免疫印跡技術又稱Western印跡法,它將凝膠電泳與固相免疫結合,首先通過蛋白質電泳技術將需要區分的蛋白質轉移至固相載體如NC膜等上,再借助酶免疫、放射免疫等技術進行測定。該法能分離分子大小不同的蛋白質並確定其分子質量,常用於檢測多種病毒抗體或抗原。
免疫印跡技術又稱Western印跡法,它將凝膠電泳與固相免疫結合,首先通過蛋白質電泳技術將需要區分的蛋白質轉移至固相載體如NC膜等上,再借助酶免疫、放射免疫等技術進行測定。該法能分離分子大小不同的蛋白質並確定其分子質量,常用於檢測多種病毒抗體或抗原。
免疫斑點試驗(dotimmunobindingassay,DIBA)是利用硝酸纖維素膜(NC膜)或乙酸纖維素膜作為固相支持物,進行抗原—抗體反應的免疫學檢測方法。該法具有微量、快速、經濟、方便等特點,可用於檢測抗體或抗原。
免(mian)疫(yi)斑(ban)點(dian)技(ji)術(shu)的(de)原(yuan)理(li)是(shi)硝(xiao)酸(suan)纖(xian)維(wei)素(su)膜(mo)和(he)醋(cu)酸(suan)纖(xian)維(wei)素(su)膜(mo)具(ju)有(you)很(hen)強(qiang)的(de)靜(jing)電(dian)吸(xi)附(fu)力(li),在(zai)中(zhong)性(xing)條(tiao)件(jian)下(xia)即(ji)可(ke)有(you)效(xiao)地(di)吸(xi)附(fu)蛋(dan)白(bai)質(zhi)等(deng)生(sheng)物(wu)大(da)分(fen)子(zi),因(yin)而(er)將(jiang)抗(kang)原(yuan)吸(xi)附(fu)於(yu)纖(xian)維(wei)素(su)膜(mo)後(hou),就(jiu)可(ke)利(li)用(yong)纖(xian)維(wei)素(su)膜(mo)作(zuo)為(wei)固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)進(jin)行(xing)抗(kang)原(yuan)—抗體反應。當加入抗體後(即ji可ke與yu膜mo上shang的de抗kang原yuan結jie合he,然ran後hou再zai加jia入ru帶dai有you標biao記ji物wu的de抗kang體ti,使shi標biao記ji通tong過guo抗kang抗kang體ti和he相xiang應ying抗kang體ti的de結jie合he間jian接jie地di交jiao聯lian於yu纖xian維wei素su膜mo上shang。加jia入ru標biao記ji物wu相xiang應ying的de底di物wu後hou,標biao記ji物wu即ji可ke與yu底di物wu作zuo用yong形xing成cheng不bu溶rong性xing產chan物wu,呈cheng現xian斑ban點dian狀zhuang著zhe色se,從cong而er判pan定ding結jie果guo。
根據所用的標記物不同,可分為辣根過氧化物酶免疫斑點試驗(使用辣根過氧化物酶作為抗抗體的標記物)、堿性磷酸酶免疫斑點試驗(使用堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶複合物作為酶標記物)和金銀染色免疫斑點試驗(使用膠體金作為抗抗體的標記物)等。其中,最常用的是以辣根過氧化物酶標記係統為基礎的免疫斑點試驗。
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