利用超靈敏UPLC®-MS/MS對肌肉組織中的低濃度保泰鬆進行快速檢測和定量。

 

jinlaitiaozhajieguoxianshi，zaiouzhoudeniurouzhipinzhongfaxianweijingshenbaodemarou
，zheyishijiandefashengpoqieyaoqiuxiangguanqiyehejianguanjigouduirouleiherouzhipinzhongcunzaidemarouzuzhihecanliudefeizaitikangyanyao（NSAID）保泰鬆（PBZ）進行分析檢測。保泰鬆是一種獸藥，在一些歐盟成員國
，這種藥用於為非食品用途的動物（狗和馬）緩huan解jie疼teng痛tong和he減jian輕qing炎yan症zheng。但dan是shi，這zhe種zhong藥yao物wu被bei規gui定ding不bu得de用yong於yu治zhi療liao參can與yu人ren類lei食shi物wu鏈lian的de動dong物wu。因yin此ci，任ren何he動dong物wu源yuan性xing食shi品pin中zhong存cun在zai此ci物wu質zhi通tong常chang是shi由you於yu非fei法fa使shi用yong經jing過guo治zhi療liao的de馬ma屍shi體ti所suo導dao致zhi的de。

 

 

本研究引用了一種已報道的從肌肉組織中提取保泰鬆的方法1，並對該方法做了較小調整。簡單來講

，即取肉勻漿2 g，加入乙腈10 mL，振搖2 min。離心後，收集上清液並用水進行稀釋。使用沃特世（Waters®） Oasis®HLB 60 mg，將第一步所得的稀釋提取物進行固相萃取(SPE)。用甲醇洗脫保泰鬆
，然後用含10 mM甲酸銨(pH 3.2)的水進行稀釋。在進行固相提取及上樣之前
，對提取物分別進行稀釋
，這樣，無需進行蒸發和複溶操作。取100μL稀釋上樣液
，注入LC-MS/MS係統進行分析。

 

選擇並優化了兩個多重反應監測（MRM）離子對（定量和確證）對保泰鬆進行分析。所得結果已添加到QuanpediaTM數據庫以便將來使用。在本應用中，色譜分析采用2.1×100 mm HSS T3分析型色譜柱(1.7μm)，以甲醇/水（10mM甲酸銨
，pH 3.2)進行梯度洗脫，梯度時間為5 min。圖1顯示了200 ng/kg保泰鬆加標提取物的MRM色譜圖。如圖1所示
，保泰鬆和內標（100 ng/kg）的信噪比高，峰形良好。校正回收率後的工作標準曲線如圖2所示，製備基質加標樣品兩份，並進行提取，建立六點校準曲線。根據線性回歸，計算校準曲線（1/x2加權），以保泰鬆-二苯基13C12作為內標。由結果數據可知，可輕鬆達到最低校準點(10 ng/kg)，比歐盟建議的濃度（RC)5μg/kg低500倍。在整個檢測濃度範圍內（10-500ng/kg），線性良好（R2 0.997）。在處理肉製品的過程中，馬肉可能以其它途徑摻入其中，保泰鬆濃度水平可能遠低於EU RC，因此檢測靈敏度是一個重要的考慮因素。

 

ACQUITY UPLC®I-Class係統與Xevo®TQ-S聯用，並結合Waters ACQUITY UPLC HSS T3色譜柱可對肉中濃度低至10 ng/ kg的保泰鬆進行分析。即使對於濃度可能很低的經混合和經處理的肉製品，這種超靈敏的UPLC-MS/MS技術仍能確保成功檢出受汙染產品。

 

1. N. Van Hoof, K. De Wasch, S. Poelmans, H. Noppe and H. De Brabander Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004; 18: 2823–2829