波長準確度的檢驗:
分光光度計在使用過程中,由於機械振動、溫度變化、燈絲變形、燈(deng)座(zuo)鬆(song)動(dong)或(huo)更(geng)換(huan)燈(deng)泡(pao)等(deng)原(yuan)因(yin),經(jing)常(chang)會(hui)出(chu)現(xian)刻(ke)度(du)盤(pan)上(shang)的(de)讀(du)數(shu)與(yu)實(shi)際(ji)通(tong)過(guo)溶(rong)液(ye)的(de)波(bo)長(chang)不(bu)符(fu)合(he)的(de)現(xian)象(xiang),因(yin)而(er)導(dao)致(zhi)儀(yi)器(qi)靈(ling)敏(min)度(du)降(jiang)低(di),影(ying)響(xiang)測(ce)定(ding)結(jie)果(guo)的(de)精(jing)度(du),需(xu)要(yao)進(jin)行(xing)檢(jian)驗(yan)。
檢驗波長準確度最簡單的方法是用幹涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值。如果測出的值與濾光片標準值之差超出規程規定,則需要進行波長調節。
透射比正確度的檢驗:用透射比標準值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片,可見光區分別在440nm、546nm、635nm波長處,以空氣為參比,分別測量各濾光片的透射比;紫外光區用重鉻酸鉀溶液分別在235nm、257nm、313nm、350nm波長處,以高氯酸溶液為參比,測量其透射比。
穩定度的檢驗:在零點不受光的條件下,用零點調節器將儀器調至零點,觀察3分鍾讀取透射比的變化,即為零點穩定性。在儀器測量範圍兩端向中間靠10nm處,調節零點後,蓋上樣品室蓋(打開光門),使光電管受光,調節透射比為95%(數顯儀器調至100%),觀察3分鍾讀取透射比的變化,為光電流穩定性。
雜散光的檢驗:可見分光計棱鏡式儀器在420nm處,光柵式儀器在360nm處,紫外分光計在220nm處,分別用符合規定的截止濾光片,以空氣為參比,測量其透射比值,即為儀器在相應波長下的雜散輻射率。
02使用分光光度計的步驟與方法
預熱儀器:為使測定穩定,將電源開關打開,使儀器預熱20分鍾。為了防止光電管疲勞,不要連續光照。預熱儀器時和在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷。
選定波長:根據實驗要求,轉動波長調節器,使指針指示所需要的單色光波長。
固定靈敏度檔:根據有色溶液對光的吸收情況,為使吸光度讀數為0.2~0.7,選擇合適的靈敏度。為此,旋動靈敏度檔,使其固定於某一檔,在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。
調節“0”點:輕輕旋動調“0”電位器,使讀數表頭指針恰好位於透光度為“0”處(此時,比色皿暗箱蓋是打開的,光路被切斷,光電管不受光照)。
調節T=100%:將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的第一格內,有色溶液放在其他格內,把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉動光量調節器,使透光度T=100%,即表頭指針恰好指在T=100%處。
測定:輕輕拉動比色皿座架拉杆,使有色溶液進入光路,此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A,讀數後,打開比色皿暗箱蓋。
關機:實驗完畢,切斷電源,將比色皿取出洗淨,並將比色皿座架及暗箱用軟紙擦淨。
03使用分光光度計的注意事項
02樣品管理目的
防止光電管疲勞:不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。
比色皿的使用方法:拿比色皿時:手指隻能捏住比色皿的毛玻璃麵,不要碰比色皿的透光麵,以免沾汙。
清洗比色皿時:一般先用水衝洗,再用蒸餾水洗淨。如果比色皿被有機物沾汙,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)jinpaopianke,zaiyongshuichongxi。bunengyongjianrongyehuoyanghuaxingqiangdexidiyexibisemin,yimiansunhuai。yebunengyongmaoshuaqingxibisemin,yimiansunshangtadetouguangmian。meicizuowanshiyanshi,yinglijixijingbisemin。
比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸幹:以保護透光麵。
測定有色溶液吸光度時:一(yi)定(ding)要(yao)用(yong)有(you)色(se)溶(rong)液(ye)洗(xi)比(bi)色(se)皿(min)內(nei)壁(bi)幾(ji)次(ci),以(yi)免(mian)改(gai)變(bian)有(you)色(se)溶(rong)液(ye)的(de)濃(nong)度(du)。另(ling)外(wai),在(zai)測(ce)定(ding)一(yi)係(xi)列(lie)溶(rong)液(ye)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)時(shi),通(tong)常(chang)都(dou)按(an)由(you)稀(xi)到(dao)濃(nong)的(de)順(shun)序(xu)測(ce)定(ding),以(yi)減(jian)小(xiao)測(ce)量(liang)誤(wu)差(cha)。
在實際分析工作中:通常根據溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控製在0.2~0.7。
04分光光度計的維護和保養
02樣品管理目的
分光光度計是精密儀器,正確安裝、使用和保養對保持儀器良好的性能和保證測試的準確度有重要作用。
對儀器工作環境的要求:分光光度計應安裝在穩定的工作台上,周圍不應有強磁場,以防電磁幹擾。室內溫度應保持在10~30℃,室內應幹燥,相對濕度宜控製在<85%,室內應無腐蝕性氣體,光線不宜過強。
儀器保養和維護方法:儀器工作電壓一般為220V,允許±10%的電壓波動。為保持光源燈和檢測係統的穩定性,在電源電壓波動較大的實驗室最好配備穩壓器。
為了延長光源使用壽命,在不用時不要開光源燈。ruguoguangyuandengliangdumingxianjianruohuobuwending,yingjishigenghuanxindeng。genghuanhouyaotiaojiehaodengsiweizhi,buyaoyongshouzhijiejiechuchuangkouhuodengpao,bimianyouwuzhanfu,ruobuxiaoxinjiechuguo,yaoyongwushuiyichuncashi。
單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內,不能拆開。為防止色散元件受潮發黴,必須經常更換幹燥劑。
必須正確使用吸收池,保護吸收池光學麵。
光電轉換元件不能長時間曝光,應避免強光照射或受潮積塵。
通過以上檢驗、操作與維護方法,可以有效提高分光光度計的使用效率和測量精度,延長儀器的使用壽命,確保實驗數據的可靠性。
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