熒光分子所處的外部化學環境對熒光強度有直接影響.選擇合適的條件不但可以使熒光加強.提高測定的靈敏度.同時.還可以控製幹擾物質的熒光產生.改善分析的選擇性。分了熒光分析法具有如下特點:
(l)靈敏度高.山於是在黑背景下測定熒光發射強度一般而言,分子熒光分析法的靈敏度比紫外一可見吸收光洪分析法高2~4個數址級.檢出限可達0.1--0.001ug.cm-3.
(2)選擇性強。既可根據特征發射光譜,又可根據特征吸收光譜來鑒定物質,還可以采用同步熒光光譜和時間分辨熒光光譜測量方法.進一步提高選擇性。
(3)shiyangliangshao。fenziyingguangfenxifadezhuyaobuzushiyingyongfanweixiao,zheshiyouyubenshennenggoufasheyingguangdewuzhijinengxingchengyingguangceliangtixidewuzhixiangduijiaoshaosuozhi。lingwai,fangfalingmindugaodetongshishouhuanjingyinsudeyingxiangyejiaoda。
2.定量依據與方法
熒光強度If正比於吸收的光強度I8和熒光最子產率:

上式即為定貧的依據。常用的定量方法有標準曲線法和比較法。
dangbeicewuzhibenshennenggouchanshengyingguangshi。ketongguozhijiecedingyingguangqiangdulaiquedinggaiwuzhidenongdu。dandaduoshuwujiheyoujihuahewubenshenbingbuchanshengyingguanghuoyingguangliangzichanlvhendierbunengzhijieceding,cishi,kecaiyongjianjiecedingfaceding。jianjiecedingfayouliangzhongfangshi,yishitongguohuaxuefanyingshifeiyingguangwuzhizhuanbianchengyingguangwuzhi,ruyingguangbiaojifa;二(er)是(shi)通(tong)過(guo)熒(ying)光(guang)猝(cu)滅(mie)法(fa)測(ce)定(ding),即(ji)有(you)些(xie)化(hua)合(he)物(wu)具(ju)有(you)使(shi)熒(ying)光(guang)體(ti)發(fa)生(sheng)熒(ying)光(guang)猝(cu)滅(mie)的(de)作(zuo)用(yong),熒(ying)光(guang)強(qiang)度(du)降(jiang)低(di)值(zhi)與(yu)猝(cu)滅(mie)劑(ji)濃(nong)度(du)成(cheng)線(xian)性(xing)關(guan)係(xi),可(ke)進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi).
3.應用
無機化合物本身不產生熒光,可與有機熒光試劑配位構成發光體係後測最,約可測盆 60多種元素。測定無機化合物時常用的幾種熒光試劑有:8一羥基喹琳、2一羥基一3一萘甲酸、 2.2幾二經基偶氮苯及安息香等.被、鋁、翩、稼、硒、鎂、稀土金屬等元素的分析可采用普通熒光分析法。氛、硫、鐵、銀、鑽、鑲等元素可采用熒光碎滅法測定;鉻、妮、鈾、蹄等元素可采用低溫熒光法側定。具有熒光特性的有機化合物、生物及藥物化合物可直接采用熒光分析法側定。目前熒光分析法已成為側定腎上腺素、青祥素、苯巴比妥、維生素、普pu魯lu卡ka因yin等deng藥yao物wu的de靈ling敏min測ce定ding方fang法fa。對dui於yu不bu產chan生sheng熒ying光guang的de菌jun族zu化hua合he物wu,經jing濃nong硫liu酸suan處chu理li後hou,可ke使shi其qi不bu產chan生sheng熒ying光guang的de環huan狀zhuang醇chun類lei結jie構gou變bian成cheng能neng產chan生sheng熒ying光guang的de酚fen類lei結jie構gou.然後側定。對於多組分熒光物質的測定,如果譜峰不相互重亞,則可分別測定;有部分重疊時,也可利用同步掃描方式,通過控製以來提高分辨率。
在分子熒光分析法中,利用激光誘導產生超高靈敏度,已能實時檢側到溶液中單分子的行為,如溶液中羅丹明6G分子、熒光索分子的單分子行為研究等.使該方麵的研究工作受到廣泛關注。在生物和基因檢測方麵,由於DNA自身的熒光盆子產率很低而不能直接檢測到,但以某些熒光分子作為探針,可通過探針標記分子的熒光變化來研究DNA。典型的熒光探針為澳化乙錠(EB),Tb3+、吖啶類熒光染料、釔的配合物等也被使用.在基因檢測方麵.目前也已逐步采用熒光染料作為標記物來取代同位素標記物。
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