透析袋預處理方法
(1)將透析管剪成適當長度,10-20cm的小段,即形成透析袋
(2)在大體積2%(m/V)碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中將透析袋煮沸10min
(3)將透析袋用蒸餾水徹底漂洗
(4)將透析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min
(5)將透析袋冷卻,存放於4攝氏度,應確保透析袋始終浸沒在液體中。
重要:從此步起用透析袋時一定要帶手套操作
(6)在使用前要用蒸餾水將透析袋裏外加以清洗。
用過的透析袋保存前需要怎麼處理?
用生理鹽水浸泡以去掉蛋白,並用蒸餾水清洗幹淨,然後置50%乙醇中保存即可;用完以後,要徹底洗幹淨,透析袋也可以保存在0.1%疊氮鈉(可防止微生物生長)裏;0.05%-0.1%疊氮鈉,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,公司的人建議前兩種保存比較好!
透析和透析袋的處理
touxizhixuyaoshiyongzhuanyongdebantoumojikewancheng。tongchangshijiangbantoumozhichengdaizhuang,jiangshengwudafenziyangpinrongyezhirudainei,jiangcitouxidaijinrushuihuohuanchongyezhong,yangpinrongyezhongdedafenziliangdeshengwudafenzibeijieliuzaidainei,eryanhexiaofenziwuzhibuduankuosantouxidaodaiwai,zhidaodaineiwailiangbiandenongdudadaopinghengweizhi。baoliuzaitouxi 袋內未透析出的樣品溶液稱為"保留液",袋(膜)外的溶液稱為"滲出液"或"透析液"。透析的動力是擴散壓,擴散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析 的速度反比於膜的厚度,正比於欲透析的小分子溶質在膜內外兩邊的濃度梯度,還正比於膜的麵積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。
透析膜可用動物膜和玻璃紙等,但用的最多的還是用纖維素製成的透析膜, 目前常用的是美國Union Carbide (聯合碳化物公司)和美國光譜醫學公司生產的各種尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋內的生物大分子的最小分子量,縮寫為MwCO)通常為1 萬左右。商品透析袋製成管狀,其扁平寬度為23 mm~50 mm不等。為防幹裂,出廠時都用10%的甘油處理過,並含有極微量的硫化物(0.1%)、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質,它們對蛋白質和其它生物活性物質有害,用前必須除去。
透析袋的處理:可先用50%乙醇煮沸1小時,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌,最後用蒸餾水衝洗即可使用。實驗證明,50%乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質特別有效。(也可先在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鍾,用蒸餾水徹底清洗後,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鍾。)使用後的透析袋洗淨後可存於4℃蒸餾水中,確保透析袋始終浸沒在溶液內。若長時間不用,可加少量NaN2,以防長菌。從此 時起取用透析袋必須戴手套。洗淨涼幹的透析袋彎折時易裂口,用時必須仔細檢查,不漏時方可重複使用。
新透析袋 如(ru)不(bu)作(zuo)如(ru)上(shang)的(de)特(te)殊(shu)處(chu)理(li),則(ze)可(ke)用(yong)沸(fei)水(shui)煮(zhu)五(wu)至(zhi)十(shi)分(fen)鍾(zhong),再(zai)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)洗(xi)淨(jing),即(ji)可(ke)使(shi)用(yong)。使(shi)用(yong)時(shi),一(yi)端(duan)用(yong)橡(xiang)皮(pi)筋(jin)或(huo)線(xian)繩(sheng)紮(zha)緊(jin),也(ye)可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)特(te)製(zhi)的(de)透(tou)析(xi)袋(dai)夾(jia)夾(jia)緊(jin),由(you)另(ling)一(yi)端(duan)灌(guan)滿(man)水(shui),用(yong)手(shou)指(zhi)稍(shao)加(jia)壓(ya),檢(jian)查(zha)不(bu)漏(lou),方(fang)可(ke)裝(zhuang)入(ru)待(dai)透(tou)析(xi)液(ye),通(tong)常(chang)要(yao)留(liu)三(san)分(fen)之(zhi)一(yi)至(zhi)一(yi)半(ban)的(de)空(kong)間(jian),以(yi)防(fang)透(tou)析(xi)過(guo)程(cheng)中(zhong),透(tou)析(xi)的(de)小(xiao)分(fen)子(zi)量(liang)較(jiao)大(da)時(shi),袋(dai)外(wai)的(de)水(shui)和(he)緩(huan)衝(chong)液(ye)過(guo)量(liang)進(jin)入(ru)袋(dai)內(nei) 將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質溶液透析過夜時,體積增加50%是正常的。為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些, 可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析,可在袋內放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液麵以下。
檢查透析效果的方法是:用1% BaCl2檢查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 檢查NaCl、KCl等
透析膜 (前處理方法如下):
1. 戴手套把透析膜剪成適當長度,浸在蒸餾水中 15 min 泡軟。
2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中,並加熱至 80℃,一邊攪拌至少 30 min。
3. 換到 10 mM Na2·EDTA 中浸泡 30 min,以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次。
4. 再用 80℃ 蒸餾水洗 30 min,然後換到 20% 酒精中,放在 4℃ 冰箱中保存。
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