當單色光通過厚度相同
，而濃度很小的溶液時，根據朗伯—比爾定律
，光被溶液吸收的程度，稱為吸收度，與溶液的濃度成正比，與溶液的厚度成正比

，即A=εCL，式中：A為吸收度，C為溶液的濃度，L為溶液的厚度，ε為消光係數。

由朗伯—比爾定律得，當一束單色光通過一溶液時，由於溶液吸收一部分光能，使光的強度減弱。若溶液的濃度（或厚度）不變，則溶液的厚度（濃度）愈大
，光線強度的減弱也愈明顯。

    用同樣的方法配製的標準溶液和待測溶液，其濃度分別為C1和C2，對同類溶液ε相同，當厚度也相同時則：
A1=εC1L
A2=εC2L
C2=（A2/A1）*C1
    式中A1,A2可由羅維朋比色計直接讀出

，C1為標準溶液的已知濃度

，據此可算出待測溶液的濃度。

朗伯—比爾定律

許多化學物質的溶液具有顏色（無色的化合物也可以加顯色劑經反應生成有色物質），dangyouserongyederongdugaibianshi
，yansedeshenqianyesuizhigaibian
，nongduyuda
，yanseyushen。yinci，keyiyongbijiaorongyeyanseshenqiandefangfalaicedingyouserongyedenongdu。zhezhongfangfajiaozuobisefenxifa。

一、 朗伯—比爾定律

dangyishudanseguangtongguoyouserongyeshi，rusheguangxiandeyibufenbeiqiminfanshehuilai，yibufenbeirongyexishou，lingyibufenzetouguorongye
，rutusuoshi。tamenzhijianyouyixiaguanxi：

Io=Ia+Ir+It      1-1
式中：Io—入射光強度
，Ia—吸收光強度，Ir—反射光強度，It—透過光強度

由(you)於(yu)在(zai)實(shi)際(ji)測(ce)定(ding)時(shi)，所(suo)用(yong)的(de)比(bi)色(se)皿(min)都(dou)是(shi)同(tong)質(zhi)料(liao)用(yong)規(gui)格(ge)的(de)。反(fan)射(she)光(guang)的(de)強(qiang)度(du)為(wei)一(yi)定(ding)值(zhi)，不(bu)會(hui)引(yin)起(qi)測(ce)量(liang)誤(wu)差(cha)
，所(suo)以(yi)反(fan)射(she)光(guang)的(de)影(ying)響(xiang)可(ke)以(yi)不(bu)加(jia)考(kao)慮(lv)。則(ze)上(shang)式(shi)可(ke)簡(jian)化(hua)為(wei)：
Io=Ia+It        1-2
從式1-2可知：當入射光強度Io為一定時
，被吸收光強度Ia愈大，則透過光強度It愈小。也就是說：光強度的減弱僅與有色溶液對光線的吸收有關。

那麼，溶液對光線的吸收與哪些因素有關呢
？實驗證明：溶液的濃度C愈大，液層厚度L愈厚（即光線在溶液中所經過的路程愈長）
，則溶液對光線吸收的愈多。它們之間的關係有下式決定：
lg = KCL      1-3
這個公式就是朗伯—比爾（Lambert---Beer）定律。

公式中的K稱為吸光係數
，它表示有色溶液在單位濃度和單位厚度時的吸光度。在入射光的波長
、溶液種類和溫度一定的條件下
，K為定值。吸光係數是有色化合物的重要特性之一
，在比色分析中有著重要的意義。K值愈大，表示該物質對光的吸收能力愈強，濃度改變時引起吸光度的改變愈顯著，因此比色測定時靈敏度愈高。

朗伯-比(bi)爾(er)定(ding)律(lv)即(ji)有(you)色(se)溶(rong)液(ye)對(dui)一(yi)定(ding)強(qiang)度(du)光(guang)的(de)吸(xi)收(shou)程(cheng)度(du)，與(yu)液(ye)層(ceng)厚(hou)度(du)和(he)溶(rong)液(ye)中(zhong)有(you)色(se)物(wu)質(zhi)濃(nong)度(du)的(de)乘(cheng)積(ji)成(cheng)正(zheng)比(bi)。其(qi)中(zhong)朗(lang)伯(bo)定(ding)律(lv)說(shuo)明(ming)吸(xi)收(shou)光(guang)與(yu)厚(hou)度(du)間(jian)的(de)關(guan)係(xi)；比爾定律說明吸收光與濃度間的關係。

朗伯—比爾定律在光電比色計中的應用

假定有兩種有色溶液，其中一種是已知濃度的標準溶液，另一種是待測溶液。根據公式：
在標準溶液中：As=KsCsLs 1-4
在待測溶液中：Ax=kxCxLx 1-5
將式1-4除以式1-5可得：
= 1-6

如果上述兩種溶液的液層厚度相等、溫度相同而且是同一種物質的兩種不同濃度的溶液，測定時所選用的單色光的波長亦相同，則有：
Ls=Lx
、Ks=Kx ，代入式1-6可得：
= 1-7

youcikejian，zaishangshutiaojianxia，xiguangduyunongduchengzhengbi。zheyiguanxishijiushiguangdianbisejideshejiyiju，yeshibisefenxidejibenjisuangongshizhiyi。shizhongbiaozhunrongyedenongduCs為已知，As和Ax可用光電比色計測量出來
，則待測溶液的濃度Cx即可求出：
Cx = × Cs 1-8

由於在實際測定時，標準溶液和待測溶液都要加以稀釋，而且在報告結果時，多以100毫升（或1000毫升）中的含量來表示。因此，在實際計算時
，就需要在上式中乘上稀釋因數。

求待測溶液濃度的方法有：直接比較法（計算法）、因數法和標準曲線法三種。這些方法在“生物化學及生物化學檢驗技術”課程中有介紹。

波長的選擇：
由(you)於(yu)有(you)色(se)溶(rong)液(ye)對(dui)光(guang)的(de)吸(xi)收(shou)具(ju)有(you)選(xuan)擇(ze)性(xing)
，因(yin)此(ci)進(jin)行(xing)比(bi)色(se)測(ce)定(ding)時(shi)，濾(lv)光(guang)片(pian)必(bi)須(xu)加(jia)以(yi)選(xuan)擇(ze)，否(fou)則(ze)靈(ling)敏(min)度(du)很(hen)低(di)

，導(dao)致(zhi)測(ce)量(liang)結(jie)果(guo)不(bu)準(zhun)確(que)。選(xuan)擇(ze)濾(lv)光(guang)的(de)一(yi)般(ban)原(yuan)則(ze)是(shi)：濾光片最大透過的光線應該是溶液最大吸收的光線。從顏色上看，濾光片的顏色與待測溶液的顏色應為“互補色”。

什麼叫做互補色呢
？凡是兩種顏色相加後能得到白色，則此兩種顏色就稱為“互補色”，圖中直接相對的兩種顏色，均為互補色。

weishenmexuanzelvguangpianshi
，yaoshilvguangpiandeyanseyudaicerongyedeyanseweihubusene？zheshiyinweilvguangpianheyouserongyejuyouxiangsidetouguangtexing
，yutamenbenshenyansexiangtongdeseguang，nenggouzuidaxianduditouguo。eryutamenbenshenyansechenghubudeseguangdounengbeizuidadixishou。