手機版
微生物實驗室最少不了的實驗儀器之一就是滅菌器，一般實驗室常用的是高壓蒸汽滅菌器。GB 4789.1-2016中要求：實驗設備應定期進行檢查和/或檢定（加貼標誌）、weihuhebaoyang，yiquebaogongzuoxingnenghecaozuoanquan。dannidemiejunqiyoumeiyouleisidejianzhane？ruguoyaozuoleisideyanzheng，youxuyaozenmezuone？jintianjiugeidajiahuizongyixiagaoyazhengqimiejunqimiejunxiaoguoyanzhengdexiangguanneirong。
高壓蒸汽滅菌器滅菌效果驗證一般有化學指示劑法、留點溫度計法、zizhicewenguanfaheshengwuzhishijifa，meizhongfangfadeyuanlidoushixiangside，zhuyaoshitongguoyanzhengmiejunshimiejunqilidewendunengfoudadaoyaoqiu。womenkeyigenjuzijishiyanshidejutiqingkuangxuanzeqizhongyizhonghuoduozhongfangfajinxingyanzheng。
一、化學指示劑法原理：化學指示劑在一定溫度與作用時間下，會受熱變色或變形，根據這一特點來判斷是否達到需要的滅菌參數。一般實驗室常用的是3M壓ya力li滅mie菌jun指zhi示shi膠jiao帶dai，這zhe種zhong指zhi示shi膠jiao帶dai是shi利li用yong滅mie菌jun前qian後hou膠jiao帶dai顏yan色se變bian化hua來lai判pan斷duan滅mie菌jun效xiao果guo。它ta是shi由you熱re敏min化hua學xue物wu質zhi與yu顯xian色se劑ji及ji漆qi輔fu料liao製zhi成cheng油you墨mo，並bing將jiang油you墨mo以yi條tiao紋wen狀zhuang印yin製zhi在zai特te製zhi的de一yi麵mian膠jiao紙zhi帶dai製zhi成cheng。指zhi示shi膠jiao帶dai可ke以yi直zhi接jie粘zhan貼tie於yu包bao裹guo外wai，長chang度du不bu低di於yu5cm，並輕壓膠帶以增加粘性和封包效果；在121℃持續20min或130℃持續4min後，膠帶上印有的斜行的白色指示線條會完全變黑，成為黑色線條；如變色不均勻或不徹底，可認為該包裹不符合滅菌條件。
二、留點溫度計法原理：liudianwendujifashiliyongshuiyinwendujibuhuiliudetexing，qiyuanligenchuantongtiwenjixiangsi，keyizhishimiejunqizaimiejunguochengzhongdadaodezuigaowendu。yanzhengshibashuiyinwendujifangzaishengshuidedasanjiaopingli，miejunshibasanjiaopingfangzaimiejunqideshangbuhexiabu，miejunjieshuhoukanshuiyinwendujidewenduheyaoqiuwendushifouyizhi。cifazhinengyanzhengwendu，bunengzhishimiejunshijianshifoudadaoyaoqiu，yincishimiejunqiyanzhengdezuidibiaozhun。
三、自製測溫管法原理：利(li)用(yong)一(yi)些(xie)化(hua)學(xue)藥(yao)品(pin)受(shou)熱(re)熔(rong)化(hua)後(hou)再(zai)冷(leng)卻(que)，晶(jing)體(ti)的(de)外(wai)形(xing)不(bu)同(tong)的(de)特(te)性(xing)，把(ba)化(hua)學(xue)藥(yao)品(pin)密(mi)封(feng)在(zai)小(xiao)玻(bo)璃(li)管(guan)內(nei)，滅(mie)菌(jun)時(shi)放(fang)在(zai)滅(mie)菌(jun)器(qi)裏(li)，滅(mie)菌(jun)完(wan)後(hou)觀(guan)察(cha)晶(jing)體(ti)的(de)形(xing)狀(zhuang)，就(jiu)可(ke)以(yi)判(pan)斷(duan)溫(wen)度(du)是(shi)否(fou)達(da)標(biao)。常(chang)用(yong)的(de)試(shi)劑(ji)是(shi)苯(ben)甲(jia)酸(suan)，苯(ben)甲(jia)酸(suan)的(de)熔(rong)點(dian)為(wei)121-123℃，跟(gen)我(wo)們(men)要(yao)求(qiu)的(de)滅(mie)菌(jun)器(qi)的(de)滅(mie)菌(jun)溫(wen)度(du)基(ji)本(ben)吻(wen)合(he)，因(yin)此(ci)滅(mie)菌(jun)時(shi)把(ba)固(gu)體(ti)苯(ben)甲(jia)酸(suan)密(mi)封(feng)在(zai)小(xiao)玻(bo)璃(li)管(guan)內(nei)放(fang)進(jin)滅(mie)菌(jun)器(qi)，滅(mie)菌(jun)結(jie)束(shu)就(jiu)可(ke)以(yi)觀(guan)察(cha)苯(ben)甲(jia)酸(suan)的(de)狀(zhuang)態(tai)來(lai)驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)器(qi)是(shi)否(fou)達(da)到(dao)了(le)要(yao)求(qiu)溫(wen)度(du)。這(zhe)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)局(ju)限(xian)跟(gen)留(liu)點(dian)溫(wen)度(du)計(ji)法(fa)相(xiang)同(tong)，也(ye)隻(zhi)能(neng)指(zhi)示(shi)滅(mie)菌(jun)時(shi)的(de)溫(wen)度(du)，對(dui)滅(mie)菌(jun)時(shi)間(jian)是(shi)否(fou)達(da)到(dao)要(yao)求(qiu)無(wu)法(fa)判(pan)斷(duan)。
四、生物指示劑法原理：liyongfeizhibingxingdeshirezhifangganjundeyabaozuoweizhishijun，laicedingrelimiejundexiaoguo。shirezhifangganjundeyabaoduiredekangxingjiaoqiang，qinairenengliyubingyuanweishengwuroudusuojunyabaoxiangsi，yiciweizhishijun，yanzhengmiejunqinengfoudadaomiejunyaoqiu。shengwuzhishijifenweisanzhong：芽孢懸液、芽胞菌片、菌片和培養基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個點：下層的前、中、後和上層、中層的中央點。滅菌後取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白腖水中，55-60℃培養2-7天，若培養基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死，滅菌器滅菌效果良好；如ru果guo培pei養yang基ji黃huang色se渾hun濁zhuo，說shuo明ming芽ya孢bao未wei被bei殺sha滅mie，滅mie菌jun器qi滅mie菌jun效xiao果guo不bu合he格ge。芽ya孢bao懸xuan液ye和he芽ya孢bao菌jun片pian的de驗yan證zheng方fang法fa均jun是shi如ru此ci。目mu前qian實shi驗yan室shi還hai常chang用yong商shang品pin化hua的de生sheng物wu指zhi示shi管guan，其qi原yuan理li與yu芽ya孢bao懸xuan液ye和he芽ya胞bao菌jun片pian相xiang同tong，指zhi示shi管guan中zhong有you嗜shi熱re脂zhi肪fang芽ya孢bao杆gan菌jun芽ya孢bao和he培pei養yang液ye玻bo璃li小xiao管guan，將jiang指zhi示shi管guan放fang在zai滅mie菌jun容rong器qi內nei的de各ge個ge點dian上shang，高gao壓ya滅mie菌jun後hou，將jiang管guan中zhong盛sheng培pei養yang液ye的de玻bo璃li管guan擠ji碎sui，培pei養yang液ye從cong內nei部bu的de小xiao管guan中zhong被bei放fang出chu，放fang入ru56℃培養箱中培養，同時做陽性對照。若是滅菌器滅菌效果不合格，指示管內的芽孢複活後生長會改變肉湯的顏色是肉湯變為黃色；若ruo是shi滅mie菌jun器qi滅mie菌jun效xiao果guo良liang好hao則ze管guan內nei芽ya孢bao被bei滅mie活huo不bu再zai生sheng長chang，肉rou湯tang仍reng舊jiu是shi原yuan來lai的de紫zi色se。對dui於yu滅mie菌jun器qi的de效xiao果guo驗yan證zheng，目mu前qian並bing沒mei有you相xiang關guan標biao準zhun嚴yan格ge的de要yao求qiu驗yan證zheng的de頻pin次ci，但dan是shi實shi驗yan室shi應ying當dang自zi行xing製zhi定ding驗yan證zheng頻pin次ci規gui定ding，並bing嚴yan格ge按an照zhao要yao求qiu進jin行xing。從cong操cao作zuo性xing和he驗yan證zheng結jie論lun兩liang個ge方fang麵mian出chu發fa，小xiao編bian推tui薦jian使shi用yong指zhi示shi膠jiao帶dai和he生sheng物wu指zhi示shi管guan，因yin為wei這zhe兩liang種zhong方fang法fa操cao作zuo簡jian單dan，可ke以yi對dui滅mie菌jun效xiao果guo進jin行xing全quan麵mian的de驗yan證zheng。
附：滅菌時的注意事項（一些進口的全自動滅菌鍋可不用考慮排氣）使(shi)用(yong)高(gao)壓(ya)蒸(zheng)氣(qi)滅(mie)菌(jun)器(qi)時(shi)，首(shou)先(xian)應(ying)注(zhu)意(yi)在(zai)開(kai)放(fang)蒸(zheng)氣(qi)的(de)同(tong)時(shi)，排(pai)除(chu)滅(mie)菌(jun)器(qi)內(nei)的(de)冷(leng)空(kong)氣(qi)。必(bi)須(xu)將(jiang)器(qi)內(nei)冷(leng)空(kong)氣(qi)全(quan)部(bu)排(pai)除(chu)後(hou)，才(cai)可(ke)關(guan)閉(bi)排(pai)氣(qi)孔(kong)。假(jia)如(ru)滅(mie)菌(jun)器(qi)內(nei)仍(reng)存(cun)留(liu)有(you)部(bu)分(fen)空(kong)氣(qi)時(shi)，則(ze)壓(ya)力(li)表(biao)上(shang)雖(sui)已(yi)達(da)到(dao)了(le)某(mou)一(yi)壓(ya)力(li)值(zhi)，但(dan)器(qi)內(nei)之(zhi)溫(wen)度(du)仍(reng)未(wei)達(da)到(dao)相(xiang)應(ying)之(zhi)度(du)數(shu)。存(cun)留(liu)的(de)空(kong)氣(qi)越(yue)多(duo)，則(ze)二(er)者(zhe)相(xiang)差(cha)也(ye)越(yue)大(da)，器(qi)內(nei)溫(wen)度(du)不(bu)足(zu)，滅(mie)菌(jun)則(ze)不(bu)徹(che)底(di)。（很多人在做發酵法培養基滅菌時會出現小導管中有氣泡，不妨也可以嚐試多排出滅菌器內的冷空氣，有奇效哦）。
文章來源：網絡
