移到新的培養基上。愈傷組織的繼代培養，一代為20天。如果延長培養時間，培養基中的營養物質會減少
，外植體也會分泌一些有毒物質，造成自身中毒。20天以後
，可以根據愈傷組織的大小
，決定是繼續進行繼代培養
，還是進行試管苗培養。如果愈傷組織長到直徑為1-15cm時
，就可以進行試管苗培養
，否則還需要進行第二次繼代培養。

 

      在愈傷組織進行繼代培養期間，可以將恒溫箱的門打開，讓愈傷組織見光。愈傷組織見光後
，顏色可以轉為綠色。

 

     試管苗的培養  當(dang)愈(yu)傷(shang)組(zu)織(zhi)長(chang)到(dao)一(yi)定(ding)大(da)小(xiao)後(hou)，可(ke)以(yi)更(geng)換(huan)培(pei)養(yang)基(ji)，進(jin)行(xing)試(shi)管(guan)苗(miao)的(de)培(pei)養(yang)。試(shi)管(guan)苗(miao)的(de)培(pei)養(yang)分(fen)為(wei)生(sheng)芽(ya)培(pei)養(yang)和(he)生(sheng)根(gen)培(pei)養(yang)。要(yao)想(xiang)培(pei)育(yu)出(chu)一(yi)株(zhu)完(wan)整(zheng)的(de)試(shi)管(guan)幼(you)苗(miao)，必(bi)須(xu)先(xian)進(jin)行(xing)生(sheng)芽(ya)培(pei)養(yang)，然(ran)後(hou)進(jin)行(xing)生(sheng)根(gen)培(pei)養(yang)。如(ru)果(guo)順(shun)序(xu)顛(dian)倒(dao)
，先(xian)誘(you)導(dao)生(sheng)根(gen)
，就(jiu)不(bu)好(hao)誘(you)導(dao)生(sheng)芽(ya)了(le)。生(sheng)芽(ya)大(da)約(yue)需(xu)要(yao)4～6周的時間
，而生根培養時，1周以後就可以見到幼根了。注意，試管苗應該進行見光培養。

 

     下麵列出繼代培養和試管苗培養的培養基配方。①繼代培養和生芽培養的培養基配方是：MS培養基+6BA(質量濃度為0.5-1.0 mg/L)+NAA(質量濃度為0.1-0.15 mg/L)。即在1 L MS培養基中加入5-10 mL6BA和1-1.5 mL的NAA母液。NAA配合6BA，可以促進不定芽的生長。②生根培養的培養基配方是：MS培養基+NAA(質量濃度為0.1-0.5 mg/L)。即在1 L MS培養基中加入1-5 mL的NAA母液。NAA起促進生根的作用。