通過製片與觀察加深理解細胞的運動、吞噬等生理活動。
【實驗用品】
一、材料和標本 雄性蟾蜍、小白鼠、l%雞血懸液、6%澱粉肉湯、草履蟲。
二、器材和儀器 光鏡、2ml注射器、載玻片、蓋玻片、解剖器材、滴管、移液管、試管、玻璃片、黑紙。
三、試劑 0.3%台盼蘭、1%剛果紅。
【實驗內容】
一、細胞的吞噬活動
(一)原理
白細胞是機體防禦係統中能遊走的單位。它分為粒細胞係、單核細胞係、淋巴係三類。它們有許多生理功能,如遊走性、變形運動、趨化性、吞噬異物等。在白細胞中,以粒細胞、danhexibaodetunshihuodongjiaoqiang,guchengcierleixibaoweitunshixibao。danhexibaoyouxueyejinruzuzhihouzhujianyanbianchengjushixibao。tunshixibaozhuyaokaotunshilaichuliyiwu。tunshixibaoshouxianyouyuquhuazuoyongerxiangyiwuyouzou,ranhoushenchuweizubaoweiyiwu,bingfashengneitunzuoyongxingchengtunshipaojiangyiwutunruxibao,jierrongmeitiyutunshipaoronghexiaohuayiwu。
(二)小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬活動的觀察
l.實驗前二天,每天向小鼠腹腔注射6%澱粉肉湯O.5~1ml(含O.3%台盼蘭,起標記作用),以刺激腹腔產生較多的巨噬細胞(此步由教師在實驗前進行完畢)。
2.實驗時,每組取一隻經上述處理的小鼠,腹腔注射1%雞血懸液0.5~1ml,注射後輕揉小鼠腹部以使紅細胞懸液分散均勻。
3.1小時後,用頸椎脫位法處死小鼠,迅速剖開小鼠腹壁,向腹腔注入O.5ml~1ml生理鹽水,用牙簽輕輕攪拌使生理鹽水與腹腔液混勻。
4.用注射器抽取腹腔液,滴片,然後蓋上蓋片。
5.鏡檢,高倍鏡下畫圖記錄所見結果。
二、暗視野觀察細胞的纖毛和鞭毛運動
(一)原理
暗(an)視(shi)野(ye)照(zhao)明(ming)法(fa)是(shi)一(yi)種(zhong)不(bu)使(shi)照(zhao)射(she)被(bei)檢(jian)物(wu)體(ti)的(de)光(guang)線(xian)直(zhi)接(jie)進(jin)入(ru)物(wu)鏡(jing)的(de)照(zhao)明(ming)方(fang)法(fa)。常(chang)常(chang)用(yong)它(ta)來(lai)觀(guan)察(cha)沒(mei)有(you)染(ran)色(se)的(de)活(huo)體(ti)細(xi)胞(bao)或(huo)膠(jiao)體(ti)粒(li)子(zi)。利(li)用(yong)此(ci)照(zhao)明(ming)法(fa),在(zai)鏡(jing)檢(jian)時(shi)不(bu)能(neng)直(zhi)接(jie)看(kan)到(dao)通(tong)過(guo)標(biao)本(ben)的(de)照(zhao)明(ming)光(guang)線(xian),隻(zhi)有(you)被(bei)檢(jian)物(wu)體(ti)反(fan)射(she)或(huo)衍(yan)射(she)的(de)光(guang)線(xian)進(jin)入(ru)物(wu)鏡(jing)可(ke)以(yi)提(ti)高(gao)分(fen)辨(bian)率(lv),在(zai)暗(an)視(shi)野(ye)中(zhong)可(ke)以(yi)看(kan)到(dao)明(ming)亮(liang)的(de)被(bei)檢(jian)物(wu)體(ti)的(de)存(cun)在(zai)和(he)運(yun)動(dong),但(dan)它(ta)們(men)的(de)內(nei)部(bu)結(jie)構(gou)卻(que)看(kan)不(bu)清(qing)楚(chu)。
(二)自製遮光板變普通顯微鏡為“簡單的暗視野顯微鏡”。
步驟:
1.將顯微鏡聚光器調到最高位,用低倍鏡調焦至清楚。
2.取下目鏡,從鏡筒中觀察並調節光圈的大小,使其與鏡筒中所見物鏡的視野相等。
3.放一塊透明玻璃於載物台透光孔上,用尺子測量光圈孔徑。
4.按照圖6--1的形狀,用黑紙剪成與調節後光圈孔徑一樣大小的中央遮光板。
5.將中央遮光板放置在顯微鏡的濾光框上,即可進行標本的暗視野觀察。
注:如果使用高倍鏡觀察標本時,應按高倍鏡調焦的視野大小重新製作中央遮光板。
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