(二)免疫擴散(immunodiffusion)和免疫電泳(immunoelectrophoresis)
1.免疫擴散 於一定條件下,抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇,在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉澱。本法有兩種類型:①單相免疫擴散:將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中,使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉澱環,其大小與抗原量成正比;②雙相免疫擴散:將(jiang)抗(kang)原(yuan)與(yu)抗(kang)體(ti)分(fen)別(bie)置(zhi)於(yu)凝(ning)膠(jiao)板(ban)的(de)相(xiang)對(dui)位(wei)置(zhi),二(er)者(zhe)可(ke)自(zi)由(you)擴(kuo)散(san)並(bing)在(zai)中(zhong)間(jian)形(xing)成(cheng)沉(chen)澱(dian)線(xian)。用(yong)雙(shuang)相(xiang)免(mian)疫(yi)擴(kuo)散(san)法(fa)既(ji)可(ke)用(yong)已(yi)知(zhi)抗(kang)原(yuan)檢(jian)測(ce)未(wei)知(zhi)抗(kang)體(ti),也(ye)可(ke)用(yong)已(yi)知(zhi)抗(kang)體(ti)檢(jian)測(ce)未(wei)知(zhi)抗(kang)原(yuan)。
2.免疫電泳 是shi將jiang免mian疫yi擴kuo散san與yu蛋dan白bai質zhi凝ning膠jiao電dian泳yong相xiang結jie合he的de一yi項xiang技ji術shu。事shi先xian將jiang抗kang原yuan在zai凝ning膠jiao板ban中zhong電dian泳yong,之zhi後hou在zai凝ning膠jiao槽cao中zhong加jia入ru相xiang應ying抗kang體ti,抗kang原yuan和he抗kang體ti雙shuang相xiang擴kuo散san後hou,在zai比bi例li合he適shi的de位wei置zhi,產chan生sheng肉rou眼yan可ke見jian的de弧hu形xing沉chen澱dian線xian。
(三)間接紅細胞凝集試驗(indirect haemagglutination test,IHA) yihongxibaozuoweikerongxingkangyuandezaitibingshizhizhimin。zhimindehongxibaoyuteyixingkangtijieheerchanshengningji,kangyuanyukangtijiandeteyixingfanyingjiyoucierxianxian。changyongdehongxibaoweimianyanghuoO型人紅細胞。
(四)間接熒光抗體試驗 (indirect fluorescent antibody method,IFA)
vvv 本法用熒光素(異硫氰基熒光素)標記第二抗體,可以進行多種特異性抗原抗體反應,即可檢測抗原又可檢測抗體。本法具有較高的敏感性、特(te)異(yi)性(xing)和(he)重(zhong)現(xian)性(xing)等(deng)優(you)點(dian),除(chu)可(ke)用(yong)於(yu)寄(ji)生(sheng)蟲(chong)病(bing)的(de)快(kuai)速(su)診(zhen)斷(duan),流(liu)行(xing)病(bing)學(xue)調(tiao)查(zha)和(he)疫(yi)情(qing)監(jian)測(ce)外(wai),還(hai)可(ke)用(yong)於(yu)組(zu)織(zhi)切(qie)片(pian)中(zhong)抗(kang)原(yuan)定(ding)位(wei)以(yi)及(ji)在(zai)細(xi)胞(bao)和(he)亞(ya)細(xi)胞(bao)水(shui)平(ping)觀(guan)察(cha)和(he)鑒(jian)定(ding)抗(kang)原(yuan)、抗體和免疫複合物。
(五)對流免疫電流試驗 (counter-immunoelectrophoresis,CIE) duiliumianyidianyongshiyanshiyiqiongzhihuoqiongzhitangningjiaoweijizhideyizhongkuaisu,mingandedianyongjishu。jikeyongyizhikangyuanjiancekangti,youkeyongyizhikangtijiancekangyuan。fanyingjieguokexindugao,shiyongfanweiguang。yibenfaweijichugaijindejishuyoumeibiaojikangyuanduiliumianyidianyong(enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE )和放射對流免疫電泳自顯影(radio-immuno-counterelectrophoretic autography,RCIEPA)等技術。二者克服了電泳技術本身不夠靈敏的弱點。
(六)酶聯免疫吸附試驗 (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)
vvv 酶聯免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物(酶)結(jie)合(he),使(shi)其(qi)保(bao)持(chi)免(mian)疫(yi)反(fan)應(ying)和(he)酶(mei)的(de)活(huo)性(xing)。把(ba)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)與(yu)包(bao)被(bei)於(yu)固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)上(shang)的(de)配(pei)體(ti)結(jie)合(he),再(zai)使(shi)之(zhi)與(yu)相(xiang)應(ying)的(de)無(wu)色(se)底(di)物(wu)作(zuo)用(yong)而(er)顯(xian)示(shi)顏(yan)色(se),根(gen)據(ju)顯(xian)色(se)深(shen)淺(qian)程(cheng)度(du)目(mu)測(ce)或(huo)用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)測(ce)定(ding)OD值判定結果。
(七)免疫酶染色試驗 (immunoenzyme staining test,IEST) 免疫酶染色試驗以含寄生蟲病原的組織切片、印yin片pian或huo培pei養yang物wu塗tu片pian為wei固gu相xiang抗kang原yuan,當dang其qi與yu待dai測ce標biao本ben中zhong的de特te異yi性xing抗kang體ti結jie合he後hou,可ke再zai與yu酶mei標biao記ji的de第di二er抗kang體ti反fan應ying形xing成cheng酶mei標biao記ji免mian疫yi複fu合he物wu,後hou者zhe可ke與yu酶mei的de相xiang應ying底di物wu作zuo用yong而er出chu現xian肉rou眼yan或huo光guang鏡jing下xia可ke見jian的de呈cheng色se反fan應ying。
(八)免疫印跡試驗(immunobloting technique,ELIB) 免疫印跡試驗又稱免疫印漬或western blot,是由十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酸胺凝膠電泳(SDS-PAGE),電轉印及固相酶免疫試驗三項技術結合為一體的一種特殊的分析檢測技術。本法具有高度敏感性和特異性。
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