生物安全櫃(以下簡稱BSC)是一種半密閉的通風設備,它為實驗操作者提供潔淨空氣,並且潔淨空氣按特定方向持續吹出。
BSC內提供了一個供操作者擺放實驗工具和操作的台麵,當設備運行時,台麵內的空間會持續獲得經過過濾的潔淨空氣;設備不運行時,可關閉台麵的玻璃門,並執行紫外照射消毒。
1 分類
BSC根據防護等級可以分為I、II和III三種等級。
I級保護樣品無菌,但不保護人員和環境,適用於低至中等風險的實驗操作;
II級(A1/A2/B1/B2型)同時保護人員、樣品和環境,適用中等至高風險操作,如病原體培養,其中A2和B型可處理揮發性有毒物質;
III級為全密閉,最高防護級別,用於高危病原體(如埃博拉病毒)。
如果我們的課題研究不涉及高風險病原微生物,那麼細胞房內一般配備的是II級BSC。
從下方的II級BSC工作原理圖可見,細胞房內的空氣經過操作台麵前端的氣孔被吸入BSC內,經過內部管道流通後,到達操作台麵上方的HEPAlvmo。jinglvmoguolvhoudekongqicongshangzhixiachuisongzhicaozuotaimian。zhexiechuixiangtaimiandejiejingkongqi,dangchuiguoyangpinhegongjuzhihoujiubuzaijiejingle,tamenhuizaicibeitaimianqianduandeqikonghuishoujinruercixunhuan。zheyang,jiuquebaolebujiejingdekongqibuhuichuichutaimianjinerwurancaozuozhehehuanjing。
所以說,II級BSC能保護樣品也能保護人員和環境。
2 如何開關
在每一次實驗操作之前,應該先擦拭幹淨台麵,把稍後操作要用的工具按一定規則擺放好,然後關上玻璃門,設置紫外照射30分鍾,此時,人應遠離BSC等待消毒結束。
消毒結束後,關閉紫外,拉起玻璃門至適當高度(通常設備會有提示限高位置,超出後無法打開風機或報警),然後開燈和打開風機。等待內部氣流穩定5-10分鍾後,人再坐下來操作。
實驗操作結束後,清潔台麵,此時仍然應該讓風機繼續運行5-10分鍾,目的是把內部空氣完成過濾。
3 如何擺放
操作台麵呈矩形,工具擺放時應遵循科學分區原則:
(1)將台麵分為潔淨區、操作區和汙染區;
(2)操作區在中間位置,潔淨區和汙染區不相鄰;
(3)工具應盡量均勻展開,彼此不遮擋。
潔淨區應擺放樣品和一次性耗材,例如吸頭、移液管、離心管、培養瓶皿。
操作區是實驗操作的區域,中間位置盡量留空,靠內側的位置可擺放移液器、試劑瓶。
汙染區是存放廢棄物的地方,可以把廢液缸、垃圾桶放在這裏,但應盡量靠內側、靠遠端放置(應確保與它們距離最近的瓶皿、設備至少相隔30厘米或以上)。
4 使用注意事項
首先,正式操作時,操作者的手會多次伸入台麵,並在裏麵移動。我們應注意:
(1)手臂應與台麵呈垂直方向伸入;
(2)在內部左右移動時速度不要過快(見下圖)。
這樣可以盡量降低手臂移動對垂直氣流帶來的擾動。
其次,台麵上的工具會被拿來拿去,要切記:
(1)工具用完後不要放錯區域;
(2)工具擺放的位置絕對不能擋住進氣孔。
第二點的原因是避免工具擋住進氣孔,造成汙染的空氣無法被回收,從而釋放到實驗室內,同時也會造成外部汙染的空氣進入BSC時不能全部被吸入進氣孔,造成汙染台麵。
最後,是盡量避免樣品、試劑被氣流長時間對著直接吹。這一點可能有點難理解,我們舉例說明。
例如,培養皿的蓋子打開後,手應該拿著蓋子擋住上方的氣流,而不是直接讓皿內的培養物被氣流持續吹著。一方麵是防止空氣汙染(雖然可能性很小),另一方麵是避免強大的氣流把培養物內可能存在的汙染吹出來。同理,試劑瓶也是如此。
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