電dian穿chuan孔kong法fa常chang用yong來lai轉zhuan染ran如ru植zhi物wu原yuan生sheng質zhi體ti這zhe樣yang的de常chang規gui方fang法fa不bu容rong易yi轉zhuan染ran的de細xi胞bao。電dian穿chuan孔kong靠kao脈mai衝chong電dian流liu在zai細xi胞bao膜mo上shang打da孔kong而er將jiang核he酸suan導dao入ru細xi胞bao內nei。導dao入ru的de效xiao率lv與yu脈mai衝chong的de強qiang度du和he持chi續xu時shi間jian有you關guan係xi,基ji因yin槍qiang依yi靠kao攜xie帶dai了le核he酸suan的de高gao速su粒li子zi而er將jiang核he酸suan導dao入ru細xi胞bao內nei,這zhe種zhong方fang法fa適shi用yong於yu培pei養yang的de細xi胞bao核he在zai體ti的de細xi胞bao.
DEAE葡聚糖是最早應用哺乳動物細胞(小鼠細胞、大鼠細胞各類傳代細胞等)轉染試劑之一,DEAE-葡聚糖是陽離子多聚物,它與帶負電的核酸結合後接近細胞膜而被攝取,用DEAE-葡聚糖轉染成功地用用於瞬時表達的研究,但用於穩定轉染卻不是十分可靠。
磷酸鈣共沉澱法因為試劑易取得、價格便宜而被廣泛用於瞬時轉染和穩定轉染的研究,先將DNA和CaCl2混合,然後加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸鈣沉澱,最後把含有沉澱的混懸液加到培養的細胞上,通過細胞胞膜的內吞作用攝入DNA。磷酸鈣似乎還通過抑製血清中和細胞內的核酸酶活性而保護外源DNA免受降解.
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磷酸鈣法 穩轉,瞬轉 不適用於原代細胞,操作簡便但重複性差,有些細胞不適用;
陽離子脂質體法 穩轉,瞬轉所有細胞 適用性廣,轉染效率高,重複性好,但轉染時需除血清。轉染效果隨細胞類型變化大;
電穿孔法 穩轉,瞬轉所有細胞 適用性廣但細胞致死率高,DNA和細胞用量大;
DEAE-右旋糖苷法 瞬轉 相對簡便、結果可重複,但對細胞有一定的毒副作用,轉染時需除血清;
病毒介導法 穩轉 可用於難轉染的細胞、原代細胞,體內細胞等;
腺病毒 瞬時轉染特定宿主 可用於難轉染的細胞需考慮安全因素;
Biolistic顆粒傳遞法瞬轉 可用於人的表皮細胞,纖維原細胞,淋巴細胞係以及原代細胞;
顯微注射法 穩轉,瞬轉 轉染細胞數有限,多用於工程改造或轉基因動物的胚胎細胞。
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