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流式細胞計的基本結構流式細胞計主要由四部分組成。它們是：流動室和液流係統；激光源和光學係統；光電管和檢測係統；計算機和分析係統。
（1）流動室和液流係統：流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成，常用光學玻璃、石英等透明、穩定的材料製作。設計和製作均很精細，是液流係統的心髒。樣品管貯放樣品，單個細胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出；鞘液由鞘液管從四周流向噴孔，包圍在樣品外周後從噴嘴射出。為了保證液流是穩液，一般限製液流速度υ<10m/s。由於鞘液的作用，被檢測細胞被限製在液流的軸線上。流動室上裝有壓電晶體，受到振蕩信號可發生振動。
（2）激光源和光學係統：經特異熒光染色的細胞需要合適的光源照射激發才能發出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光；激(ji)光(guang)器(qi)又(you)以(yi)氬(ya)離(li)子(zi)激(ji)光(guang)器(qi)為(wei)普(pu)遍(bian)，也(ye)有(you)配(pei)和(he)氪(ke)離(li)子(zi)激(ji)光(guang)器(qi)或(huo)染(ran)料(liao)激(ji)光(guang)器(qi)。光(guang)源(yuan)的(de)選(xuan)擇(ze)主(zhu)要(yao)根(gen)據(ju)被(bei)激(ji)發(fa)物(wu)質(zhi)的(de)激(ji)發(fa)光(guang)譜(pu)而(er)定(ding)。汞(gong)燈(deng)是(shi)最(zui)常(chang)用(yong)的(de)弧(hu)光(guang)燈(deng)，其(qi)發(fa)射(she)光(guang)譜(pu)大(da)部(bu)分(fen)集(ji)中(zhong)於(yu)300～400nm，很適合需要用紫外光激發的場合。氬離子激光器的發射光譜中，綠光514nm和藍光488nm的譜線最強，約占總光強的80%；氪離子激光器光譜多集中在可見光部分，以647nm較強。免疫學上使用的一些熒光染料激發光波長在550nm以yi上shang，可ke使shi用yong染ran料liao激ji光guang器qi。將jiang有you機ji染ran料liao做zuo為wei激ji光guang器qi泵beng浦pu的de一yi種zhong成cheng份fen，可ke使shi原yuan激ji光guang器qi的de光guang譜pu發fa生sheng改gai變bian以yi適shi應ying需xu要yao即ji構gou成cheng染ran料liao激ji光guang器qi。例li如ru用yong氬ya離li子zi激ji光guang器qi的de綠lv光guang泵beng浦pu含han有youRhodamine 6G水溶液的染料激光器,則可得到550～650nm連續可調的激光，尤在590nm處chu轉zhuan換huan效xiao率lv最zui高gao，約yue可ke占zhan到dao一yi半ban。為wei使shi細xi胞bao得de到dao均jun勻yun照zhao射she，並bing提ti高gao分fen辨bian率lv，照zhao射she到dao細xi胞bao上shang的de激ji光guang光guang斑ban直zhi徑jing應ying和he細xi胞bao直zhi徑jing相xiang近jin。因yin此ci需xu將jiang激ji光guang光guang束shu經jing透tou鏡jing會hui聚ju。光guang斑ban直zhi徑jingd可由下式確定：d=4λf/πD。λ為激光波長；f為透鏡焦距；D為激光束直徑。色散棱鏡用來選擇激光的波長，調整反射鏡的角度使調諧到所需要的波長λ。為(wei)了(le)進(jin)一(yi)步(bu)使(shi)檢(jian)測(ce)的(de)發(fa)射(she)熒(ying)光(guang)更(geng)強(qiang)，並(bing)提(ti)高(gao)熒(ying)光(guang)訊(xun)號(hao)的(de)信(xin)噪(zao)比(bi)，在(zai)光(guang)路(lu)中(zhong)還(hai)使(shi)用(yong)了(le)多(duo)種(zhong)濾(lv)片(pian)。帶(dai)阻(zu)或(huo)帶(dai)通(tong)濾(lv)片(pian)是(shi)有(you)選(xuan)擇(ze)性(xing)地(di)使(shi)某(mou)一(yi)濾(lv)長(chang)區(qu)段(duan)的(de)光(guang)線(xian)濾(lv)除(chu)或(huo)通(tong)過(guo)。例(li)如(ru)使(shi)用(yong)525nm帶通濾片隻允許FITC（Fluoresceinisothiocyanate,異硫氰熒光素）發射的525nm綠(lv)光(guang)通(tong)過(guo)。長(chang)波(bo)通(tong)過(guo)二(er)向(xiang)色(se)性(xing)反(fan)射(she)鏡(jing)隻(zhi)允(yun)許(xu)某(mou)一(yi)波(bo)長(chang)以(yi)上(shang)的(de)光(guang)線(xian)通(tong)過(guo)而(er)將(jiang)此(ci)波(bo)長(chang)以(yi)下(xia)的(de)另(ling)一(yi)特(te)定(ding)波(bo)長(chang)的(de)光(guang)線(xian)反(fan)射(she)。在(zai)免(mian)疫(yi)分(fen)析(xi)中(zhong)常(chang)要(yao)同(tong)時(shi)探(tan)測(ce)兩(liang)種(zhong)以(yi)上(shang)的(de)波(bo)長(chang)的(de)熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)，就(jiu)采(cai)用(yong)二(er)向(xiang)色(se)性(xing)反(fan)射(she)鏡(jing)，或(huo)二(er)向(xiang)色(se)性(xing)分(fen)光(guang)器(qi)，來(lai)有(you)效(xiao)地(di)將(jiang)各(ge)種(zhong)熒(ying)光(guang)分(fen)開(kai)。
（3）光電管和檢測係統：經熒光染色的細胞受合適的光激發後所產生的熒光是通過光電轉換器轉變成電信號而進行測量的。光電倍增管（PMT）最為常用。PMT的響應時間短，僅為ns數量級；光譜響應特性好，在200～900nm的光譜區，光量子產額都比較高。光電倍增管的增益從103到108可連續調節 ，因此對弱光測量十分有利。光電管運行時特別要注意穩定性問題，工作電壓要十分穩定，工作電流及功率不能太大。一般功耗低於0.5W；最大陽極電流在幾個毫安。此外要注意對光電管進行暗適應處理，並注意良好的磁屏蔽。在使用中還要注意安裝位置不同的PMT，因為光譜響應特性不同，不宜互換。也有用矽光電二極管的，它在強光下穩定性比PMT好。
從PMT輸(shu)出(chu)的(de)電(dian)信(xin)號(hao)仍(reng)然(ran)較(jiao)弱(ruo)，需(xu)要(yao)經(jing)過(guo)放(fang)大(da)後(hou)才(cai)能(neng)輸(shu)入(ru)分(fen)析(xi)儀(yi)器(qi)。流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)計(ji)中(zhong)一(yi)般(ban)備(bei)有(you)兩(liang)類(lei)放(fang)大(da)器(qi)。一(yi)類(lei)是(shi)輸(shu)出(chu)信(xin)號(hao)輻(fu)度(du)與(yu)輸(shu)入(ru)信(xin)號(hao)成(cheng)線(xian)性(xing)關(guan)係(xi)，稱(cheng)為(wei)線(xian)性(xing)放(fang)大(da)器(qi)。線(xian)性(xing)放(fang)大(da)器(qi)適(shi)用(yong)於(yu)在(zai)較(jiao)小(xiao)範(fan)圍(wei)內(nei)變(bian)化(hua)的(de)信(xin)號(hao)以(yi)及(ji)代(dai)表(biao)生(sheng)物(wu)學(xue)線(xian)性(xing)過(guo)程(cheng)的(de)信(xin)號(hao)，例(li)DNA測ce量liang等deng。另ling一yi類lei是shi對dui數shu放fang大da器qi，輸shu出chu信xin號hao和he輸shu入ru信xin號hao之zhi間jian成cheng常chang用yong對dui數shu關guan係xi。在zai免mian疫yi學xue測ce量liang中zhong常chang使shi用yong對dui數shu放fang大da器qi。因yin為wei在zai免mian疫yi分fen析xi時shi常chang要yao同tong時shi顯xian示shi陰yin性xing、陽性和強陽性三個亞群，它們的熒光強度相差1～2個數量級；而且在多色免疫熒光測量中，用對數放大器采集數據易於解釋。此外還有調節 便利、細胞群體分布形狀不易受外界工作條件影響等優點。
（4）計算機和分析係統：jingfangdahoudedianxinhaobeisongwangjisuanjifenxiqi。duodaodedaoshushihedianxinhaodemaichonggaoduxiangduiyingde，yeshiheguangxinhaodeqiangruoxiangguande。duiyingdaoshunianzongzuobiaotongchangdaibiaofachugaixinhaodexibaoxiangduishumu。duodaofenxiqichulaidexinhaozaijingmo-shuzhuanhuanqishuwangweijichuliqibianchengshujuwenjian，huocunzhuyujisuanjideyingpanheruanpanshang，huocunyuyiqineiyibeitiaoyong。jisuanjidecunzhurongliangjiaoda，kecunzhutongyixibaode6～8gecanshu。cunzhuyujisuanjineideshujukeyizaishicehoutuojizhongxian，jinxingshujuchulihefenxi，zuihougeichujieguo。chushangshusigezhuyaobufenwai，haibeiyoudianyuanjiyasuoqitidengfujiazhuangzhi。
