如果沒有光度計(酶標儀)靠肉眼判斷,則陰
、陽性判斷主要靠經驗。ELISA常用結果判定方法如下：

1、 定性測定

定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答，分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定係統中有反應。"陰性"zeweiwufanying。yongdingxingpanduanfayekededaobandingliangjieguo
，jiyongdidulaibiaoshifanyingdeqiangdu，qishizhirengshiyigedingxingshiyan。zaizhezhongbandingliangcedingzhong，jiangbiaobenzuoyixiliexishihoujinxingshiyan，chengyangxingfanyingdezuigaoxishidujiweididu。genjudidudegaodi
，keyipanduanbiaobenfanyingxingdeqiangruo
，zhebiguanchabuxishibiaobenchengsedeshenqianpanduanweiqiangyangxing、弱陽性更具定量意義。

在間接法和夾心法ELSIA中，陽性孔呈色深於陰性孔。在競爭法ELISA中則相反，陰性孔呈色深於陽性孔。兩類反應的結果判斷方法不同，分述於下。

(1) 間接法和夾心法

這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近於無色者判為陰性，顯色清晰者為陽性。但在ELSIAzhong
，zhengchangrenxueqingfanyinghouchangkechuxianchengsedebendi



，cibendideshenqianyinshijidezuchengheshiyandetiaojianbutongeryi，yincishiyanzhongbixujiaceyinxingduizhao。yinxingduizhaodezuchengyingweibuhanshoujianwudezhengchangxueqinghuoleisiwu。zaiyongrouyanpanduanjieguoshi，gengyiyongxianseshenyuyinxingduizhaozuoweibiaobenyangxingdezhibiao。

目視法簡捷明了，但頗具主觀性。在條件許可下，應該用比色計測定吸光值，這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本(sample，S)、陽性對照(P)
、和陰性對照(N)的吸光值，然後進行計算。計算方法有多種，大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。

a. 陽性判定值

陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數
，以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。

yongcifapanduanjieguoyaoqiushiyantiaojianshifenhengding，shijidezhibeibixubiaozhunhua

，yangxingheyinxingdeduizhaopinyingfuheyidingdeguige，xupeiyongjingmideyiqi，bingyangeanguidingcaozuo。yangxingpandingzhigongshizhongdechangshushizaizhetedingdexitongzhongtongguoduidaliangbiaobendeshiyanjianceerdedaode。xianjumouzhongjianceHBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的複鈣人血漿，陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml.每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值後，先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX)，兩個平均數的差(P-N)必須大於一個特定的數值(例0.400)，試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX，並≤1.5×NCX
，如其中之一超出此範圍
，則棄去
，而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上範圍，則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算： 陽性判定值=NCX+0.05 標本A值>陽性判定值的為陽性，小於陽性判定值的為陰性。應注意的是，式中0.05為該試劑盒的常數，隻適合於該特定條件下

，而不是對各種試劑均可通用。

根據以上敘述可以看出，在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用，試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的後果。

b.標本/陰性對照比值

在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下
，這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值後，計算S/N值。也有寫作P/N的
，這裏的P不代表陽性(positive)，而是病人(patient)的縮寫，不應誤解。為避免混淆
，更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中
，有些作者定出S/N為陽性標準，現多為各種測定所沿用。實際上每一測定係統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是
，N所(suo)代(dai)表(biao)的(de)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)是(shi)不(bu)含(han)受(shou)檢(jian)物(wu)質(zhi)的(de)人(ren)血(xue)清(qing)。有(you)的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)中(zhong)所(suo)設(she)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)為(wei)不(bu)含(han)蛋(dan)白(bai)質(zhi)或(huo)蛋(dan)白(bai)質(zhi)含(han)量(liang)較(jiao)底(di)的(de)緩(huan)衝(chong)液(ye)
，以(yi)致(zhi)反(fan)應(ying)後(hou)產(chan)生(sheng)的(de)本(ben)底(di)可(ke)能(neng)較(jiao)正(zheng)常(chang)人(ren)血(xue)清(qing)的(de)本(ben)底(di)低(di)得(de)多(duo)。因(yin)此(ci)
，這(zhe)類(lei)試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)

，如(ru)N<0.05(或其他數值)，則按0.05計算，否則將出現假陽性結果。

(2)競爭法

在競爭法ELISA中
，陰性孔呈色深於陽性孔。陰性呈色的強度取決於反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑製物的量，一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間
，此時反應最為敏感。

競爭法ELISA不易用自視判斷結果
，因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異
，一般均用比色計測定，讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種，即陽性判定值法和抑製率法。

a. 陽性判定值法

與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同
，但在計算公式中引入陽性對照A值


，現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的複鈣人血漿
，陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml.每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值後，先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX)
，兩個平均數的差(N-P)必須大於一個特定的數值(例如0.300)，試驗才有效。3個陰性對照A值均應小於2.000，而且應≥0.5×NCX並≤1.5×NCX，如其中之一超出此範圍，則棄去
，而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上範圍，則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算：

陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX

標本A值≤陽性判定值的反應為陽性，A>陽性判定值的反應為陰性。

b. 抑製率法

抑製率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑製程度，按下式計算：

抑製率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值

一般規定抑製率≥50%為陽性
，<50%為陰性。

2
、定量測定

ELSIA操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)複(fu)雜(za)，影(ying)響(xiang)反(fan)應(ying)因(yin)素(su)較(jiao)多(duo)，特(te)別(bie)是(shi)固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)的(de)包(bao)被(bei)難(nan)達(da)到(dao)各(ge)個(ge)體(ti)之(zhi)間(jian)的(de)一(yi)致(zhi)，因(yin)此(ci)在(zai)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)中(zhong)，每(mei)批(pi)測(ce)試(shi)均(jun)須(xu)用(yong)一(yi)係(xi)列(lie)不(bu)同(tong)濃(nong)度(du)的(de)參(can)考(kao)標(biao)準(zhun)品(pin)在(zai)相(xiang)同(tong)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)製(zhi)作(zuo)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)。測(ce)定(ding)大(da)分(fen)子(zi)量(liang)物(wu)質(zhi)的(de)夾(jia)心(xin)法(fa)ELISA，標準曲線的範圍一般較寬
，曲線最高點的吸光度可接近2.0
，繪製時常用半對數紙，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標

，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨於平坦，中央較呈直線的部分是的檢測區域。

cedingxiaofenziliangwuzhichangyongjingzhengfa
，qibiaozhunquxianzhongxiguangduyushoujianwuzhidenongduchengfuxiangguan。biaozhunquxiandexingzhuangyinshijihesuoyongmoshidechabieerlveyoubutong。ELISA測定的標準曲線橫坐標為對數關係，這更有利於測定係統的表達。