微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)培(pei)養(yang)都(dou)是(shi)在(zai)特(te)定(ding)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)進(jin)行(xing)無(wu)菌(jun)培(pei)養(yang),那(na)麼(me)無(wu)菌(jun)培(pei)養(yang)必(bi)然(ran)需(xu)要(yao)超(chao)淨(jing)工(gong)作(zuo)台(tai)提(ti)供(gong)一(yi)個(ge)無(wu)菌(jun)的(de)工(gong)作(zuo)環(huan)境(jing)。超(chao)淨(jing)工(gong)作(zuo)台(tai)的(de)主(zhu)要(yao)用(yong)途(tu)是(shi)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)接(jie)種(zhong)及(ji)處(chu)理(li)時(shi)的(de)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)。
2、無菌室(接種室)或接種箱
要(yao)培(pei)養(yang)微(wei)生(sheng)物(wu),首(shou)先(xian)就(jiu)需(xu)要(yao)接(jie)種(zhong),而(er)接(jie)種(zhong)必(bi)須(xu)在(zai)無(wu)菌(jun)條(tiao)件(jian)下(xia)進(jin)行(xing)。這(zhe)就(jiu)需(xu)要(yao)建(jian)造(zao)無(wu)菌(jun)室(shi)或(huo)接(jie)種(zhong)箱(xiang),為(wei)接(jie)種(zhong)創(chuang)造(zao)必(bi)要(yao)的(de)條(tiao)件(jian)。無(wu)菌(jun)室(shi)可(ke)以(yi)建(jian)在(zai)實(shi)驗(yan)室(shi)內(nei),作(zuo)為(wei)實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)一(yi)個(ge)小(xiao)套(tao)間(jian)。麵(mian)積(ji)為(wei)4~5平方米,高2.5米左右。無菌室外應連接一個小緩衝間,麵積為2平方米左右。緩衝間和無菌室的門不要建在同一條直線上,以減少空氣中雜菌進入無菌室。無菌室和緩衝間應作到清潔、密閉性好,室內最好有換氣設備,以便在工作結束後更換室內空氣。兩個房間中應各安裝1盞30瓦紫外線燈管和照明用的日光燈,無菌室的紫外線燈應懸吊在工作台的正上方,距台麵1米mi,以yi發fa揮hui最zui大da的de消xiao毒du功gong能neng。無wu菌jun室shi內nei的de工gong作zuo台tai等deng用yong具ju用yong品pin,應ying經jing常chang保bao持chi清qing潔jie,避bi免mian雜za菌jun汙wu染ran。如ru果guo沒mei有you條tiao件jian建jian造zao無wu菌jun室shi,可ke以yi用yong木mu製zhi的de接jie種zhong箱xiang代dai替ti。接jie種zhong箱xiang結jie構gou簡jian單dan,容rong易yi製zhi作zuo,其qi正zheng麵mian安an裝zhuang玻bo璃li,便bian於yu觀guan察cha。箱xiang前qian方fang開kai兩liang個ge圓yuan洞dong各ge接jie連lian1隻套袖,操作時將兩臂從套袖伸入箱內進行操作。箱內也應懸吊一盞紫外線殺菌燈和一盞日光燈。
3、培養箱
培養箱有很多種類型,它的用途在於為微生物提供一個適宜的生長環境。主要類型包括生化培養箱,黴菌培養箱,厭氧培養箱等。它們的區別主要在於:
a.生化培養箱隻能控製溫度。這類培養箱可作為一般細菌的平板培養。
b.黴菌培養箱可以控製濕度和溫度。它主要用在黴菌的培養。
c.CO2培養箱適用於厭氧微生物的培養,例如,雙歧杆菌。
4、天平
它是用於精確稱量各類試劑。實驗室常用的是電子天平,電子天平按照精度不同又有不同的級別。
5、微生物均質器
它的作用在於從固體樣品中提取細菌。用微生物均質器製備微生物檢測樣本具有樣品無損傷、無汙染、不升溫、不需要洗刷器皿,不需滅菌處理等特點,是微生物實驗中使用較為方便的儀器。
6、菌落計數器
菌落計數儀可幫助操作者計數菌落數量。通過放大、拍照、計數等方式準確獲取菌落的數量。有些高性能的菌落計數器還可直接連接電腦來完成自動計數的操作,方便快捷的計數。
7、微波爐/電爐
它主要用於溶液的快速加熱,微生物固體培養基的加熱熔化。
8、高壓滅菌鍋
微生物學所用到的大部分實驗物品、培養基、試劑都應嚴格通過消毒滅菌。滅菌鍋也有不同的大小型號,有些是手動的,有些是全自動的。用戶就要根據自己的需要選購。
9、移液器
它是用於精密量取各類液體。常見的液體量器有量筒、微量取液器、移液管、刻度試管、燒杯等。
10、冰箱
冰箱是實驗室中保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學實驗中用到的試劑有些要求是4度保存,有些要求是負20度保存,實驗人員一定要看清試劑的保存條件,放置在恰當的溫度下保存。
具體來說,不同溫度下保存的物品如下:
a.4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。
b.-20℃適用於某些試劑、藥品、配好的抗生素等。
c.-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸杆菌菌種、感受態等的保存。
11、生物安全櫃
微生物實驗中所涉及到的部分試劑和樣品微生物有些是有毒的,對於操作人員來說傷害比較大。為了防止有害的懸浮微粒、氣溶膠的擴散,可以利用生物安全櫃對操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環境提供安全的保護作用。
12、搖床
搖床是實驗室比較常用的一種儀器,在微生物實驗操作過程中,液體培養基培養細菌時需要在特定溫度下振蕩使用。
13、純水裝置
純水裝置包括純水機和蒸餾水器。蒸餾水器的價格比較便宜,但在造水過程中需要有人值守;純水機價格高些,但是使用方便,可以儲存一定量的純水。純水的使用也有不同級別,實驗中配製試劑,配製培養基均都需用純水。
14、生物顯微鏡
由於微生物的體積比較小,所以在觀察時需要借助生物顯微鏡。生物顯微鏡主要用於微生物和微小物品結構和形態等方麵的觀察。
15、冷凍幹燥機
主要適用於細菌、微生物、jiaomudengdeganzaozuoyong。yongyuganzaobaocunyituoshuidechanpin,zaijiashuiyihounenggouzaicihuifuyuancailiaodetexing,buyingxiangqishengwuhuoxing。tongguolengdongganzao,xijunzhileidecailiaochengweiganzaozhuangtai,congerbuhuifashenghuaxuegaibian。
16、分光光度計
分光光度計在微生物試驗中用於測定微生物懸液的濃度,可以正確選取合適的培養時間。一般是在600nm波長測定菌液濃度。
17、恒溫箱
用於恒溫條件下培養微生物。恒溫箱的調溫範圍一般為20~45℃之間。培養酵母菌和黴菌時,一般可調至28℃,培養細菌和放線菌時,可根據菌種的生長溫度進行調溫,一般為30~37℃。
18、電烘箱(幹燥箱)
用於玻璃器皿等物的烤幹和滅菌。電烘箱的調溫的範圍一般為40~180℃,對玻璃器皿等物進行滅菌時,可將溫度調至160℃,滅菌4小時,即可將器皿上的微生物全部殺死。滅菌完畢後,在電烘箱溫度還沒有降到50~70℃以前,不要打開電烘箱,以免器皿破裂。
19、恒溫水浴鍋
水浴鍋是一種控溫裝置,水浴控溫對於樣品來說比較快速且接觸充分。有些微生物反應需要在37度,42度,56度下水浴進行,所以恒溫水浴鍋可以提供需要的溫度。
20、酸度計
用於配製試劑時精確測量pH值,從而保證配製的溶液的精確性。有時也需要利用pH計測定樣品溶液的酸堿度。
21、離心機
用(yong)於(yu)收(shou)集(ji)微(wei)生(sheng)物(wu)菌(jun)體(ti)以(yi)及(ji)其(qi)他(ta)沉(chen)澱(dian)物(wu)。離(li)心(xin)機(ji)有(you)冷(leng)凍(dong)和(he)常(chang)溫(wen)之(zhi)分(fen)。有(you)些(xie)樣(yang)品(pin)由(you)於(yu)在(zai)常(chang)溫(wen)下(xia)不(bu)太(tai)穩(wen)定(ding),需(xu)要(yao)低(di)溫(wen)環(huan)境(jing),要(yao)視(shi)樣(yang)品(pin)的(de)種(zhong)類(lei)而(er)定(ding)。
離心機清洗要求:在離心機內腔,設置多個清洗頭或清洗管,離心機可在不開蓋或運轉過程中對離心機內部進行清洗。
重點有以下幾個部位:①轉鼓底麵及軸承座部位的清洗;②攔液板表麵及轉鼓筒體外表麵;③轉鼓筒體內表麵;④翻蓋內表麵及進料、刮刀等裝置表麵;⑤外殼內表麵。
離心機維護規則:
(1)一次規則
當係統出了故障,你可以試探性地改變某些狀態,一次可以改變一個參數。做一些簡單的改變步驟,也許就能解決問題。
(2)二次比較規則
在zai動dong手shou檢jian修xiu之zhi前qian已yi經jing明ming確que了le故gu障zhang所suo在zai,或huo者zhe已yi經jing確que定ding了le解jie決jue故gu障zhang的de方fang案an。換huan句ju話hua說shuo,動dong手shou之zhi前qian已yi經jing找zhao對dui了le解jie決jue辦ban法fa。例li如ru,在zai進jin樣yang過guo程cheng中zhong發fa現xian內nei標biao物wu的de峰feng值zhi變bian低di了le,可ke以yi重zhong複fu進jin樣yang看kan看kan重zhong複fu性xing如ru何he,如ru果guo是shi偶ou然ran變bian低di,是shi否fou是shi定ding量liang管guan裏li進jin了le氣qi泡pao。這zhe個ge規gui則ze可ke用yong於yu考kao察cha係xi統tong改gai變bian後hou的de情qing況kuang。更geng換huan了le流liu動dong向xiang後hou在zai正zheng式shi進jin樣yang前qian可ke以yi進jin兩liang次ci標biao準zhun品pin以yi檢jian查zha保bao留liu時shi間jian的de穩wen定ding情qing況kuang和he色se譜pu峰feng的de穩wen定ding性xing。在zai梯ti度du洗xi脫tuo中zhong如ru果guo出chu現xian了le多duo餘yu的de峰feng,可ke以yi空kong載zai梯ti度du洗xi脫tuo一yi次ci,用yong此ci規gui則ze可ke以yi避bi免mian不bu必bi要yao的de改gai變bian,盡jin快kuai確que定ding糾jiu正zheng措cuo施shi。
(3)取代規則
用(yong)好(hao)的(de)部(bu)件(jian)換(huan)下(xia)可(ke)疑(yi)的(de)部(bu)件(jian),是(shi)查(zha)找(zhao)故(gu)障(zhang)的(de)最(zui)好(hao)方(fang)法(fa)。如(ru)果(guo)你(ni)懷(huai)疑(yi)檢(jian)測(ce)器(qi)引(yin)起(qi)了(le)噪(zao)音(yin),就(jiu)換(huan)一(yi)個(ge)性(xing)能(neng)好(hao)的(de)無(wu)轉(zhuan)子(zi)硫(liu)化(hua)儀(yi)檢(jian)測(ce)器(qi)。如(ru)果(guo)故(gu)障(zhang)被(bei)排(pai)除(chu)了(le),就(jiu)說(shuo)明(ming)換(huan)下(xia)的(de)檢(jian)測(ce)器(qi)有(you)問(wen)題(ti)。這(zhe)個(ge)規(gui)則(ze)應(ying)用(yong)的(de)規(gui)模(mo)有(you)大(da)有(you)小(xiao),可(ke)以(yi)從(cong)換(huan)整(zheng)個(ge)部(bu)件(jian)到(dao)換(huan)印(yin)刷(shua)線(xian)路(lu)板(ban)上(shang)的(de)集(ji)成(cheng)塊(kuai)。
(4)換回規則
這(zhe)個(ge)規(gui)則(ze)和(he)取(qu)代(dai)規(gui)則(ze)一(yi)起(qi)運(yun)用(yong),好(hao)部(bu)件(jian)取(qu)代(dai)了(le)溶(rong)體(ti)流(liu)動(dong)速(su)率(lv)測(ce)定(ding)儀(yi)可(ke)疑(yi)部(bu)件(jian)後(hou)情(qing)況(kuang)並(bing)未(wei)得(de)到(dao)改(gai)善(shan),應(ying)重(zhong)新(xin)換(huan)上(shang)原(yuan)部(bu)件(jian)。這(zhe)樣(yang)做(zuo)的(de)維(wei)修(xiu)費(fei)用(yong)最(zui)小(xiao),也(ye)防(fang)止(zhi)了(le)用(yong)過(guo)的(de)部(bu)件(jian)積(ji)壓(ya)下(xia)來(lai)無(wu)轉(zhuan)子(zi)硫(liu)化(hua)儀(yi)。這(zhe)條(tiao)規(gui)則(ze)僅(jin)適(shi)用(yong)於(yu)單(dan)一(yi)的(de)故(gu)障(zhang)。
換回原則不適用於以下的情況:
①在取下時新部件已損壞(如泵密封墊圈);
②部件價格低(如柱內襯過濾片);
③重新裝上原部件要冒損壞的風險;
④定期更換的部件。
22、液氮罐
液氮罐儲存液氮,可用於細菌、酵母、黴菌和大型真菌等各種微生物的長期保存。
23、接種針
用於接種和分離微生物。根據不同用途做成針狀、環狀、鉤狀、刀狀和鏟狀等。接種針由針頭和針柄兩部分組成。針頭由白金或鉻鎳合金(細電爐絲)製成,長約7厘米。針柄可用玻璃棒或鋁管製成,長約20厘米。將針頭燒結在針柄上即成。
24、酒精燈
用於接種時對接種工具進行滅菌。酒精燈火焰上部熱度最高,應利用這一最高溫度區燒灼接種針或試管口。
25、均質器
均jun質zhi器qi使shi樣yang品pin處chu理li過guo程cheng中zhong不bu可ke缺que少shao的de設she備bei。常chang用yong的de均jun質zhi器qi主zhu要yao是shi旋xuan轉zhuan均jun質zhi器qi和he拍pai擊ji式shi均jun質zhi器qi。旋xuan轉zhuan式shi均jun質zhi器qi是shi靠kao旋xuan轉zhuan的de刀dao片pian將jiang均jun質zhi杯bei中zhong的de樣yang品pin打da碎sui。缺que點dian是shi每mei次ci均jun質zhi都dou要yao更geng換huan刀dao片pian和he均jun質zhi杯bei,樣yang品pin易yi受shou到dao汙wu染ran,均jun質zhi過guo程cheng中zhong容rong易yi產chan生sheng熱re量liang使shi樣yang品pin中zhong的de微wei生sheng物wu受shou損sun。拍pai擊ji式shi均jun質zhi器qi使shi用yong無wu菌jun均質袋,拍(pai)擊(ji)的(de)機(ji)械(xie)裝(zhuang)置(zhi)作(zuo)用(yong)在(zai)均(jun)質(zhi)袋(dai)上(shang),不(bu)和(he)樣(yang)品(pin)直(zhi)接(jie)接(jie)觸(chu),因(yin)此(ci)不(bu)會(hui)受(shou)汙(wu)染(ran)。拍(pai)擊(ji)式(shi)均(jun)質(zhi)器(qi)由(you)於(yu)使(shi)用(yong)方(fang)便(bian),不(bu)易(yi)受(shou)汙(wu)染(ran),使(shi)用(yong)越(yue)來(lai)越(yue)廣(guang)泛(fan)。但(dan)其(qi)缺(que)點(dian)是(shi)均(jun)質(zhi)的(de)力(li)量(liang)不(bu)足(zu),對(dui)於(yu)堅(jian)硬(ying)的(de)樣(yang)品(pin)不(bu)但(dan)無(wu)法(fa)均(jun)質(zhi)均(jun)勻(yun),還(hai)會(hui)引(yin)起(qi)均(jun)質(zhi)袋(dai)的(de)破(po)損(sun)。
使用注意事項:
(1)使shi用yong前qian先xian將jiang電dian源yuan插cha頭tou固gu定ding牢lao靠kao後hou,再zai打da開kai機ji器qi開kai關guan。插cha頭tou不bu能neng使shi其qi出chu現xian鬆song動dong,因yin為wei機ji器qi工gong作zuo時shi會hui產chan生sheng振zhen動dong導dao致zhi插cha頭tou脫tuo落luo。這zhe種zhong突tu然ran短duan點dian對dui機ji器qi會hui造zao成cheng損sun傷shang。
(2)均質器工作時不準隨便打開均質器門,防止樣液飛濺(有的均質器打開門以後自動停止拍擊均質),一定要先關機器再開門,然後同樣關閉門之後再開機。
(3)使用均質器之前,一定要檢查均質器內是否有異物,防止損傷機械裝置或均質袋。
(4)jianyingyangpin,jinliangbuyaoyongpaidashijunzhiqi,fangzhijunzhidaipolie,lengdongyangpinxuhuanhuajiedongyihoucainengshiyongpaijishijunzhiqi。dangyidingyaopaidajianyingyangpinshi,zuihaojiataojunzhidai。
(5)均質器的底部是空的,如遇均質袋意外破裂時,方便清理溢出物。
(6)均質器和均質袋放置在陰涼幹燥處,特別是均質袋應避酸堿、避陽光,防止其過早的變脆老化。
(7)均質器用完之後,先關機斷電,然後將其內外清理幹淨。
(8)對於一些拍打均質後,容易堵塞移液管或移液器槍頭的樣品,建議使用帶過濾網的無菌均質袋。
26、常用玻璃器皿
①培養皿(平皿):用於盛放固體培養基,是培養微生物和觀察微生物的主要器皿。一般直徑為9厘米。可根據活動規模準備若幹個。
②試管:用於盛放斜麵培養基(固體),是接種微生物的主要器皿。常用的有兩種。較大的長220毫米,直徑20毫米;較小的長150毫米,直徑15毫米。可根據需要選用其中一種並準備若幹個。
③錐形瓶:用於盛放液體培養基。是用液體培養基培養微生物的主要器皿。一般容量為50、100、250、300、500、1000毫升。可根據活動需要選擇和準備。
④量筒、量杯:用於定量量取各種液體。
⑤移液管(吸管):一般容量為0.5、1、5、10毫升等,可根據需要選擇和準備。
⑥其它:燒杯、漏鬥等。注意事項:yishangjieshaodeshiweishengwushiyanshidejibenyiqipeizhi,zaizujianshiyanshishihaixuyaoqitayixiehaocai,lirushiguanjia,wujuncaiyangjichengyangdai,jiezhonghuan,sanjiaoping,liangtong,tuozhimian,shabu,shiguankuang,bolishiguan,miejunxiguan,liangganjia,jiandao,niezi,guolvqideng。
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