在使用ELISA試劑盒進行實驗的時候，需要注意很多問題，比如溫育、顯色
、包被等問題。其中，包被是要特別注意的一個問題，直接關係到實驗的效果。

一、 包被的方式

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。蛋白質與聚苯 烯xi固gu相xiang載zai體ti是shi通tong過guo物wu理li吸xi附fu結jie合he的de
，靠kao的de是shi蛋dan白bai質zhi分fen子zi結jie構gou上shang的de疏shu水shui基ji團tuan與yu固gu相xiang載zai體ti表biao麵mian的de疏shu水shui基ji團tuan間jian的de作zuo用yong。這zhe種zhong物wu理li吸xi附fu是shi非fei特te異yi性xing的de
，受shou蛋dan白bai質zhi的de分fen子zi量liang、等電點
、濃度等的影響。

大da分fen子zi蛋dan白bai質zhi較jiao小xiao分fen子zi蛋dan白bai質zhi通tong常chang含han有you更geng多duo的de疏shu水shui基ji團tuan，故gu更geng易yi吸xi附fu到dao固gu相xiang載zai體ti表biao麵mian。不bu易yi吸xi附fu的de非fei蛋dan白bai質zhi抗kang原yuan可ke用yong間jian接jie包bao被bei的de抗kang原yuan經jing固gu相xiang抗kang體ti的de親qin和he層ceng析xi作zuo用yong
，包bao被bei在zai固gu相xiang上shang的de抗kang原yuan純chun度du大da大da提ti高gao，因yin此ci含han雜za質zhi較jiao多duo的de抗kang原yuan也ye可ke采cai用yong捕bu獲huo包bao被bei法fa。

親和素生物素即用親和素先包被載體
，加入生物素化的DNA，ELISA試劑盒這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用於各種抗原物質的定量測定。脂類物質無法與固相載體結合
，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解後加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱或冷風吹幹，待酒精揮發後，讓脂質自然幹固在固相表麵。

優點：試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重複性亦佳。抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至於/100。