(一)、浸泡
新瓶使用前應先用自來水簡單刷洗,然後用稀鹽酸溶液(5%)浸泡過夜;培養後的玻璃器皿用後要立即浸入清水中;注意:讓水能完全進入瓶皿中,不應留有氣泡。
(二)、刷洗
浸泡後的玻璃器皿用毛刷沾洗滌劑洗滌(宜選用軟毛刷和優質的洗滌劑,如高級洗衣粉或洗潔精),絕對不能使用含沙粒的去汙粉!洗刷時特別注意洗刷瓶角部位。
(三)、浸泡
器皿要充滿清潔液,勿留氣泡。浸泡時間不應少於6小時;一般應浸泡過夜。
清洗液配方:
【強液】 重鉻酸鉀 63g
濃硫酸 1000ml
蒸餾水 200L
【次強液】 重鉻酸鉀 120g
濃硫酸 200ml
蒸餾水 1000ml
【弱液】 重鉻酸鉀 100g
濃硫酸 100ml
蒸餾水 100ml
矽酸鈉洗液;
使用比較安全,可以代替清洗液,但價格較貴。
先配製成100Χ貯存液:矽酸鉀80g,偏磷酸鈉9g,加熱溶解在1000ml蒸餾水中。使用時,用蒸餾水100倍稀釋。
(四)、衝洗
shuaxihejinsuanhoudoubixuyongshuichongfenchongxi,shizhibuliurenhecanji。chongxiyiyongxidizhuangzhi,yibaozhengchongxixiaoguo,ruyongshougongcaozuo,meipingdoudeyongshuiguanman,daodiao,zhongfushiciyishang,zuihouzaiyongzhengliushuipiaoxi2~3次,涼幹備用。
二、膠塞的清洗
新購置的膠塞先用自來水衝洗幹淨後,再做常規處理。
常規洗滌方法:
浸泡
↓
2%NaOH煮沸(10~20分鍾)
↓
自來水衝洗
↓
1%稀鹽酸浸泡(30分鍾)
↓
自來水衝洗
↓
蒸餾水清洗(2~3次)
↓
涼幹備用
三、塑料器皿的清洗
目(mu)前(qian)我(wo)國(guo)培(pei)養(yang)使(shi)用(yong)的(de)塑(su)料(liao)器(qi)皿(min)主(zhu)要(yao)是(shi)從(cong)國(guo)外(wai)購(gou)置(zhi)的(de),是(shi)一(yi)種(zhong)無(wu)毒(du)並(bing)已(yi)經(jing)消(xiao)毒(du)過(guo)滅(mie)菌(jun)密(mi)封(feng)包(bao)裝(zhuang)的(de)商(shang)品(pin)。用(yong)時(shi),隻(zhi)要(yao)打(da)開(kai)包(bao)裝(zhuang)即(ji)可(ke),是(shi)一(yi)次(ci)使(shi)用(yong)性(xing)物(wu)品(pin)。必(bi)要(yao)時(shi),用(yong)後(hou)經(jing)無(wu)菌(jun)處(chu)理(li)後(hou) ,尚可反複使用2~3次ci,但dan不bu宜yi過guo多duo。再zai用yong時shi仍reng然ran需xu要yao清qing洗xi和he滅mie菌jun處chu理li。塑su料liao器qi皿min質zhi地di軟ruan,不bu宜yi用yong毛mao刷shua刷shua洗xi,造zao成cheng清qing洗xi困kun難nan。為wei此ci使shi用yong中zhong一yi是shi防fang止zhi劃hua痕hen,二er是shi用yong後hou要yao立li即ji浸jin入ru水shui中zhong,嚴yan防fang附fu著zhe物wu幹gan結jie;如殘留有附著物,可用脫脂棉清拭掉,用流水衝洗幹淨,涼幹、再用2%NaOH液浸泡過夜,用自來水充分衝洗,然後 用5%鹽酸溶液浸泡30分鍾,最後用自來水衝洗和蒸餾水漂洗幹淨,涼幹後備用。
消 毒
一、紫外線消毒
紫外線直接照射法很方便,效果好,是目前各實驗室常用的消毒法。
【適用範圍】空氣、操作台表麵和一些不能使用其它方法進行消毒的培養器皿(如塑料培養皿、培養板等)
【要求】(1)培養室的紫外線燈應距地麵2.5米,使每平方厘米有0.06微瓦能量的照射,才能發生有效的消毒作用。(2)由於各種細菌對紫外線的敏感性不同,所用照射時間和劑量也不同。
【缺點】(1)產生臭氧,汙染空氣,對身體有害;(2)射線照射不到的部位起不到消毒作用,故消毒時,物品不宜相互遮擋。
【注意】 有人習慣於邊照射邊進行實驗操作,這樣不好,一是紫外線對細胞、試劑和培養液都有不良影響,二是對人體皮膚也有傷害。
二、濕熱消毒
濕熱消毒即高壓蒸汽消毒,是最有效的一種方法。
【適用範圍】布類、膠塞、金屬器械、玻璃器皿及某些培養用液。
【要求】
培養用液、橡膠製品 10磅10分鍾
布類、玻璃製品、金屬器械等 15磅20分鍾
三、濾過消毒
【適用範圍】 大多數培養用液,如人工合成培養液、血清、酶溶液等(這些在高溫下會發生變性,失去其功能,必須采用濾過法除菌。
【常用濾器】 Zeiss濾器、微孔濾膜濾器及各種不同規格的一次性濾器。常用孔徑0.22um濾膜過濾一般用液即可。
【注意】
(1)濾膜用後丟棄,濾器清洗也比較方便,先用毛刷蘸洗滌劑刷洗幹淨,用自來水衝洗後,再用蒸餾水衝洗,涼幹即可;
(2)用前再裝上一張新的濾膜;
(3)消毒時旋鈕不要扭太緊,凡與空氣接觸部位都用紙包裝好,以保證消毒時的效果;
(4)消毒後,在無菌環境中立即將旋鈕扭緊;
(5)濾lv過guo少shao量liang液ye體ti時shi,用yong一yi種zhong能neng安an裝zhuang在zai注zhu射she器qi上shang的de小xiao濾lv器qi,使shi用yong相xiang同tong的de濾lv膜mo,濾lv過guo時shi把ba濾lv過guo物wu裝zhuang入ru注zhu射she器qi針zhen管guan內nei,壓ya出chu過guo濾lv物wu注zhu入ru無wu菌jun容rong器qi中zhong即ji。
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