
生物安全櫃是一種在微生物學、生物醫學、基因重組、動物實驗、生物製品等領域的科研、教學、臨床檢驗和生產中廣泛使用的安全設備,也是實驗室生物安全中一級防護屏障中最基本的安全防護設備。
在2003年SARS暴發流行和高致病性禽流感發生後,特別是2003~2004年三起實驗室SARS?CoV感染事故的發生,使政府、廣大科研工作人員對生物危害有了較為深刻的認識。2004年,國家發布了國務院424號令《病原微生物實驗室過濾條例》和國家標準《實驗室——生物安全通用要求》GB19489—2004,明確指出生物安全櫃作為一種微生物實驗室的主要安全設備,對保護實驗室工作人員是必不可少的。規範化、標準化地使用生物安全櫃,能對人員、環境、受試樣品提供保護。已經研製的生物安全櫃分為三類:Ⅰ級櫃、Ⅱ級櫃和Ⅲ級櫃,它們能滿足各方麵的實驗和臨床需要。
生物安全櫃的功能、用途、結構、排氣係統和/或供氣係統(高效粒子空氣濾器),以及實驗室選擇生物安全櫃的基本原則、安裝原則和要求、實驗室操作程序、日常維護要求等內容。這些內容是實際使用和操作生物安全櫃時必須掌握的知識。
大多數實驗室工作人員對生物安全櫃的性能、選擇、操作和維護等方麵的知識非常缺乏,常常混淆生物安全櫃與超淨工作台這兩種設備。其實兩者之間是有本質區別的,生物安全櫃是一種負壓的淨化工作台,正確操作生物安全櫃,能夠完全保護工作人員、受試樣品並防止交叉汙染的發生;而超淨工作台隻是保護操作對象而不保護工作人員和實驗室環境的潔淨工作台。因此,在微生物學和生物醫學的科研、教學、臨床檢驗和生產中,應該選擇和使用生物安全櫃,而不能夠選擇和使用超淨工作台。
生物安全櫃設計、生產和檢測驗證中使用的各種術語和定義、分類、設計、結構和性能的基本要求、試驗方法、檢驗規則、標誌、標簽和說明書、包裝、運輸和貯存的要求、檢測驗證方法、檢測儀器的選擇和校準、產品出廠檢驗要求、現場檢驗要求等。
生物安全櫃的選擇生物安全櫃(Biological safety cabinets,BSCs)是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作者本人、實驗室環境以及實驗材料,使其避免暴露於上述操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。
WHO《實驗室生物安全手冊》提出,生物安全櫃可以有效減少由於氣溶膠暴露所造成的實驗室感染以及培養物交叉汙染。生物安全櫃同時也能保護工作環境。
事實上,生物安全櫃更側重於保護操作人員和環境,防止操作的病原微生物擴散造成人員傷害和環境汙染。
根據生物安全防護水平的差異,生物安全櫃可分為一級、二(er)級(ji)和(he)三(san)級(ji)三(san)種(zhong)類(lei)型(xing)。一(yi)級(ji)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)可(ke)保(bao)護(hu)工(gong)作(zuo)人(ren)員(yuan)和(he)環(huan)境(jing)而(er)不(bu)保(bao)護(hu)樣(yang)品(pin)。其(qi)氣(qi)流(liu)原(yuan)理(li)和(he)實(shi)驗(yan)室(shi)通(tong)風(feng)櫥(chu)基(ji)本(ben)相(xiang)同(tong),不(bu)同(tong)之(zhi)處(chu)在(zai)於(yu)排(pai)氣(qi)口(kou)安(an)裝(zhuang)有(you)HEPA 過(guo)濾(lv)器(qi),將(jiang)外(wai)排(pai)氣(qi)流(liu)過(guo)濾(lv)進(jin)而(er)防(fang)止(zhi)微(wei)生(sheng)物(wu)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)擴(kuo)散(san)造(zao)成(cheng)汙(wu)染(ran)。一(yi)級(ji)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)本(ben)身(shen)無(wu)風(feng)機(ji),依(yi)賴(lai)外(wai)接(jie)通(tong)風(feng)管(guan)中(zhong)的(de)風(feng)機(ji)帶(dai)動(dong)氣(qi)流(liu),由(you)於(yu)不(bu)能(neng)保(bao)護(hu)櫃(gui)內(nei)產(chan)品(pin),目(mu)前(qian)已(yi)較(jiao)少(shao)使(shi)用(yong)。
二級生物安全櫃是目前應用最為廣泛的櫃型。按照《中華人民共和國醫藥行業標準YY0569-2005生物安全櫃》中的規定,二級生物安全櫃依照入口氣流風速、排氣方式和循環方式可分為4 個級別:A1 型,A2 型,B1 型和B2 型。所有的二級生物安全櫃都可提供工作人員、環境和產品的保護。
A1 型安全櫃前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.38m/s。無內部循環氣流,100%的氣體通過排氣口過濾排出。
A2 型安全櫃前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA 過濾器再循環至工作區,30%的氣體通過排氣口過濾排出。
二級B型xing生sheng物wu安an全quan櫃gui均jun為wei連lian接jie排pai氣qi係xi統tong的de安an全quan櫃gui。連lian接jie安an全quan櫃gui排pai氣qi導dao管guan的de風feng機ji連lian接jie緊jin急ji供gong應ying電dian源yuan,目mu的de在zai斷duan電dian下xia仍reng可ke保bao持chi安an全quan櫃gui負fu壓ya,以yi免mian危wei險xian氣qi體ti泄xie漏lou入ru實shi驗yan室shi。其qi前qian窗chuang氣qi流liu速su度du最zui小xiao量liang或huo測ce量liang平ping均jun值zhi應ying至zhi少shao為wei0.5m/s(100fpm)。
B1 型70%氣體通過排氣口HEPA 過濾器排除,30%的氣體通過供氣口HEPA 過濾器再循環至工作區。
B2 型為100%全(quan)排(pai)型(xing)安(an)全(quan)櫃(gui),無(wu)內(nei)部(bu)循(xun)環(huan)氣(qi)流(liu),可(ke)同(tong)時(shi)提(ti)供(gong)生(sheng)物(wu)性(xing)和(he)化(hua)學(xue)性(xing)的(de)安(an)全(quan)控(kong)製(zhi),可(ke)以(yi)操(cao)作(zuo)揮(hui)發(fa)性(xing)化(hua)學(xue)品(pin)和(he)揮(hui)發(fa)性(xing)核(he)放(fang)射(she)物(wu)作(zuo)為(wei)添(tian)加(jia)劑(ji)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)實(shi)驗(yan)。
三級生物安全櫃是為生物安全防護等級為4級實驗室而設計的,櫃體完全氣密,工作人員通過連接在櫃體的手套進行操作,俗稱手套箱(Golve box),試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全櫃以確保不受汙染,適用於高風險的生物試驗,如進行SARS、埃博拉病毒相關實驗等。
根據生物安全櫃的強製性行業標準《中華人民共和國醫藥行業標準YY0569-2005生物安全櫃》規定,隻有獲得國家食品藥品監督管理局頒發的三類醫療器械注冊證的產品才能真正保護操作人員、實驗室環境和操作樣本。

超淨工作台(LAMINAR FLOW CABINET) (Clean Benches) ,為(wei)了(le)保(bao)護(hu)實(shi)驗(yan)材(cai)料(liao)而(er)設(she)計(ji)的(de),通(tong)過(guo)風(feng)機(ji)將(jiang)空(kong)氣(qi)吸(xi)入(ru)預(yu)過(guo)濾(lv)器(qi),經(jing)由(you)靜(jing)壓(ya)箱(xiang)進(jin)入(ru)高(gao)效(xiao)過(guo)濾(lv)器(qi)過(guo)濾(lv),將(jiang)過(guo)濾(lv)後(hou)的(de)空(kong)氣(qi)以(yi)垂(chui)直(zhi)或(huo)水(shui)平(ping)氣(qi)流(liu)的(de)狀(zhuang)態(tai)送(song)出(chu),使(shi)操(cao)作(zuo)區(qu)域(yu)達(da)到(dao)百(bai)級(ji)潔(jie)淨(jing)度(du),保(bao)證(zheng)生(sheng)產(chan)對(dui)環(huan)境(jing)潔(jie)淨(jing)度(du)的(de)要(yao)求(qiu)。
超淨工作台隻能保護樣品,不保護操作人員。
從潔淨級別看,生物安全櫃也比超淨工作台高級。
超淨台的優點是操作方便自如,比較舒適,工作效率高,預備時間短,開機10fenzhongyishangjikecaozuo,jibenshangkesuishishiyong。zaigongchanghuashengchanzhong,jiezhonggongzuolianghenda,xuyaojingchangchangjiudigongzuoshi,chaojingtaishihenlixiangdeshebei。chaojingtaiyousanxiangdianjizuogufengdongli,gonglv145~260W左右,將空氣通過由特製的微孔泡沫塑料片層疊合組成的“超級濾清器”後吹送出來,形成連續不斷的無塵無菌的超淨空氣層流,即所謂“高效的特殊空氣”,它除去了大於0.3μm的塵埃、真菌和細菌孢子等等。超淨空氣的流速為24~30m/min,這已足夠防止附近空氣可能襲擾而引起的汙染,這樣的流速也不會妨礙采用酒精燈、本生燈( Bunsen Burner)或huo電dian子zi火huo焰yan滅mie菌jun器qi對dui器qi械xie等deng的de灼zhuo燒shao消xiao毒du。工gong作zuo人ren員yuan就jiu在zai這zhe樣yang的de無wu菌jun條tiao件jian下xia操cao作zuo,保bao證zheng無wu菌jun材cai料liao在zai轉zhuan移yi接jie種zhong過guo程cheng中zhong不bu受shou汙wu染ran。但dan是shi萬wan一yi操cao作zuo中zhong途tu遇yu到dao停ting電dian,暴bao露lu在zai未wei過guo濾lv空kong氣qi中zhong的de材cai料liao便bian難nan以yi避bi免mian汙wu染ran。這zhe時shi應ying迅xun速su結jie束shu工gong作zuo,並bing在zai瓶ping上shang作zuo出chu記ji號hao,內nei中zhong的de材cai料liao如ru處chu於yu增zeng殖zhi階jie段duan,則ze以yi後hou不bu再zai用yong作zuo增zeng殖zhi而er轉zhuan入ru生sheng根gen培pei養yang。如ru為wei一yi般ban性xing生sheng產chan材cai料liao,因yin其qi極ji其qi豐feng富fu也ye可ke棄qi去qu。如ru處chu於yu生sheng根gen過guo程cheng,則ze可ke留liu待dai以yi後hou種zhong植zhi用yong。
超淨台電源多采用三相四線製,其中有一零線,連通機器外殼,應接牢在地線上,另外三線都是相線,工作電壓是380V。三線接入電路中有一定的順序,如線頭接錯了,風機會反轉,這時聲音正常或稍不正常,超淨台正麵無風?可用酒精燈火焰觀察動靜,不宜久試 ,應ying及ji時shi切qie斷duan電dian源yuan,隻zhi要yao將jiang其qi中zhong任ren何he兩liang相xiang的de線xian頭tou交jiao換huan一yi下xia位wei置zhi再zai接jie上shang,就jiu可ke解jie決jue。三san相xiang線xian如ru隻zhi接jie入ru兩liang相xiang,或huo三san相xiang中zhong有you一yi相xiang接jie觸chu不bu良liang,則ze機ji器qi聲sheng音yin很hen不bu正zheng常chang,應ying立li即ji切qie斷duan電dian源yuan仔zai細xi檢jian修xiu,否fou則ze會hui燒shao毀hui電dian機ji。這zhe些xie常chang識shi應ying在zai開kai始shi使shi用yong超chao淨jing台tai時shi就jiu向xiang工gong作zuo人ren員yuan講jiang解jie清qing楚chu,免mian除chu不bu應ying造zao成cheng的de事shi故gu與yu損sun失shi。
超淨台進風口在背麵或正麵的下方,金屬網罩內有一普通泡沫塑料片或無紡布,用以阻攔大顆粒塵埃,應常檢查、拆(chai)洗(xi),如(ru)發(fa)現(xian)泡(pao)沫(mo)塑(su)料(liao)老(lao)化(hua),要(yao)及(ji)時(shi)更(geng)換(huan)。除(chu)進(jin)風(feng)口(kou)以(yi)外(wai),如(ru)有(you)漏(lou)氣(qi)孔(kong)隙(xi),應(ying)當(dang)堵(du)嚴(yan),如(ru)貼(tie)膠(jiao)布(bu),塞(sai)棉(mian)花(hua),貼(tie)膠(jiao)水(shui)紙(zhi)等(deng)。工(gong)作(zuo)台(tai)正(zheng)麵(mian)的(de)金(jin)屬(shu)網(wang)罩(zhao)內(nei)是(shi)超(chao)級(ji)濾(lv)清(qing)器(qi),超(chao)級(ji)濾(lv)清(qing)器(qi)也(ye)可(ke)更(geng)換(huan),如(ru)因(yin)使(shi)用(yong)年(nian)久(jiu),塵(chen)粒(li)堵(du)塞(sai),風(feng)速(su)減(jian)小(xiao),不(bu)能(neng)保(bao)證(zheng)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)時(shi),則(ze)可(ke)換(huan)上(shang)新(xin)的(de)。
超chao淨jing台tai使shi用yong壽shou命ming的de長chang短duan與yu空kong氣qi的de潔jie淨jing程cheng度du有you關guan。在zai溫wen帶dai地di區qu超chao淨jing台tai可ke在zai一yi般ban實shi驗yan室shi使shi用yong,然ran而er在zai熱re帶dai或huo亞ya熱re帶dai地di區qu,由you於yu大da氣qi中zhong含han有you高gao量liang的de花hua粉fen,或huo多duo粉fen塵chen的de地di區qu,超chao淨jing台tai則ze宜yi放fang在zai較jiao好hao的de有you雙shuang道dao門men的de室shi內nei使shi用yong。任ren何he情qing況kuang下xia都dou不bu應ying將jiang超chao淨jing台tai的de進jin風feng罩zhao對dui著zhe開kai敞chang的de門men或huo窗chuang,以yi免mian影ying響xiang濾lv清qing器qi的de使shi用yong壽shou命ming。
無菌室應定期用70%酒精或0.5%苯酚噴霧降塵和消毒,用2%新潔爾滅抹拭台麵和用具?70%酒精也可 ,用福爾馬林?40%甲醛 加少量高錳酸鉀定期密閉熏蒸,配合紫外線滅菌燈?每次開啟15分鍾以上 等等消毒滅菌手段,以使無菌室經常保持高度的無菌狀態。接種箱內部也應裝有紫外線燈,使用前開燈15分fen鍾zhong以yi上shang照zhao射she滅mie菌jun,但dan凡fan是shi照zhao射she不bu到dao之zhi處chu仍reng是shi有you菌jun的de。在zai紫zi外wai線xian燈deng開kai啟qi時shi間jian較jiao長chang時shi,可ke激ji發fa空kong氣qi中zhong的de氧yang分fen子zi締di合he成cheng臭chou氧yang分fen子zi,這zhe種zhong氣qi體ti成cheng分fen有you很hen強qiang的de殺sha菌jun作zuo用yong,可ke以yi對dui紫zi外wai線xian沒mei有you直zhi接jie照zhao到dao的de角jiao落luo產chan生sheng滅mie菌jun效xiao果guo。由you於yu臭chou氧yang有you礙ai健jian康kang,在zai進jin入ru操cao作zuo之zhi前qian應ying先xian關guan掉diao紫zi外wai線xian燈deng,關guan後hou十shi多duo分fen鍾zhong即ji可ke入ru內nei。
在zai超chao淨jing工gong作zuo台tai上shang亦yi可ke吊diao裝zhuang紫zi外wai線xian燈deng,但dan應ying裝zhuang在zai照zhao明ming燈deng罩zhao之zhi外wai,並bing錯cuo開kai照zhao明ming燈deng平ping行xing排pai列lie,這zhe樣yang在zai工gong作zuo時shi不bu妨fang礙ai照zhao明ming。若ruo將jiang紫zi外wai線xian燈deng裝zhuang入ru照zhao明ming燈deng罩zhao?玻璃板 裏麵,這是毫無用處的,因為紫外線不能穿透玻璃,它的燈管是石英玻璃,而不是矽酸鹽玻璃製成的。
接jie種zhong室shi內nei力li求qiu簡jian潔jie,凡fan與yu本ben室shi工gong作zuo無wu直zhi接jie關guan係xi的de物wu品pin一yi律lv不bu能neng放fang入ru,以yi利li保bao持chi無wu菌jun狀zhuang態tai。接jie種zhong室shi內nei的de空kong氣qi與yu外wai界jie空kong氣qi應ying絕jue對dui隔ge絕jue,預yu留liu的de通tong氣qi孔kong道dao應ying盡jin量liang密mi閉bi。通tong氣qi孔kong道dao可ke設she上shang下xia氣qi窗chuang,氣qi窗chuang麵mian積ji宜yi稍shao大da,需xu覆fu上shang4層(ceng)紗(sha)布(bu)作(zuo)簡(jian)單(dan)濾(lv)塵(chen)。在(zai)一(yi)天(tian)工(gong)作(zuo)之(zhi)後(hou),可(ke)開(kai)窗(chuang)充(chong)分(fen)換(huan)氣(qi),然(ran)後(hou)再(zai)予(yu)以(yi)密(mi)閉(bi)。總(zong)之(zhi),既(ji)要(yao)清(qing)潔(jie)無(wu)塵(chen)無(wu)菌(jun),又(you)要(yao)空(kong)氣(qi)新(xin)鮮(xian),適(shi)宜(yi)工(gong)作(zuo)。覆(fu)在(zai)通(tong)氣(qi)窗(chuang)上(shang)的(de)紗(sha)布(bu)應(ying)經(jing)常(chang)換(huan)洗(xi)。但(dan)是(shi)上(shang)述(shu)種(zhong)種(zhong)措(cuo)施(shi)隻(zhi)是(shi)理(li)想(xiang)的(de)設(she)計(ji)方(fang)案(an),往(wang)往(wang)不(bu)易(yi)全(quan)麵(mian)做(zuo)到(dao),其(qi)實(shi)隻(zhi)要(yao)嚴(yan)格(ge)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)手(shou)續(xu),在(zai)門(men)窗(chuang)敞(chang)開(kai)的(de)室(shi)內(nei),有(you)超(chao)淨(jing)台(tai)的(de)保(bao)護(hu),接(jie)種(zhong)的(de)汙(wu)染(ran)率(lv)仍(reng)可(ke)控(kong)製(zhi)在(zai)生(sheng)產(chan)上(shang)可(ke)以(yi)容(rong)忍(ren)的(de)水(shui)平(ping)。
超淨工作台的使用管理
(1)每次使用超淨工作台時,實驗人員應先開啟超淨工作台上的紫外燈,紫外照射20分鍾後使用。
(2)開啟超淨工作台工作電源,關閉紫外燈,並用75%的酒精或0.5%過氧乙酸噴灑擦拭消毒工作台麵。
(3)整個實驗過程中,實驗人員應按照無菌操作規程操作。
(4)實驗結束後,用消毒液擦拭工作台麵,關閉工作電源,重新開啟紫外燈照射15分鍾。
(5)如遇機組發生故障,應立即通知動物實驗室,由專業人員檢修合格後繼續使用。
(6)實驗人員應注意保持室內整潔。
(7)超淨工作台的濾材每2年更換一次,並作好更換記錄。
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