細胞培養是細胞和分子生物學中使用的最重要的工具之一,它為研究正常的生理學和生物化學提供了出色的模型係統(例如,代謝研究,衰老),藥物和有毒化合物對細胞的影響以及細胞的影響誘變和癌變。 它也用於藥物篩查和發育,以及生物化合物(例如疫苗,治療蛋白)的大規模生產。 將細胞培養用於這些應用中的任何一種的主要優點是可以通過使用一批克隆細胞獲得的結果的一致性和可重複性。
細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)是(shi)指(zhi)從(cong)動(dong)物(wu)或(huo)植(zhi)物(wu)中(zhong)去(qu)除(chu)細(xi)胞(bao),然(ran)後(hou)在(zai)有(you)利(li)的(de)人(ren)工(gong)環(huan)境(jing)中(zhong)生(sheng)長(chang)。細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)在(zai)培(pei)養(yang)前(qian)直(zhi)接(jie)從(cong)組(zu)織(zhi)中(zhong)取(qu)出(chu)並(bing)通(tong)過(guo)酶(mei)或(huo)機(ji)械(xie)手(shou)段(duan)分(fen)解(jie),或(huo)者(zhe)它(ta)們(men)可(ke)以(yi)來(lai)源(yuan)於(yu)已(yi)經(jing)建(jian)立(li)的(de)細(xi)胞(bao)係(xi)或(huo)細(xi)胞(bao)株(zhu)
1.初級培養
原代培養是指細胞從組織中分離並在適當條件下增殖,直到它們占據所有可用基質(即達到彙合)後的培養階段。在這個階段,必須通過將細胞轉移到具有新鮮生長培養基的新容器中來對細胞進行傳代培養(即傳代),以提供更多的繼續生長的空間。
2.細胞係
在第一次繼代培養後,原代培養物被稱為細胞係或亞克隆。來源於原代培養物的細胞係具有有限的壽命(即,它們是有限的),當它們傳代時,具有最高生長能力的細胞占優勢,從而在群體中產生一定程度的基因型和表型一致性。
3.細胞株
ruguotongguokelonghuoqitafangfacongpeiyangwuzhongjijixuanzexibaoxideyaqun,zegaixibaoxichengweixibaozhu。xibaozhutongchangzaiqinbenxikaishihouhuodeewaideyichuanbianhua。
4.有限細胞係與連續細胞係
正常細胞在失去增殖能力之前通常隻分裂有限的次數,這是一種遺傳決定的事件,稱為衰老;這zhe些xie細xi胞bao係xi被bei稱cheng為wei有you限xian的de。然ran而er,一yi些xie細xi胞bao係xi通tong過guo一yi種zhong稱cheng為wei轉zhuan化hua的de過guo程cheng變bian得de不bu朽xiu,這zhe種zhong過guo程cheng可ke以yi自zi發fa發fa生sheng,也ye可ke以yi通tong過guo化hua學xue或huo病bing毒du誘you導dao。當dang一yi個ge有you限xian的de細xi胞bao係xi經jing曆li轉zhuan換huan並bing獲huo得de無wu限xian分fen裂lie的de能neng力li時shi,它ta就jiu變bian成cheng了le一yi個ge連lian續xu的de細xi胞bao係xi。
連lian續xu培pei養yang的de細xi胞bao係xi容rong易yi發fa生sheng遺yi傳chuan漂piao變bian,有you限xian的de細xi胞bao係xi注zhu定ding會hui衰shuai老lao,所suo有you細xi胞bao培pei養yang物wu都dou容rong易yi受shou到dao微wei生sheng物wu汙wu染ran,即ji使shi是shi運yun行xing實shi驗yan室shi也ye可ke能neng出chu現xian設she備bei故gu障zhang。由you於yu已yi建jian立li的de細xi胞bao係xi是shi一yi種zhong寶bao貴gui的de資zi源yuan,其qi替ti代dai品pin昂ang貴gui且qie耗hao時shi,因yin此ci將jiang其qi冷leng凍dong保bao存cun以yi備bei長chang期qi儲chu存cun至zhi關guan重zhong要yao。
yidancongchuandaipeiyangzhonghuodeshaoliangshengyudexibao,yingjiangqizuoweizhongzichubeilengdong,bingjiayibaohu,budegongyibanshiyanshishiyong。keconglengdongzhongzichubeizhongzhibeihebuchonggongzuochubei。ruguozhongzichubeihaojin,ranhou,lengdongbaocundegongzuochubeikeyizuoweizhibeixinxianzhongzichubeidelaiyuan,congchushilengdongkaishi,chanshengshuliangdezengjiazuixiao。
冷凍保存培養細胞的最佳方法是在液氮中,在培養基中,在二甲基亞碸(DMSO)或(huo)甘(gan)油(you)等(deng)冷(leng)凍(dong)保(bao)護(hu)劑(ji)的(de)存(cun)在(zai)下(xia)保(bao)存(cun)細(xi)胞(bao)。低(di)溫(wen)保(bao)護(hu)劑(ji)可(ke)以(yi)降(jiang)低(di)介(jie)質(zhi)的(de)冰(bing)點(dian),也(ye)可(ke)以(yi)降(jiang)低(di)冷(leng)卻(que)速(su)度(du),從(cong)而(er)大(da)大(da)降(jiang)低(di)冰(bing)晶(jing)形(xing)成(cheng)的(de)風(feng)險(xian),而(er)冰(bing)晶(jing)形(xing)成(cheng)會(hui)損(sun)害(hai)細(xi)胞(bao)並(bing)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)死(si)亡(wang)。
DMSO已知有助於有機分子進入組織。處理含有二甲基亞碸的試劑時,應使用適用於此類材料危害的設備和做法。按照當地法規處理試劑。
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