掃描電鏡在觀察生物樣品時,具有以下特點:
(1)多角度觀察樣品的表麵結構;
(2)不需要將樣品切成薄片;
(3)景深大、圖像立體感強;
(4)放大倍數從幾十倍到幾十萬倍連續可調;
在觀察形貌的同時可以對微區的成分進行定量和定性分析。而能否獲得真實、清晰、理想的掃描電鏡觀察結果,樣品的製備過程是關鍵。
生物樣品含水直接觀察,會對掃描電鏡造成以下影響:
1. 樣品蒸發的水蒸氣遭遇高能電子束,會被電離而放電,引起束流大幅度波動,使圖像模糊,或者根本不能成像;
2. 大多數含水樣品在高真空中容易發生形態損傷,表麵皺縮、變形;
3. 樣品揮發會造成鏡頭、光闌等的汙染;
4. 燈絲會被上升水蒸氣氧化而變質。
生物樣品的含水量高,二次電子產率低,導電性差,對熱,電子束敏感,僅有少數樣品如毛發、牙齒以及含水量極低的昆蟲等可以直接噴鍍觀察,絕大多數的生物樣品均要求經過幹燥處理才能鍍金觀察。
幹燥是(shi)掃(sao)描(miao)電(dian)鏡(jing)生(sheng)物(wu)樣(yang)品(pin)製(zhi)備(bei)中(zhong)的(de)關(guan)鍵(jian)環(huan)節(jie),如(ru)果(guo)處(chu)理(li)不(bu)好(hao),會(hui)直(zhi)接(jie)影(ying)響(xiang)到(dao)觀(guan)察(cha)的(de)清(qing)晰(xi)度(du)與(yu)準(zhun)確(que)度(du)。要(yao)想(xiang)製(zhi)備(bei)出(chu)好(hao)的(de)掃(sao)描(miao)電(dian)鏡(jing)生(sheng)物(wu)樣(yang)品(pin),需(xu)要(yao)在(zai)幹(gan)燥(zao)過(guo)程(cheng)中(zhong)盡(jin)可(ke)能(neng)減(jian)少(shao)由(you)於(yu)水(shui)分(fen)蒸(zheng)發(fa)而(er)引(yin)起(qi)的(de)樣(yang)品(pin)表(biao)麵(mian)形(xing)貌(mao)的(de)形(xing)變(bian),且(qie)必(bi)須(xu)確(que)保(bao)幹(gan)燥(zao)。大(da)多(duo)數(shu)動(dong)植(zhi)物(wu)容(rong)易(yi)發(fa)生(sheng)明(ming)顯(xian)的(de)塌(ta)陷(xian)和(he)變(bian)形(xing)。因(yin)此(ci),需(xu)要(yao)針(zhen)對(dui)不(bu)同(tong)的(de)生(sheng)物(wu)樣(yang)品(pin)來(lai)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)幹(gan)燥(zao)方(fang)法(fa)。