1、合理分隔實驗室:將樣品的處理、配製PCR反應液、PCR循環擴增及PCR產物的鑒定等步驟分區或分室進行,特別注意樣本處理及產物的鑒定等步驟分區或分室進行,及PCR產物的鑒定應與其它步驟嚴格分開。
最好能劃分①標本處理區;②PCR反應液製備區;③PCR循環擴增區;④PCR產物鑒定區。其實驗用品及吸樣槍應專用,實驗前應將實驗室用紫外線消毒以破壞殘留的DNA或RNA。
2、吸樣槍:吸xi樣yang槍qiang汙wu染ran是shi一yi個ge值zhi得de注zhu意yi的de問wen題ti。由you於yu操cao作zuo時shi不bu慎shen將jiang樣yang品pin或huo模mo板ban核he酸suan吸xi入ru槍qiang內nei或huo粘zhan上shang槍qiang頭tou是shi一yi個ge嚴yan重zhong的de汙wu染ran源yuan,因yin而er加jia樣yang或huo吸xi取qu模mo板ban核he酸suan時shi要yao十shi分fen小xiao心xin,吸xi樣yang要yao慢man,吸xi樣yang時shi盡jin量liang一yi次ci性xing完wan成cheng,忌ji多duo次ci抽chou吸xi,以yi免mian交jiao叉cha汙wu染ran或huo產chan生sheng氣qi溶rong膠jiao汙wu染ran。
3、預混和分裝PCR試劑:所有的PCR試劑都應小量分裝,如有可能,PCR反應液應預先配製好,然後小量分裝,-20℃保存。以減少重複加樣次數,避免汙染機會。另外,PCR試劑,PCR反應液應與樣品及PCR產物分開保存,不應放於同一冰盒或同一冰箱。
4、防止操作人員汙染,使用一次性手套、吸頭、小離心管應一次性使用。5、設she立li適shi當dang的de陽yang性xing對dui照zhao和he陰yin性xing對dui照zhao,陽yang性xing對dui照zhao以yi能neng出chu現xian擴kuo增zeng條tiao帶dai的de最zui低di量liang的de標biao準zhun病bing原yuan體ti核he酸suan為wei宜yi,並bing注zhu意yi交jiao叉cha汙wu染ran的de可ke能neng性xing,每mei次ci反fan應ying都dou應ying有you一yi管guan不bu加jia模mo板ban的de試shi劑ji對dui照zhao及ji相xiang應ying不bu含han有you被bei擴kuo增zeng核he酸suan的de樣yang品pin作zuo陰yin性xing對dui照zhao。6、減少PCR循環次數,隻要PCR產物達到檢測水平就適可而止。7、選擇質量好的Eppendorfguan,yibimianyangbenwaiyijiwailaihesuandejinru,dakailixinguanqianyingxianlixin,jiangguanbijiguangaishangdeyetishuaizhiguandibu。kaiguandongzuoyaoqing,yifangguanneiyetijianchu。