ATP是化學物質三磷酸腺苷的簡稱
，存在於所有的生物體中（從微生物到高等動物）
，ATP在細胞體內主要作用是提供能量。鑒於ATP存在於所有生物體中，利用ATP發光檢測儀檢測ATP
，可以間接地證明生物體的存在。隨著食品行業對食品衛生質量要求越來越高，而且ATP生物發光法在檢測食品微生物時簡單、快速且靈敏度高
，因此近年來受到廣泛關注。
 

ATP生物發光技術產生於20世紀70年代中期。1983年，Moyer等最早提出細胞內源性ATP的含量可以反映細胞的活性和活細胞的數量。同年Gronroos等也證實該技術是一種可靠


、靈敏度高的確定細胞活性度的檢測方法。20世紀80年代，英國人首先研製出ATP檢測儀檢測係統，隨後發展到歐洲
、美國和日本。應用範圍涉及食品加工、超市和飲食行業
，檢測內容包括微生物和食品殘渣。1998年
，日本國會頒布了《關於食品製造過程管理高度化臨時措施法》
，其中即包含了應用ATP檢測儀檢測係統的內容。1999年，日本還成立了ATP塗抹檢查研究會，專門研究該方法的使用效率和應用領域

，其內容之一就是在食品衛生監測領域中
，解決現場微生物的檢測問題。20世紀末，一些ATP檢jian測ce儀yi檢jian測ce係xi統tong及ji技ji術shu被bei引yin進jin我wo國guo，到dao目mu前qian為wei止zhi
，除chu個ge別bie省sheng級ji衛wei生sheng監jian督du檢jian測ce單dan位wei裝zhuang備bei外wai，主zhu要yao是shi在zai一yi些xie外wai資zi或huo合he資zi企qi業ye中zhong自zi行xing檢jian測ce使shi用yong。2002年，我國衛生部頒發了食品加工企業HACCP實施指南，鼓勵食品加工企業引入ATP檢測係統。近年來，蟲熒光素酶已通過基因工程生產
，價格大幅度降低，隨著相關儀器的小型化，ATP生物發光技術必將會在國內相關行業得到迅速普及 。
 

2.1  ATP生物發光法菌落計數

ATP廣泛存在於各種活的生物體中，活的菌體中也含有ATP。細菌死亡後，在細胞內酶的作用下，將很快被分解掉。ATP生物熒光檢測是基於生物發光體係的發光機理所設計，螢火蟲具有特殊的發光物質——蟲熒光素及熒光素酶，熒光素易被氧化
，它在熒光素酶催化下，由ATPjihuo，shizhiyuyangjiehe，yingguangsufenzizhongdedianziyueqiandaogaonengji
，chuyubuwendingdejifatai，dangdianzitiaohuidaodinengjishi
，jifachuyingguangguangzi。gaiguangdeqiangduyubeijiancewuzhizhongsuohandeATP量成正比，利用高靈敏度的儀器測定光的強度進行定量分析。因此，通過測定樣品中ATP的濃度，即可推算出活菌數。生物發光法的檢測步驟大體包括：棉拭取樣、樣品萃取、添加熒光素和熒光素酶混合物、測定生物發光量、做出標準曲線

、求(qiu)出(chu)濃(nong)度(du)和(he)活(huo)菌(jun)數(shu)。通(tong)常(chang)
，細(xi)菌(jun)表(biao)層(ceng)有(you)細(xi)胞(bao)膜(mo)和(he)細(xi)胞(bao)壁(bi)包(bao)裹(guo)
，故(gu)樣(yang)品(pin)未(wei)經(jing)處(chu)理(li)是(shi)不(bu)能(neng)測(ce)定(ding)的(de)。測(ce)定(ding)時(shi)需(xu)先(xian)將(jiang)樣(yang)品(pin)與(yu)微(wei)生(sheng)物(wu)用(yong)提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)混(hun)合(he)，使(shi)細(xi)胞(bao)膜(mo)和(he)細(xi)胞(bao)壁(bi)開(kai)孔(kong)，提(ti)取(qu)出(chu)ATPtiqushijishiyibiaomianhuoxingjiweijizhidezhuanyongshiji。ranhou，zaiyuyingguangsuheyingguangsumeishengwufaguangshijizuoyong，yongyingguangyicedingyufaguangshijifanyingdeshengwufaguangliang。

這種方法可自動化操作

，靈敏度高，可以達到10-12 mol/L

；檢測速度快，相比表麵皿培養法
，僅需十幾分鍾就可以完成一個樣本的檢測；檢測範圍廣，此種方法不僅可以檢測微生物
，還可以對食品生產設備的清潔度
、酵母菌，乳酸菌等菌種的發酵活性等進行檢測。沈陽中科靚馬生物工程有限公司從中科院遺傳與發育所引進了“含蟲光素基因的新型菌株及蟲光素酶的生產方法”發明專利，成功研發了具有我國自主知識產權的“ATP熒光法細菌總數快速檢測係統”，係統采用了先進的ATP生物發光技術

，隻要測定出相對熒光值，依據相對熒光值與細菌總數的標準曲線，幾分鍾內即可快速得出樣品中的細菌總數。2008年周愛玉等對手持式ATP生物熒光檢測儀進行研製
，取得了良好的結果。下圖即是兩款不同的類型，其中左側被稱之為掌上ATP發光法檢測儀，使檢測更加方便。

2.2 傳統菌落技術法

菌落總數的測定，一般將被檢樣品製成幾個不同的10倍遞增稀釋液，然後從每個稀釋液中分別取出1mL置於滅菌平皿中與營養瓊脂培養基混合，在一定溫度下，培養一定時間後（一般為48小時），記錄每個平皿中形成的菌落數量，依據稀釋倍數，計算出每克（或每ml）原始樣品中所含細菌菌落總數。
 

ATP生物發光法的應用範圍十分廣泛，現已應用於食品行業的多個領域。研究表明，ATP生物發光法與標準的細菌培養菌落計數法相比
，二者具有良好的相關性(r=0.98)，但怎樣細分細菌種類有一定的難度,還需要做大量的工作。利用這種方法可以對食品原料、肉類、水產品、蔬菜、飲料、酒類、酸奶等中微生物的含量進行定量。此外
，采用ATP生物發光法可快速
、簡便地檢測食品生產環境的清潔度。對ATP 含量的檢測是以相對發光值(Relative Light Unit ,簡稱RLU)表示的。隨著RLU值的降低
，微生物的檢出幾率也降低。實驗證明：如果將RLU值以100～1000作為界限
，RLU值不滿100時
，微生物檢出幾率為0，RLU值在100～1000範圍內時，微生物檢出幾率為30%，RLU值超過1000時，微生物檢出幾率為96%。根據這一結果，在日常對食品生產設備或與食品密切接觸設備清潔度的檢測時，可以將RLU值不滿100時視為安全，RLU值在100～1000範圍內時視為要引以重視和注意

，RLU值超過1000時視為處於微生物汙染的危險狀態，因此ATP 生物發光法十分適HACCP係統的清潔度檢測。此外，還可以用於酵母菌等對毒素的敏感性比較。近年來
，ATP生物發光技術在國內外倍受推崇，在美、ridengguoshipinxingyedezhiliangjiancekongzhilingyuguangfanyingyong，youxiaocujinshipinshengchanqiyetigaoshengchanxiaolvhejingjixiaoyi，suizhecifangfabuduangaijinhewanshan，shengwufaguangfakewangfazhanchengweiyizhongjiaoweilixiangdeweishengwujiancefangfaerdedaogengguangfandeyingyong，yibuduantigaochanpinzhiliang，quebaoshipinzhilianganquan。