一、標準品的要求
1、化學結構：yuanzeshangbiaozhunpinyingyubeicewujuyouwanquanxiangtongdehuaxuejiegou，baokuoxiangtongdelitihuaxuejiegou。danzaishijigongzuozhong
，yonghuaxuejiegouwanquanxiangtongdewuzhizuobiaozhunpinshishifenkunnande。zheshiyouyuyifangmianlaiyuanyouxian
，lingyifangmianyouxiebeicewubenshendehuaxuejiegouhaibuqingchu，huoshiyoumingxiandeyixingxing。suoyiyoushiyeyongjiegouleisidewuzhizuobiaozhunpin。cishi，yingchongfenlejiezhexiewuzhiyuzhenzhengbiaozhunpinzhijiandedingliangguanxi。
2、化學純度：所suo有you通tong過guo化hua學xue合he成cheng法fa製zhi備bei的de小xiao分fen子zi化hua合he物wu，都dou應ying是shi高gao化hua學xue純chun度du的de純chun品pin。對dui某mou些xie蛋dan白bai類lei物wu質zhi
，則ze可ke能neng由you於yu純chun化hua的de方fang法fa不bu同tong而er有you差cha異yi。對dui此ci，在zai最zui初chu建jian立li該gai方fang法fa時shi
，應ying與yu國guo際ji上shang公gong認ren的de標biao準zhun參can考kao品pin或huo高gao純chun度du的de純chun品pin進jin行xing比bi對dui。
3、免疫純度：標biao記ji免mian疫yi分fen析xi是shi通tong過guo比bi較jiao被bei測ce物wu質zhi與yu標biao準zhun品pin的de免mian疫yi活huo性xing實shi現xian的de，故gu被bei測ce物wu質zhi與yu標biao準zhun品pin對dui所suo用yong抗kang體ti的de免mian疫yi活huo性xing應ying該gai完wan全quan一yi致zhi
，即ji兩liang者zhe對dui所suo用yong的de同tong一yi抗kang體ti有you完wan全quan相xiang同tong的de親qin和he力li。因yin此ci

，標biao準zhun品pin的de免mian疫yi純chun度du比bi其qi化hua學xue純chun度du更geng重zhong要yao。
4
、反應介質：免mian疫yi學xue反fan應ying受shou反fan應ying介jie質zhi和he溫wen度du等deng條tiao件jian的de影ying響xiang，所suo以yi理li論lun上shang要yao求qiu標biao準zhun品pin和he被bei測ce物wu應ying在zai完wan全quan相xiang同tong的de介jie質zhi中zhong進jin行xing反fan應ying。如ru測ce定ding血xue清qing中zhong某mou物wu質zhi的de濃nong度du
，其qi所suo用yong的de標biao準zhun品pin也ye應ying溶rong解jie在zai無wu被bei測ce物wu的de零ling值zhi血xue清qing中zhong；如(ru)測(ce)定(ding)尿(niao)液(ye)中(zhong)某(mou)物(wu)質(zhi)的(de)濃(nong)度(du)
，其(qi)所(suo)用(yong)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)也(ye)應(ying)溶(rong)解(jie)在(zai)無(wu)被(bei)測(ce)物(wu)的(de)尿(niao)液(ye)中(zhong)等(deng)。但(dan)在(zai)實(shi)際(ji)工(gong)作(zuo)中(zhong)這(zhe)一(yi)點(dian)很(hen)難(nan)做(zuo)到(dao)。因(yin)為(wei)，血(xue)清(qing)中(zhong)的(de)成(cheng)分(fen)十(shi)分(fen)複(fu)雜(za)，因(yin)而(er)無(wu)被(bei)測(ce)物(wu)的(de)零(ling)值(zhi)血(xue)清(qing)的(de)製(zhi)備(bei)非(fei)常(chang)困(kun)難(nan)
，而(er)且(qie)個(ge)體(ti)血(xue)清(qing)中(zhong)還(hai)可(ke)能(neng)存(cun)在(zai)一(yi)些(xie)幹(gan)擾(rao)物(wu)質(zhi)。理(li)想(xiang)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)應(ying)該(gai)用(yong)與(yu)被(bei)測(ce)樣(yang)品(pin)相(xiang)同(tong)的(de)基(ji)質(zhi)(如血清)，先將被測物質完全去除
，然後再加入已知量的被測物質的純品。
5、幹擾物質：標準品中不能有幹擾分析的物質。在作為標準品使用前，必須對那些從機體提取到的大分子物質活性進行測定。
6、標準品的批量：為(wei)保(bao)證(zheng)檢(jian)測(ce)的(de)連(lian)續(xu)可(ke)比(bi)性(xing)，每(mei)批(pi)標(biao)準(zhun)品(pin)應(ying)有(you)相(xiang)當(dang)大(da)的(de)量(liang)，以(yi)保(bao)證(zheng)在(zai)較(jiao)長(chang)的(de)時(shi)間(jian)內(nei)使(shi)用(yong)。每(mei)批(pi)標(biao)準(zhun)品(pin)如(ru)保(bao)存(cun)的(de)條(tiao)件(jian)適(shi)當(dang)，在(zai)相(xiang)當(dang)長(chang)的(de)時(shi)間(jian)內(nei)可(ke)保(bao)持(chi)其(qi)濃(nong)度(du)和(he)免(mian)疫(yi)活(huo)性(xing)的(de)穩(wen)定(ding)。這(zhe)對(dui)於(yu)生(sheng)產(chan)標(biao)記(ji)免(mian)疫(yi)分(fen)析(xi)試(shi)劑(ji)的(de)廠(chang)家(jia)尤(you)為(wei)重(zhong)要(yao)。
二、標準品的分級
所謂標準品在英語中有三個名詞，即標準品(standard)、校準品(calibrator)
、和參考品(reference)。這三個名詞的意義不完全相同，但在國內它們則經常被混淆。目前在我國的標記免疫分析實踐中，所謂的"標準品"實際上是指校準品。為使用方便先仍用"標準品一詞"。
有關標準品可分為如下的等級：
【國際參考品(international reference)】：國際參考品是由WHO指定的實驗室製備
，並與有關國家的一定機構聯係(在我國是衛生部藥品與生物製品檢定所)，被(bei)國(guo)際(ji)公(gong)認(ren)為(wei)最(zui)高(gao)級(ji)別(bie)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)。到(dao)目(mu)前(qian)為(wei)止(zhi)，與(yu)標(biao)記(ji)免(mian)疫(yi)分(fen)析(xi)有(you)關(guan)的(de)已(yi)達(da)數(shu)十(shi)種(zhong)。但(dan)由(you)於(yu)標(biao)記(ji)免(mian)疫(yi)分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)的(de)迅(xun)速(su)發(fa)展(zhan)，很(hen)多(duo)標(biao)記(ji)免(mian)疫(yi)分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)還(hai)沒(mei)有(you)國(guo)際(ji)參(can)考(kao)品(pin)。
【國家級標準品】：國家級標準品是由國家的有關權威機構，用高化學純和高免疫純、低(di)交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)的(de)純(chun)品(pin)製(zhi)備(bei)的(de)
，供(gong)國(guo)家(jia)內(nei)部(bu)使(shi)用(yong)。國(guo)家(jia)級(ji)標(biao)準(zhun)品(pin)應(ying)與(yu)國(guo)際(ji)參(can)考(kao)品(pin)或(huo)其(qi)他(ta)國(guo)家(jia)的(de)國(guo)家(jia)級(ji)標(biao)準(zhun)品(pin)進(jin)行(xing)比(bi)對(dui)。我(wo)國(guo)現(xian)已(yi)有(you)國(guo)家(jia)級(ji)標(biao)準(zhun)品(pin)數(shu)種(zhong)，如(ru)胰(yi)島(dao)素(su)(insulin)、絨毛膜促性腺素(hCG)
、三碘甲狀腺原氨酸(T3)
、甲狀腺素(T4)、肝膽酸(CG)、甲胎蛋白(AFP)等。
【實驗室標準】：實shi驗yan室shi標biao準zhun是shi由you實shi驗yan室shi自zi己ji，或huo由you生sheng產chan廠chang家jia製zhi備bei的de標biao準zhun品pin
，又you稱cheng二er級ji標biao準zhun品pin。所suo有you的de二er級ji標biao準zhun品pin都dou必bi須xu經jing過guo與yu國guo家jia標biao準zhun品pin或huo國guo際ji參can考kao品pin進jin行xing比bi對dui或huo校xiao正zheng。如ru沒mei有you國guo際ji參can考kao品pin或huo國guo家jia級ji標biao準zhun品pin的de，也ye應ying與yu國guo際ji公gong認ren的de生sheng產chan廠chang家jia的de標biao準zhun品pin進jin行xing比bi對dui。
三

、標準品的製備、鑒定、與計量
1、標準品的製備：標準品的製備是非常複雜的問題
，也是標記免疫分析中比較難於製備的一個成分。以下討論的是實驗室標準品(或商品化試劑中標準品)的製備。
（1）基質的製備：如前所述，作為標準品的介質(基質)成(cheng)分(fen)應(ying)與(yu)被(bei)測(ce)樣(yang)品(pin)相(xiang)同(tong)。對(dui)大(da)多(duo)數(shu)用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)血(xue)清(qing)中(zhong)某(mou)物(wu)質(zhi)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)，應(ying)用(yong)不(bu)含(han)被(bei)測(ce)物(wu)質(zhi)的(de)零(ling)血(xue)清(qing)製(zhi)備(bei)，以(yi)求(qiu)反(fan)應(ying)的(de)介(jie)質(zhi)環(huan)境(jing)相(xiang)當(dang)。但(dan)有(you)時(shi)零(ling)值(zhi)血(xue)清(qing)的(de)製(zhi)備(bei)十(shi)分(fen)困(kun)難(nan)
，所(suo)以(yi)有(you)些(xie)標(biao)準(zhun)品(pin)用(yong)適(shi)當(dang)的(de)緩(huan)衝(chong)液(ye)製(zhi)備(bei)
，並(bing)在(zai)緩(huan)衝(chong)液(ye)中(zhong)加(jia)入(ru)一(yi)定(ding)量(liang)的(de)載(zai)體(ti)蛋(dan)白(bai)(一般用1%～2%的牛血清白蛋白)
，以便使其與樣品的介質環境相近。
零值血清的製備方法有：
A、吸附法：血清中小分子物質如三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)等，可用活性炭吸附去除。這種方法簡便
，但待測物質難以清除幹淨，而且大分子活性物質不能用此法進行製備。
B、反複凍融法：對dui大da分fen子zi活huo性xing物wu質zhi可ke選xuan用yong低di值zhi血xue清qing，經jing反fan複fu凍dong融rong使shi被bei測ce物wu質zhi失shi活huo。用yong這zhe種zhong方fang法fa可ke使shi某mou些xie蛋dan白bai類lei激ji素su大da部bu分fen失shi活huo，但dan也ye難nan以yi得de到dao真zhen正zheng的de零ling值zhi血xue清qing。
C、親和層析法：用特異性抗體製備親和層析柱，用以吸附被測抗原。用這種方法可以得到高質量的零值血清，但本法比較複雜而且成本也高。
（2）標準物純品的選擇：應選擇高化學純和高免疫純的純品作標準品。其中免疫純尤為重要，在標準品中不應含有與被測物質有交叉反應的物質。
（3）標準品的製備：先xian用yong零ling值zhi血xue清qing配pei置zhi高gao濃nong度du的de標biao準zhun品pin
，然ran後hou根gen據ju實shi驗yan係xi統tong的de要yao求qiu，用yong零ling值zhi血xue清qing將jiang高gao值zhi血xue清qing稀xi釋shi至zhi應ying有you的de濃nong度du
，製zhi成cheng符fu合he預yu定ding要yao求qiu的de，由you不bu同tong濃nong度du組zu成cheng的de係xi列lie標biao準zhun品pin。
2、標準品的鑒定
（1）免疫活性的鑒定：選用高特異性的抗血清分別作公認標準品(如WHO的國際參考品或國家標準品)的(de)待(dai)鑒(jian)定(ding)標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)劑(ji)量(liang)反(fan)應(ying)曲(qu)線(xian)，並(bing)觀(guan)察(cha)兩(liang)條(tiao)曲(qu)線(xian)的(de)平(ping)行(xing)性(xing)。如(ru)兩(liang)條(tiao)劑(ji)量(liang)反(fan)應(ying)曲(qu)線(xian)平(ping)行(xing)，說(shuo)明(ming)兩(liang)種(zhong)物(wu)質(zhi)對(dui)同(tong)一(yi)抗(kang)體(ti)有(you)相(xiang)同(tong)的(de)親(qin)和(he)力(li)，即(ji)二(er)者(zhe)是(shi)同(tong)質(zhi)性(xing)物(wu)質(zhi)。如(ru)兩(liang)條(tiao)劑(ji)量(liang)反(fan)應(ying)曲(qu)線(xian)不(bu)平(ping)行(xing)，說(shuo)明(ming)兩(liang)種(zhong)物(wu)質(zhi)具(ju)有(you)異(yi)質(zhi)性(xing)，因(yin)而(er)這(zhe)一(yi)待(dai)鑒(jian)定(ding)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)是(shi)不(bu)能(neng)使(shi)用(yong)的(de)。
（2）濃度的標定：yongyijiandingguode，mianyihuoxinghegedebiaozhunpin
，yugongrendebiaozhunpinzuonongduxiangtongdejiliangfanyingquxian。cishi，liangtiaojiliangfanyingquxianyinggaishijibenzhonghede。ruguoliangzhepingxingdanbuzhonghe，zequliangtiaojiliangfanyingquxiande50%結合處的相應劑量( ED50 )計算二者的換算係數，然後調整待鑒定標準品的濃度
，直至使兩條劑量反應曲線完全或基本重合為止。
3、標準品的計量：許xu多duo小xiao分fen子zi抗kang原yuan或huo半ban抗kang原yuan已yi能neng得de到dao純chun品pin或huo進jin行xing合he成cheng
，它ta們men對dui作zuo為wei標biao準zhun品pin的de要yao求qiu可ke以yi得de到dao基ji本ben的de滿man足zu

，其qi計ji量liang多duo直zhi接jie用yong單dan位wei體ti積ji中zhong的de重zhong量liang表biao示shi，如rumg / ml
、ng / ml 、pg / ml等。最近WHO推薦用質量單位取代重量單位
，即mol / L、mmol / L
、或nmol / L等(deng)。對(dui)大(da)分(fen)子(zi)的(de)活(huo)性(xing)物(wu)質(zhi)則(ze)比(bi)較(jiao)複(fu)雜(za)。由(you)於(yu)得(de)不(bu)到(dao)絕(jue)對(dui)的(de)純(chun)品(pin)，故(gu)很(hen)難(nan)直(zhi)接(jie)用(yong)單(dan)位(wei)體(ti)積(ji)中(zhong)的(de)重(zhong)量(liang)或(huo)單(dan)位(wei)體(ti)積(ji)中(zhong)的(de)質(zhi)量(liang)計(ji)量(liang)。因(yin)此(ci)
，常(chang)用(yong)該(gai)物(wu)質(zhi)的(de)生(sheng)物(wu)活(huo)性(xing)單(dan)位(wei)表(biao)示(shi)，如(ru)IU / L、mIU / L等。
四、標準品的穩定性與保存
ruqiansuoshu，weibaozhengjiancedelianxukebixing，meipibiaozhunpinyingyouxiangdangdadeliang，yibaozhengnengzaijiaochangshijianneishiyong。yinci，meipibiaozhunpinyingzaishidangdetiaojianxiabaocun

，shiqimianyihuoxinghenongdubaochiwending。
1、影響標準品穩定的因素
（1）基質中的酶、細菌汙染、pH的變化、氧化、潮濕等因素都可以導致標準品的變性，而且這些變化可因高溫和光照加速。
（2）在保存過程中發生聚合反應等分子結構的變化，可使標準品失活。
（3）容器內壁的吸附作用和溶劑的蒸發可造成標準品濃度的改變。
（4）保存條件不適當也可以影響標準品的穩定性，如反複的凍融可降低標準品的免疫活性等。
2、標準品的保存方法
（1）冷凍幹燥法：lengdongganzaoduibiaozhunpindenongduhemianyihuoxingwumingxiandeyingxiang
，shimuqianzuichangyongdebaocunfangfa。lengdongganzaozhipinzaidiwenxia，kezaijiaochangdeshijianneibaochiwending。danyingyonglengdongganzaozhipinshi，furongtijidezhunquedushifenzhongyao。yinci，yaoyongjingguoxiaozhundeliangqizhunquedefurong，yijianshaobiaozhunpindenongduwucha。
（2）在標準品中加一定量的防腐劑可減少細菌汙染的影響。
（3）密閉真空保存或充入惰性氣體等方法也可以增加標準品的穩定性。 目前最常用的方法是：在標準品中加入少量的防腐劑(如0.1%疊氮鈉或0.1%硫柳汞)，冷leng凍dong幹gan燥zao後hou密mi封feng，並bing在zai低di溫wen下xia保bao存cun。但dan應ying注zhu意yi，一yi旦dan複fu溶rong後hou應ying放fang低di溫wen保bao存cun
，並bing不bu得de反fan複fu凍dong溶rong。複fu溶rong後hou的de標biao準zhun品pin其qi有you效xiao期qi明ming顯xian縮suo短duan
，一yi般ban不bu超chao過guo6～8周，有些物質可能更短。