常(chang)規(gui)製(zhi)種(zhong),其(qi)設(she)備(bei)昂(ang)員(yuan),條(tiao)件(jian)要(yao)求(qiu)嚴(yan)格(ge),技(ji)術(shu)也(ye)複(fu)雜(za),菌(jun)種(zhong)成(cheng)本(ben)高(gao)。建(jian)一(yi)個(ge)菌(jun)種(zhong)廠(chang),設(she)備(bei)投(tou)資(zi)少(shao)則(ze)上(shang)千(qian)元(yuan),多(duo)則(ze)幾(ji)萬(wan)元(yuan)。簡(jian)易(yi)製(zhi)種(zhong)技(ji)術(shu),就(jiu)是(shi)不(bu)需(xu)要(yao)專(zhuan)門(men)設(she)備(bei),利(li)用(yong)家(jia)裏(li)現(xian)有(you)條(tiao)件(jian)就(jiu)可(ke)製(zhi)種(zhong)。
(一)蒸汽接種法
準備:先把接種操作室打掃幹淨,保持潮濕清潔。準備水壺或鋁鍋1隻,煤球爐或電爐1隻,接種台1張,接種針或大鑷子一把。蒸料滅菌桶:用鐵皮做成比鋁鍋口徑小一點的圓桶,桶底放鐵篩架,桶內裝菌袋、瓶。上邊口用塑料紙或木蓋封口。
操作:jiangmeiqiuluhuodianlufangzaicaozuotaipang,zaijiangshuihuhuolvguofangzailuzishangmian,guoneizhuangshiliangdeshui,jiezhonggongjuxianfangzaiguoneizhufeixiaodu。jiezhongshi,guanhaomenchuang,xijingshuangshou,daishangkouzhao。jiangjunzhongkuaizhijietongguozhengqifangruzaipeizhongdepeiyangliaoshang。zaizhengqishangjiezhong,jishufuyoufangbian,qiejiezhongzhiliangkekao。yinweizhengqizaishangmaodeguochengzhongchanshengyiguchongli,bashuihuhuoguoshangdekongqipaikai,zhengqibuduanchansheng,jiuxingchengguoshangyipianwujunqu。youyujunzhongdedaozhengqideshirun,bizaijiujingdengshangjiedezhonghuifudegengkuai,wuranyeshao。lingwaizhengqijiezhongbushiyonghuaxueyaopin,kebimianzaijiezhongshiyaopinduirutideduhai。
(二)代替瓊脂培養基
1.綠豆粉培養基:將新鮮、幹燥、不黴變的豆粉隊放入鍋內煮沸調團狀,裝入試管或三角瓶內,塞好棉塞,用 牛皮紙或報紙包紮好試管上部,成捆放於高壓鍋內,用12公斤/厘米2壓力滅菌半小時,然後慢慢放汽,取出試管凝固成斜麵即成。
2.麥粒種:將小麥粒用溫水浸泡2小時,撈出放入竹篩內,4個小時燒一次清水,約24小時左右,麥粒就萌發 小芽約1厘米。這時再放火鍋內煮沸半小時,取出用涼水冷卻後,加入石膏、幹馬糞使之成散粒,然後分裝試管、三角瓶、蘑菇瓶、雜酒瓶,裝量按常規。塞好棉塞進行滅菌,15磅壓力滅菌1小時。然後接種。 采用此法可節約大量瓊脂。化學藥品。
(三)於實體組織分離簡易方法
在無菌環境中,直接切取菇體未形成孢子組織塊,進行 培養即稱簡易分離技術。
方法:在第一批菇中,選取具有該品種特性的、發育正常、菌蓋肥厚、朵大、無(wu)病(bing)蟲(chong)害(hai)的(de)子(zi)實(shi)體(ti)作(zuo)種(zhong)菇(gu)。在(zai)蒸(zheng)汽(qi)上(shang)用(yong)手(shou)把(ba)子(zi)實(shi)體(ti)一(yi)分(fen)為(wei)二(er),用(yong)消(xiao)毒(du)過(guo)的(de)小(xiao)刀(dao)在(zai)萌(meng)蓋(gai)和(he)菌(jun)柄(bing)交(jiao)界(jie)處(chu)切(qie)取(qu)一(yi)小(xiao)塊(kuai)菌(jun)肉(rou),移(yi)放(fang)在(zai)斜(xie)麵(mian)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)央(yang)。分(fen)離(li)完(wan)後(hou)標(biao)上(shang)菌(jun)種(zhong)導(dao)和(he)分(fen)離(li)時(shi)間(jian),然(ran)後(hou)培(pei)養(yang)。
還可將於實體菌柄與菌蓋交界處的菌肉,挑一塊直接放 入滅過菌的原種瓶,培養即可。這種菌種也可直接用於栽培或擴接。
(四)以菇種菇的方法
以菇種菇,就是將子實體直接當菌種栽培。方法是:把培養料按常規栽培要求拌勻後,壓塊,在料塊表麵放些子實體(子實體要幹淨無汙染),子實體上撒一層培養料,蓋上塑料紙即可。注意子實體放入後,不能重壓。在20℃以下的低溫培養。
(五)"U"型音提純菌種
常規提純銀耳伴生菌――香灰菌絲,用試管培養基反複提純,手續繁多且不易提純,我們采用玻璃"口"型管提純香灰菌絲,不用瓊脂培養基,就可得到純的香灰菌絲,其方法:取1―2厘米口徑的玻璃"U"型管數支,裝上木屑培養基,兩端用塑料紙包紮嚴(耐高壓塑料紙),滅菌後,在接種箱內,用接種針挑香灰菌絲前端白色處一點,接於"U"管一端,經培養,菌絲長至另一端後,及時挑取一點放入又一"U"型管內,這樣反複進行提純,可獲得純菌絲。
(六)幾種簡易母種培養基的製作
1.缺少土豆時可用米湯或小麥煮水代替
(1)米湯培養基
煮米飯時在鍋中多加些水;將米湯濾在沒有油汙的幹淨容器內,取1000毫升,倒在小鍋中,加熱煮沸,加入瓊脂20克,攪拌使之溶化,再加入葡萄糖(如無葡萄糖,加白糖亦可)20克,蛋白腖5克(沒有可不加),維生素B1片(10毫克),待藥物全部溶解後,趁熱倒入漏鬥內,分裝試管,裝量為試管長度的 1/4,經 15磅壓力滅菌30分鍾,取出;擺成斜麵。平菇菌絲在米湯培養基上的生長速度比在PDA培養基上快1倍左右。
(2)小麥汁培養基
取小麥5斤;淘洗幹淨,置鍋中,加水煮沸,煮至小麥膨脹而不裂開,中間無白心為度,過濾後取澄清液1000毫升(不足量可加清水補充),在濾液中加入瓊脂20克,葡萄糖或白糖20克,製備方法同米湯培養基,過濾後的小麥粒加入0.5%碳酸粉和1.5%的石膏粉,可用於製作原種培養基,在小麥汁培養基上先後接種平菇、鳳尾菇、香菇、木耳、金針菇,其長勢均比在PDA培養基強。
2.缺少瓊脂時可用玉米粒或米飯作培養基
(l)玉米粒培養基
將玉米顆粒用冷水泡脹,衝成綠豆粒大小碎塊或將嫩玉米粒切碎,裝入試管,裝量為試管的 1/3~1/2,用竹筷稍壓緊,然後塞上棉塞,置高壓鍋內,15磅壓力滅菌45分鍾,取出冷卻後即可作為組織分離或轉接菌種的培養基,將組織塊或菌絲接入其中,25℃左右下培養,7~10天菌絲長滿,菌絲體潔白濃密,擴接成原種,長勢亦好。
(2)米飯培養基
將已濾去米湯即將入瓶的米飯分裝入試管內,稍稍壓緊,使米粒成形,塞上棉塞。滅菌、接種,培養同玉米粒培養基。
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