以引起羅非魚鏈球菌病的無乳鏈球菌為對象,利用4種常用消毒劑和5種抗生素藥品作對比試驗,探究防治鏈球菌病的最適外潑消毒劑和內服藥。
羅非魚作為世界水產行業最主要的養殖品種之一,具有生長速度快、食性雜、肉質好、營養價值高、繁殖能力強等優點廣泛分布於熱帶亞熱帶的淡鹹水域中。我國沿海地區特別是海南、廣東、福建、廣西等省份養殖的羅非魚產量占世界一半以上。
近年來,伴隨著羅非魚養殖麵積和養殖密度越來越高,由無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)感染引起的羅非魚鏈球菌病已經成為阻礙我國羅非魚養殖業健康持續發展的主要因素。特別是自2009年以來羅非魚“鏈球菌病”呈現全國暴發的趨勢,在每年的高溫季節尤其是7-9月份,發病率在50%以上,死亡率最高可達80%以上。
目前羅非魚“鏈球菌病”缺que乏fa安an全quan高gao效xiao的de防fang控kong措cuo施shi,雖sui然ran使shi用yong一yi定ding量liang的de抗kang生sheng素su能neng在zai某mou些xie程cheng度du上shang抑yi製zhi該gai病bing的de暴bao發fa,但dan是shi隨sui著zhe無wu乳ru鏈lian球qiu菌jun耐nai藥yao性xing的de增zeng加jia,該gai病bing存cun在zai比bi較jiao嚴yan重zhong的de停ting藥yao反fan彈dan的de現xian象xiang。每mei年nian由you於yu羅luo非fei魚yu出chu口kou藥yao物wu殘can留liu超chao標biao造zao成cheng羅luo非fei魚yu出chu口kou受shou阻zu、國內滯銷、魚價低迷給我國整個羅非魚產業帶來了巨大的經濟損失。尋找安全高效的的羅非魚“鏈球菌病”防控方法是目前眾多水產養殖者急需解決的問題。
一、樣品的采集與診斷
2015年10月,在福建省雲霄縣常山下阪某養殖場暴發羅非魚“鏈球菌病”,規格在20cm左右,表現為典型的“鏈球菌病”症狀。患病魚體表發黑在池邊漫遊打轉,攝食減少,眼球突出渾濁,體表、鰓蓋和下頜等處充血出血,尾鰭鑲白邊,肝髒、膽囊、pizangchongxuezhongzhangyanzhongshimilan,changdaohefuqiangzhongchongmandanhuangsejishui,lansaibingqiekuilanbuweifuzhewuni,saigaineiceyuxue,xianweiguanchafaxiansaisibiaomianyoushaoxuchelunchonghezhihuanchong,saisicunzaihuaisizao,saixiaopianmaoxixueguankuozhangchuxianchongxuexianxiang,zaisaisidongmaizhongfaxianqipao。
二、病原分離純化與鑒定
使用70%的酒精棉球對患病魚體表進行擦拭消毒後進行解剖,用火焰灼燒過的接種環挑取少許肝髒組織於BHI固體培養基上進行劃線,37℃培養18h。根據培養結果挑取優勢菌落重新進行劃線,同樣條件培養後在BHI培養基中進行劃線純化。將純化後的病原菌在BHI液體培養基中37℃,200r/min培養18h後將菌液送往生物公司進行測序後經過比對得知為無乳鏈球菌。
三、藥敏實驗
使用4種常用消毒劑和5種抗生素藥品作為對比實驗,選取福爾馬林(有效成分:37%-40%甲醛)、衛捷(有效成分:戊二醛、苯紮溴銨)、綠安(有效成分:月苄三甲氯銨)、金碘(有效成分:聚維酮碘)4種常見消毒藥和磺胺嘧啶鈉(有效成分:磺胺嘧啶鈉)、呋喃西林(有效成分:呋喃西林)、強力泰(有效成分:恩諾沙星)、呼樂芬(有效成分:氟苯尼考)、魚血安(有效成分:鹽酸環丙沙星、鹽酸小檗堿)5種抗生素,使用牛津杯法進行藥敏實驗。
吸取100μL培養後的病原菌液均勻塗布於使用BHI固體培養上,然後吸取雙蒸水稀釋後的不同消毒藥(1%)100μL打入牛津杯中,共做3個平行。
將5種抗生素各稱取0.2g溶於50ml雙蒸水中,配製成4g/L濃度的溶液。吸取100μL培養後的病原菌液均勻塗布於BHI固體培養基上,吸取100μL相應的抗生素溶液於牛津杯中,連續做3個平行,37℃培養18h後觀察抑菌效果。
本實驗分離出的羅非魚鏈球菌病原菌在4種消毒劑(編號1-4)的對比中,對福爾馬林最為敏感,抑菌圈直徑在37mm左右,其次是衛捷和綠安,抑菌圈直徑在24mm左右,通過3組實驗表明金碘對病原菌並不敏感,抑菌效果不明顯。
在5種抗生素(編號5-9)的對比實驗中發現,病原菌對魚血安最為敏感,抑菌圈直徑為34mm左右,強力泰、呼樂芬次之,抑菌圈直徑30mm左右, 最後是呋喃西林,抑菌圈直徑27mm左右,某些養殖戶常用的磺胺嘧啶鈉對無乳鏈球菌沒有抑菌效果。

四、防治意見
羅非魚“鏈球菌病”給(gei)養(yang)殖(zhi)產(chan)業(ye)帶(dai)來(lai)了(le)巨(ju)大(da)危(wei)害(hai),一(yi)直(zhi)都(dou)是(shi)困(kun)擾(rao)養(yang)殖(zhi)戶(hu)的(de)重(zhong)大(da)難(nan)題(ti),目(mu)前(qian)仍(reng)未(wei)找(zhao)到(dao)有(you)效(xiao)的(de)方(fang)法(fa)來(lai)控(kong)製(zhi)和(he)治(zhi)療(liao)該(gai)疾(ji)病(bing)。本(ben)文(wen)通(tong)過(guo)藥(yao)敏(min)實(shi)驗(yan)篩(shai)選(xuan)了(le)一(yi)種(zhong)水(shui)體(ti)消(xiao)毒(du)劑(ji)和(he)一(yi)種(zhong)合(he)適(shi)的(de)內(nei)服(fu)藥(yao)來(lai)對(dui)羅(luo)非(fei)魚(yu)鏈(lian)球(qiu)菌(jun)病(bing)進(jin)行(xing)防(fang)治(zhi),以(yi)減(jian)少(shao)養(yang)殖(zhi)戶(hu)的(de)經(jing)濟(ji)損(sun)失(shi)。通(tong)過(guo)對(dui)4種常見消毒劑福爾馬林、衛捷、綠安、金jin碘dian的de藥yao敏min結jie果guo發fa現xian福fu爾er馬ma林lin的de抑yi菌jun效xiao果guo最zui強qiang,衛wei捷jie和he綠lv安an的de效xiao果guo基ji本ben一yi致zhi,金jin碘dian抑yi菌jun效xiao果guo不bu明ming顯xian。福fu爾er馬ma林lin雖sui然ran抑yi菌jun效xiao果guo最zui強qiang但dan是shi對dui人ren體ti及ji羅luo非fei魚yu具ju有you一yi定ding毒du副fu作zuo用yong,安an全quan性xing方fang麵mian相xiang對dui於yu衛wei捷jie或huo綠lv安an略lve有you差cha距ju。因yin此ci綜zong合he考kao慮lv對dui於yu外wai潑po消xiao毒du劑ji以yi衛wei捷jie或huo綠lv安an最zui為wei合he適shi。
通過對5種抗生素藥敏實驗結果對比發現病原菌對魚血安最敏感,強力泰、呼(hu)樂(le)芬(fen)次(ci)之(zhi),呋(fu)喃(nan)西(xi)林(lin)抑(yi)菌(jun)效(xiao)果(guo)遠(yuan)不(bu)如(ru)前(qian)三(san)者(zhe),且(qie)該(gai)抗(kang)生(sheng)素(su)屬(shu)於(yu)人(ren)工(gong)合(he)成(cheng)的(de)一(yi)類(lei)硝(xiao)基(ji)呋(fu)喃(nan)類(lei)的(de)廣(guang)譜(pu)抗(kang)菌(jun)藥(yao)物(wu),近(jin)些(xie)年(nian)來(lai)發(fa)現(xian)呋(fu)喃(nan)類(lei)的(de)藥(yao)物(wu)對(dui)人(ren)體(ti)具(ju)有(you)潛(qian)在(zai)的(de)致(zhi)突(tu)變(bian)和(he)致(zhi)癌(ai)性(xing),因(yin)此(ci)不(bu)推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)。磺(huang)胺(an)嘧(mi)啶(ding)鈉(na)作(zuo)為(wei)一(yi)種(zhong)磺(huang)胺(an)類(lei)藥(yao)物(wu)是(shi)早(zao)些(xie)年(nian)羅(luo)非(fei)魚(yu)“鏈球菌病”防治的特效藥,隨著“鏈球菌病”的大量暴發某些養殖戶頻繁使用該類藥品,造成鏈球菌對磺胺類藥物產生極強的耐藥性。
本文通過藥敏實驗得知,磺胺嘧啶鈉對無乳鏈球菌沒有產生任何抑菌效果。這與該地區的某些養殖戶在羅非魚“鏈球菌病”暴發的時候投入大量磺胺類藥物沒有產生應有治療的效果相符合。其他3種抗生素魚血安、強力泰和呼樂芬,由於安全性高,可以作為防治羅非魚鏈球菌的內服藥,根據抑菌效果建議優先選擇魚血安。
通過實地觀察該羅非魚養殖場水質過濃溶氧過高導致羅非魚患“氣泡病”,潛qian在zai增zeng加jia羅luo非fei魚yu的de死si亡wang率lv,因yin此ci建jian議yi潑po灑sa二er氧yang化hua氯lv進jin行xing消xiao毒du,以yi抑yi製zhi藻zao類lei過guo度du繁fan殖zhi造zao成cheng水shui體ti中zhong溶rong氧yang過guo高gao。在zai鰓sai絲si上shang發fa現xian少shao許xu的de車che輪lun蟲chong及ji指zhi環huan蟲chong由you於yu數shu量liang不bu多duo可ke以yi使shi用yong阿e維wei菌jun素su等deng刺ci激ji性xing小xiao的de殺sha蟲chong藥yao進jin行xing全quan池chi潑po灑sa以yi抑yi製zhi車che輪lun蟲chong及ji指zhi環huan蟲chong的de生sheng長chang,起qi到dao預yu防fang作zuo用yong。
作者:福建大北農水產科技有限公司 秦波 郭超藍
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